| 【中文题名】 | 乙型肝炎患者外周血CD5～+B细胞的研究 |
| 【英文题名】 | The Study of CD5～+B cells in Peripheral Blood of Patients with Hepatitis B |
| 【学科专业】 | 临床检验与诊断学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2001-9-6 |
| 【中关键词】 | CD5B细胞,乙型肝炎,肝功能指标,CD5,mRNA,自身抗体 |
| 【英关键词】 | CD5+B cell,Hepatitis B,Liver function indexes,,, CD5 mRNA,Autoantibody, |
| 【分类导航】 | 医药、卫生>临床医学>诊断学>实验室诊断>免疫学检验> |
| 【论文摘要】 |
CD5~+B细胞由早期的前体B细胞发育而来，不依赖骨髓，是近年来证实的
一类具有重要功能的B细胞亚群。这种CD5~+B细胞能产生很多自身抗体，在自
身免疫性疾病的发病中起重要作用。国外最新研究提示，HBV、HCV感染患者
外周血CD5~+B细胞显著升高，循环中CD5~+B细胞的增加常伴随病情加重。这些
新发现表明，CD5~+B细胞可能在肝病及相关疾病的急性和慢性病理反应中发挥
重要作用。
我国是乙型肝炎高发区，CD5~+B细胞是否参与了慢性肝病的发病以及乙肝
患者外周血CD5~+B细胞百分率的高低与病情发展的关系如何，值得探索和研究。
本项研究利用磁式细胞分选器分离B淋巴细胞，应用免疫组化技术检测了
50例乙型肝炎患者外周血CD5~+B细胞，在总B细胞中所占百分率分别为：急性
乙型肝炎（24.6±4.2）％；慢性乙型肝炎（38.8±8.0）％；慢性重症乙肝（44.4
±8.4）％；乙肝后肝硬化（64.7±7.5）％。10例正常对照组为（23.0±3.1）％。
结果显示，急性乙肝组与正常对照组无显著性差别，其... |
| 【论文题纲】 |
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中文摘要 |
5-7 |
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英文摘要 |
7-9 |
|
前言 |
9-11 |
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第一部分 乙型肝炎患者外周血CD5~+B细胞及其与肝功能的相关性 |
11-21 |
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材料与方法 |
11-14 |
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一、 研究对象 |
11 |
|
二、 标本采集 |
11 |
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三、 主要实验试剂和仪器 |
11-12 |
|
四、 肝功能检测 |
12 |
|
五、 外周血单个核细胞的分离 |
12 |
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六、 磁式细胞分选器（MACS）分离B淋巴细胞 |
12-13 |
|
1． 磁化标记 |
12-13 |
|
2． 磁性分离 |
13 |
|
七、 流式细胞仪鉴定B细胞分离纯度 |
13 |
|
八、 免疫组化检测CD5~+B细胞百分率 |
13 |
|
九、 统计学处理 |
13-14 |
|
结果 |
14-19 |
|
一、 磁式细胞分选器分离B细胞纯度 |
14-16 |
|
二、 免疫组化法检测CD5~+B细胞结果 |
16-17 |
|
三、 CD5~+B细胞百分率比较 |
17 |
|
四、 慢性乙型肝炎与慢性重症乙型肝炎患者外周血CD5~+B细胞百分率与ALT的关系 |
17-18 |
|
五、 慢性乙型肝炎与慢性重症乙型肝炎患者外周血CD5~+B细胞百分率与胆红素的关系 |
18 |
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六、 乙肝后肝硬化患者CD5~+B细胞与肝功能的关系 |
18-19 |
|
讨论 |
19-21 |
|
第二部分 乙肝患者外周血B淋巴细胞CD5mRNA表达水平的研究 |
21-28 |
|
材料与方法 |
21-24 |
|
一、 主要实验仪器及试剂 |
21 |
|
二、 标本来源 |
21 |
|
三、 PCR引物设计 |
21-22 |
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四、 B细胞分离纯化 |
22 |
|
五、 总RNA提取 |
22 |
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六、 逆转录合成cDNA第一链 |
22-23 |
|
七、 半定量PCR反应 |
23 |
|
八、 扩增产物检测 |
23 |
|
九、 统计学分析 |
23-24 |
|
结果 |
24-26 |
|
一、 RT-PCR方法的建立 |
24 |
|
二、 最佳循环数的选择 |
24-25 |
|
三、 RT-PCR产物半定量 |
25-26 |
|
讨论 |
26-28 |
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第三部分 乙肝患者外周血CD5~+B细胞百分率和CD5mRNA与自身抗体的相关性研究 |
28-36 |
|
材料与方法 |
28-30 |
|
一、 研究对象 |
28 |
|
二、 标本采集 |
28 |
|
三、 主要实验试剂和仪器 |
28-29 |
|
四、 抗CaM自身抗体的测定方法 |
29 |
|
五、 抗CyPA自身抗体的测定方法 |
29 |
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六、 其它自身抗体测定方法 |
29 |
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七、 CD5~+B细胞百分率和CD5mRNA测定 |
29 |
|
八、 统计与分析 |
29-30 |
|
结果 |
30-35 |
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一、 方法学考核 |
30 |
|
1、 抗CaM的特异性和精密度 |
30 |
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2、 抗CyPA的特异性和精密度 |
30 |
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二、 自身抗体阳性率 |
30-31 |
|
三、 自身抗体的定量检测 |
31-33 |
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四、 CD5~+B细胞百分率，CD5mRNA水平与ACA、Anti-CaM、Anti-CyPA、RF、抗LSP的相关分析 |
33-35 |
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讨论 |
35-36 |
|
结论 |
36-37 |
|
参考文献 |
37-41 |
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综述： 人CD5~+B细胞的研究进展 |
41-48 |
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研究生学习期间学术成果 |
48-49 |
|
致谢 |
49 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.178190 |
