| 【中文题名】 | 结核分枝杆菌烯酰辅酶A水合酶的克隆、表达及其性质研究 |
| 【英文题名】 | Cloning, Expression and Characterization of the Gene Encoding Enoyl-CoA Hydratase in Mycobacterium Tuberculosis |
| 【学科专业】 | 微生物与生化药学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2007-8-29 |
| 【中关键词】 | 结核分枝杆菌,烯酰辅酶A水合酶,圆二色谱,同源建模,蛋白质相互作用网络, |
| 【英关键词】 | Mycobacterium tuberculosis,enoyl-CoA hydratase,circular dichroism Spectroscopy,homology modeling,protein-protein interaction networks, |
| 【分类导航】 | 医药、卫生>内科学>结核病>>> |
| 【论文摘要】 |
结核病(tuberculosis，简称TB)严重影响人类健康潜伏期感染是其化疗疗程偏长、疗效不佳及化疗后再次复发的主要原因，也是结核病控制形势严峻的主要因素之一。分枝菌酸(mycolic acid)是结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)的重要组分之一，其分布和精美的结构决定着结核分枝杆菌在敌对的环境中受保护的程度。鉴于前人所做的工作，目前比较一致的意见是：与结核分枝杆菌细胞壁合成相关的酶类，尤其是与脂肪酸合成和降解相关的酶类是筛选抗结核杆菌药物的理想靶标。烯酰辅酶A水合酶(enoyl-CoA hydratase，echA，EC4.2.1.17)是结核分枝杆菌的分枝菌酸代谢中的一个关键酶，它不仅参与脂肪酸的β-氧化，还与赖氨酸降解、异亮氨酸降解、缬氨酸降解，以及色氨酸代谢、β-丙氨酸代谢相关。
根据GenBank登录的H37Rv echA18基因片段(GeneID：888123)设计一对特异性的引物，以H37Rv基因组为模板，热启动PCR方法扩增echA18基因序列，经乙酸铵方法纯化扩增产物，酶切PCR产物和pET32a(+)，将扩增的片段连入pET32a(+)... |
| 【论文题纲】 |
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摘要 |
5-7 |
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Abstract |
7-9 |
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第一章 综述 |
9-21 |
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1.1 引言 |
9-12 |
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1.2 结核杆菌脂肪酸代谢分析 |
12-13 |
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1.3 烯酰辅酶A水合酶研究现状与生物学性质 |
13-18 |
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1.4 烯酰辅酶A水合酶与抗结核新药的开发 |
18-19 |
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1.5 结构基因组学与新药筛选 |
19-21 |
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第二章 绪论 |
21-22 |
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2.1 研究目的和意义 |
21 |
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2.2 研究范围和内容 |
21-22 |
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第三章 实验材料和方法 |
22-29 |
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3.1 试剂和材料 |
22-23 |
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3.2 方法 |
23-29 |
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第四章 实验结果与分析 |
29-47 |
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4.1 重组质粒的构建 |
29-32 |
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4.2 重组蛋白的表达及及其表达形式鉴定 |
32-35 |
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4.3 重组蛋白纯化及鉴定 |
35-36 |
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4.4 重组质粒对宿主菌的影响 |
36-37 |
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4.5 MTB echA18的一级结构的分析 |
37-39 |
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4.6 echA18二级结构分析 |
39-42 |
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4.7 echA18的三级结构的模建 |
42-44 |
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4.8 蛋白质相互作用网络分析 |
44-47 |
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第五章 讨论 |
47-50 |
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5.1 echA18基因的表达纯化 |
47 |
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5.2 H37Rv echA18结构研究 |
47-48 |
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5.3 蛋白质相互作用网络分析 |
48-50 |
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第六章 结论及展望 |
50-52 |
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参考文献 |
52-55 |
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致谢 |
55 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.178811 |
