| 【中文题名】 | 青岛文昌鱼肌肉生化分析及其功能基因的研究 |
| 【英文题名】 | Biochemistry and Functional Genes Analysis of Musculature from Amphioxus (Branchiostoma Belcheri Tsingtauense) |
| 【学科专业】 | 海洋生物学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2007-8-23 |
| 【中关键词】 | 快、慢肌,酶组织化学,克隆,表达,青岛文昌鱼（Branchiostoma,belcheri |
| 【英关键词】 | Fast/Slow muscle,Enzyme histochemistry,Cloning,Expression,Amphioxus （Branchiostoma belcheri tsingtauense）, |
| 【分类导航】 | 生物科学>生物化学>器官生物化学>肌肉组织的生物化学>> |
| 【论文摘要】 |
本论文主要对青岛文昌鱼(Branchiostoma belcheri tsingtauense)肌肉组织进行了酶组织化学实验和电镜观察,分离了青岛文昌鱼肌球蛋白重链基因异构体并将其重组表达;克隆了青岛文昌鱼新生肽链相关复合体α亚基基因,并检测了其时空表达情况。
根据NADH酶组化实验可以将文昌鱼的肌细胞分成两类,即蓝紫色、有氧代谢型的浅层肌和基本不着色、无氧代谢型的深层肌。电镜观察进一步验证了酶组化的结果,并首次发现浅层肌和中间肌细胞肌丝密度明显大于深层肌。而mATPase组化实验没能对肌纤维进行分类,这也许是由于实验的pH条件不是文昌鱼的肌纤维ATP酶活的pH;或者其很容易失活;或者该酶的活化需要不同于其它动物的金属离子的缘故。
克隆到三条对应于肌球蛋白重链尾部保守区的异构体,其中两条是首次报道。这三条异构体都属于II类肌球蛋白并和脊椎、无脊椎动物的多种类型的肌球蛋白分子有较高的同源性;利用原核表达系统对异构体进行重组表达,获得了可溶性的表达蛋白,为制备文昌鱼肌球蛋白特异性抗体打下了基础。
从青岛文昌鱼成体中分离到了新生肽链相关复合体α亚基的全长cDNA,并检测了其时空表达... |
| 【论文题纲】 |
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摘要 |
4-5 |
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Abstract |
5-8 |
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第一章 引言 |
8-30 |
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1 文昌鱼-研究脊椎动物起源和进化的理想模式生物 |
8-11 |
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2 横纹肌的结构及收缩机制 |
11-14 |
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3 横纹肌的分类及研究进展 |
14-21 |
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4 新生肽链相关复合体（NAC）概述及其在肌肉发育中的作用 |
21-24 |
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5 文昌鱼肌肉研究概述 |
24-30 |
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第二章 青岛文昌鱼成体躯干肌的酶组织化学与电镜分析 |
30-38 |
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1 材料与方法 |
30-33 |
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2 实验结果 |
33-36 |
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2.1 冷冻切片NADH酶染色结果 |
33-34 |
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2.2 电镜下超微结构观察结果 |
34-35 |
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2.3 冷冻切片mATPase 组化染色结果 |
35-36 |
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3 讨论 |
36-38 |
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第三章 青岛文昌鱼MyHC 基因异构体的克隆、重组表达与分析 |
38-57 |
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1 材料与方法 |
38-45 |
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2 实验结果 |
45-54 |
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2.1 青岛文昌鱼MyHC 基因片段的克隆 |
45-51 |
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2.2 青岛文昌鱼MyHC 基因片段的原核重组表达 |
51-54 |
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3 讨论 |
54-57 |
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第四章 青岛文昌鱼αNAC 基因的克隆、表达与进化分析 |
57-68 |
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1 材料与方法 |
57-59 |
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2 实验结果 |
59-66 |
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2.1 特异性引物的设计 |
59-62 |
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2.2 青岛文昌鱼αNAC 基因的克隆与系统进化分析 |
62-65 |
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2.3 αNAC 的时空表达情况 |
65-66 |
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3 讨论 |
66-68 |
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参考文献 |
68-84 |
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发表文章情况 |
84-85 |
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致谢 |
85 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.34460 |
