嗜线虫致病杆菌杀虫毒素的初步分离纯化及杀虫机理的研究
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嗜线虫致病杆菌杀虫毒素的初步分离纯化及杀虫机理的研究
作者:南宫自艳 Publish: 2005-8-10 Hits:-
【中文题名】 嗜线虫致病杆菌杀虫毒素的初步分离纯化及杀虫机理的研究
【英文题名】 Purification and Insecticidal Mechanism of Insecticidal Proteins from Xenorhabdus Nematophila
【学科专业】 农业昆虫与害虫防治
【论文级别】 硕士论文
【投稿时间】 2005-8-10
【中关键词】 嗜线虫致病杆菌,杀虫毒素,杀虫机理,,,
【英关键词】 Xenorhabdus nematophila,Insecticidal proteins,Insecticidal mechanism,
【分类导航】 农业科学>植物保护>各种防治方法>生物防治>微生物病源的利用>
【论文摘要】 昆虫病原线虫共生菌是一种寄存于昆虫病原线虫(Entomopathogenic Nematodes, EPNs)肠道内的共生细菌,革兰氏染色阴性,属肠道杆菌科(Enterobacteriaceae)。线虫携带共生菌进入寄主昆虫体内,并将共生菌释放到寄主的血腔中;共生菌在昆虫血腔内繁殖,产生杀虫毒素,导致昆虫患败血症并在48h内死亡;共生菌能分解寄主的营养物质,提供线虫所需的营养;同时共生菌产生的抗菌素,能抑制其它杂菌的侵染,为线虫的生长、发育和繁殖提供理想的环境。 嗜线虫致病杆菌(Xenorhabdus nematophila)HB310菌株是从河北省土壤中筛选出的一株对多种昆虫具有高毒力的昆虫病原线虫共生菌。利用85%饱和硫酸铵盐析法获得该菌胞内蛋白提取物,生物测定结果表明其具有胃毒活性和血腔杀虫活性。通过制备型非变性凝胶电泳对胞内蛋白提取物进行分离和纯化,得到了4种有杀虫活性的蛋白毒素(毒素Ⅰ、毒素Ⅱ、毒素Ⅲ、毒素Ⅶ)。毒素Ⅰ和毒素Ⅱ对棉铃虫初孵幼虫、3龄小菜蛾、4龄菜青虫有明显的胃毒活性,但没有血腔毒性;毒素Ⅲ和毒素Ⅶ对5龄大蜡螟、5龄棉铃虫幼虫有很强的血腔注射毒性,但没有胃毒活性。 ...
【论文题纲】
1 引言 6-10
2 材料与方法 10-17
2.1 实验材料 10-11
2.1.1 供试昆虫 10
2.1.2 供试菌株 10
2.1.3 培养基 10
2.1.4 试剂 10
2.1.5 仪器及透析袋 10-11
2.1.6 石蜡切片试剂的配制 11
2.2 实验方法 11-17
2.2.1 HB310菌株胞内蛋白的分离纯化及杀虫活性测定 11-14
2.2.2 HB310菌株毒素蛋白对昆虫中肠组织病理学影响 14-16
2.2.3 HB310菌株毒素蛋白对昆虫血腔组织病理学影响 16-17
3 结果与分析 17-29
3.1 HB310菌株胞内蛋白的分离纯化及杀虫活性测定 17-20
3.1.1 HB310菌株发酵液和胞内蛋白提取物的杀虫活性 17-18
3.1.2 HB310菌株胞内蛋白提取物的native-PAGE及SDS-PAGE 18-19
3.1.3 HB310菌株胞内蛋白纯化物的胃毒活性 19
3.1.4 HB310菌株胞内蛋白纯化物的血腔活性 19-20
3.2 HB310菌株胃毒素对昆虫的中肠组织病理学影响 20-26
3.2.1 毒素Ⅱ对棉铃虫的生长发育的影响 20-21
3.2.2 毒素Ⅱ对棉铃虫中肠围食膜的影响 21-22
3.2.3 毒素Ⅱ对棉铃虫中肠组织的影响 22-24
3.2.4 毒素Ⅱ对小菜蛾的中肠组织的影响 24-25
3.2.5 毒素Ⅱ对菜青虫的中肠组织的影响 25-26
3.3 HB310菌株血腔毒素对昆虫的组织病理学影响 26-29
3.3.1 HB310菌株及其毒素蛋白对大蜡螟组织及血淋巴的影响 26-29
4 讨论 29-33
4.1 关于共生菌杀虫毒素的讨论 29
4.2 关于共生菌胃毒素对昆虫中肠组织病理学影响的讨论 29-30
4.3 关于共生菌血腔毒素对昆虫中肠组织病理学影响的讨论 30-31
4.4 问题与展望 31-33
5 结论 33-34
参考文献 34-39
发表文章 39-40
作者简介 40-41
致谢 41
【DOI】 LunWen.ID:2.2008.152615
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