| 【中文题名】 | 时间分辨荧光免疫分析新方法研究 |
| 【英文题名】 | Studies on the New Methods of Time-Resolved Fluoroimmunoassay |
| 【学科专业】 | 分析化学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2005-10-15 |
| 【中关键词】 | 纳米荧光探针,时间分辨荧光免疫分析,乙型肝炎表面抗原,三碘甲状腺原氨酸,, |
| 【英关键词】 | Nano-fluorescence probe,Time-resolved fluoroimmunoassay,hepatitis Bsurface antigen,3,3’,5-Triiodo-L-thyronine, |
| 【分类导航】 | 数理科学和化学>化学>分析化学>仪器分析法（物理及物理化学分析法）>光化学分析法（光谱分析法）> |
| 【论文摘要】 | 时间分辨荧光免疫分析法是使用具有荧光寿命长、荧光发光的Stokes 位移大、特征峰非常尖锐等特点的稀土配合物作为标记物,可以通过延迟测量时间的方法,有效地消除背景荧光的干扰。因此时间分辨荧光免疫分析法具有比其它免疫分析方法更高的灵敏度。
纳米荧光探针由于具有荧光发光强度大、光化学稳定性强以及颜色可调等特点也在生命科学中显示出广阔的应用前景。
本论文的第一部分工作是以共价键合的方式将铕荧光配合物(BHHCT-Eu~(3+))键合在纳米级的硅胶微粒中从而制成具有强荧光性的纳米硅胶微粒,在对其性质进行了系统表征的基础上,探讨了其作为一种新型荧光探针用于生物标记及在高灵敏度时间分辨荧光免疫分析中的应用。使用纳米荧光微粒标记链亲合素,建立了人血清中乙肝表面抗原(HBsAg)的高灵敏度时间分辨荧光免疫测定法。该测定法的相对标准偏差小于10%,最小检测浓度为23 pg/ml,血清样品的添加回收率在80-110% 范围内,与直接以BHHCT-Eu3+为荧光探针所测定结果的相关性也很好。
本论文还建立了以铕荧光标记物DTBTA-Eu3+为能量给与体,以有机荧光标记物Cy5 为能量接受体的竞争型均相时间分辨荧光免疫分... |
| 【论文题纲】 |
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第一章 文献综述 |
10-44 |
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1.1 免疫分析法概述 |
10-16 |
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1.1.1 免疫分析法种类 |
10-12 |
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1.1.2 免疫分析法测定原理 |
12-15 |
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1.1.3 免疫分析法测定形式 |
15-16 |
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1.2 时间分辨荧光免疫分析法 |
16-28 |
|
1.2.1 稀土离子配合物的发光机理及特征 |
16-17 |
|
1.2.2 时间分辨荧光测定原理 |
17-18 |
|
1.2.3 时间分辨荧光免疫分析法的应用及进展 |
18-23 |
|
1.2.4 目前常用的稀土荧光标记物 |
23-28 |
|
1.3 纳米生物标记物的研究进展 |
28-33 |
|
1.3.1 胶体金标记物 |
29-30 |
|
1.3.2 发光量子点 |
30-32 |
|
1.3.3 包有荧光分子的纳米微球 |
32-33 |
|
1.4 本论文的目的和意义 |
33-34 |
|
参考文献 |
34-44 |
|
第二章 一种共价键合型β-二酮-Eu~(3+)纳米荧光探针的制备及应用 |
44-70 |
|
2.1 共价键合型β-二酮-Eu~(3+)纳米荧光微球的制备 |
45-58 |
|
2.1.1 引言 |
45 |
|
2.1.2 实验部分 |
45-50 |
|
1. 仪器与试剂 |
45-46 |
|
2. 纳米硅胶微粒的制备 |
46-47 |
|
3. 条件实验考察 |
47-50 |
|
4. 小结 |
50 |
|
2.1.3 纳米微粒的表征 |
50-57 |
|
1. 纳米微粒的形态及大小 |
50-51 |
|
2. 纳米微粒的荧光性质 |
51-53 |
|
3. 纳米微粒的紫外吸收光谱 |
53-54 |
|
4. 纳米微粒的光稳定性 |
54-56 |
|
5. 纳米微粒的荧光测定灵敏度 |
56-57 |
|
2.1.4 小结 |
57-58 |
|
2.2 共价键合型纳米荧光探针在时间分辨荧光免疫分析中的应用 |
58-67 |
|
2.2.1 引言 |
58 |
|
2.2.2 实验部分 |
58-60 |
|
1. 试剂、仪器及测定条件 |
58-59 |
|
2. 利用纳米稀土荧光微粒标记链亲和素(SA) |
59 |
|
3. 生物素标记豚鼠抗人HBsAg 抗体的制备 |
59 |
|
4. 人血清中HBsAg 的测定 |
59-60 |
|
2.2.3 结果与讨论 |
60-65 |
|
1. 纳米微粒标记链亲和素的条件实验 |
61 |
|
2. 最佳分析条件的选择 |
61-62 |
|
3. 血清样品的测定 |
62-65 |
|
2.2.4 小结 |
65-67 |
|
参考文献 |
67-70 |
|
第三章 使用新型稀土荧光标记物的竞争型均相时间分辨荧光免疫分析法测定人血清中的T3含量 |
70-81 |
|
3.1 引言 |
70-72 |
|
3.2 实验部分 |
72-74 |
|
1. 试剂、仪器及测定条件 |
72-73 |
|
2. 使用NHS-Cy5 标记抗T3 单克隆抗体 |
73 |
|
3. 使用 DTBTA-Eu~(3+)标记T3-BSA 结合体 |
73-74 |
|
4. 人血清中 T3 含量测定 |
74 |
|
3.3 结果与讨论 |
74-79 |
|
1. 能量传递给与体及接受体的吸收及发射光谱图 |
74-76 |
|
2. 最佳测定条件的确定 |
76 |
|
3. 血清中 T3 含量的测定 |
76-79 |
|
3.4 小结 |
79-80 |
|
参考文献 |
80-81 |
|
第四章 可用于生成稀土荧光配合物的新型配位体的合成 |
81-95 |
|
4.1 引言 |
81-82 |
|
4.2 N,N,N,’N-’[2,6-二(3-’氨甲基-1-’吡唑基)-4-(联苯基)吡啶]四(乙酸)的合成 |
82-89 |
|
4.2.1 试剂及测试仪器 |
82-83 |
|
4.2.2 N,N,N,’N-’[2,6-二(3-’氨甲基-1-’吡唑基)-4-(联苯基)吡啶]四(乙酸)的合成 |
83-87 |
|
4.2.3 结果与讨论 |
87-89 |
|
1. 荧光性质 |
87-88 |
|
2. 检测灵敏度 |
88-89 |
|
4.3 配位体 N,N,N,’N-’[2,6-二(3-氨甲基-1?-吡唑基)-4-(苄苯基)吡啶]四(乙酸的合成 |
89-92 |
|
1. 试剂与仪器 |
89-90 |
|
2. 配位体 N,N,N,’N-’[2,6-二(3-氨甲基-1?-吡唑基)-4-(苄苯基)吡啶]四(乙酸)的合成 |
90-92 |
|
参考文献 |
92-95 |
|
结论 |
95-98 |
|
作者简介 |
98 |
|
硕士期间发表文章及申请专利 |
98-99 |
|
| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.49923 |
