| 【中文题名】 | 大花蕙兰组织培养的关键性技术研究 |
| 【英文题名】 | Study on the Crucial Techniques of Cymbidium Grandiflorium in Tissue Culture |
| 【学科专业】 | 生物医学工程 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2004-10-15 |
| 【中关键词】 | 大花蕙兰,褐变,热激,原球茎,苯丙氨酸裂解酶,多酚氧化酶 |
| 【英关键词】 | Cymbidium Grandiflorium, Browning, phenylalanine ammonia-lyase, Heat Shock, polyphenoloxidase, protocorm like-body, |
| 【分类导航】 | 农业科学>园艺>观赏园艺(花卉和观赏树木)>多年生花卉类>其他花卉类>兰科植物 |
| 【论文摘要】 | 本文主要针对大花蕙兰组织培养中的几个关键性技术问题,分别以茎尖和假鳞茎为外植体,探讨了优化配方、原球茎增殖、褐变机理以及褐变防止等问题,重点研究了褐变的机理,为大花蕙兰的工业化育苗提供了技术参考依据,同时也为木本植物中常见的褐变问题的解决奠定了理论基础。
主要的研究结果如下:
在对大花蕙兰最佳配方的培养基筛选过程中,得到如下结论:
原球茎诱导培养阶段:最适培养基为MS + BA1.5mg/l + NAA0.1 mg/l,2个月后启动率可达81.4%;
原球茎增殖培养阶段:最适培养基为MS+BA1.0mg/l+NAA0.03mg/l,原球茎增殖最快,一个月后增殖量可达5.8;
原球茎分化培养阶段:MS + BA0.5mg/l + NAA0.8mg/l最好,一个月分化率可达89.4%;
生根培养阶段:促进根生长的最适培养基是1/2MS + BA0.3mg/l + NAA0.5mg/l+香蕉泥150g/l,根系粗壮。
各种因素对原球茎增殖的影响:液体振荡培养、薄层切割培养、5个大小的切块利于原球茎的增殖(见图3.1~图3.3)。
结合分析对照组和热激组的总酚含量(TP)、褐变度(BD... |
| 【论文题纲】 |
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中文摘要 |
4-5 |
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英文摘要 |
5-7 |
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英文缩略词 |
7-11 |
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1 绪 论 |
11-23 |
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1.1 植物组织培养 |
11-12 |
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1.1.1 植物组织培养概念 |
11 |
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1.1.2 植物组织培养的应用与意义 |
11-12 |
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1.2 兰花组织培养的研究 |
12-20 |
|
1.2.1 国内外兰花组培研究概况 |
12-13 |
|
1.2.2 兰花组织培养的优点 |
13 |
|
1.2.3 兰花组织培养的关键问题 |
13-20 |
|
1.3 本文的主要研究工作 |
20-23 |
|
1.3.1 本文的研究意义 |
20 |
|
1.3.2 课题的研究思路与构想 |
20-21 |
|
1.3.3 本课题的创新之处 |
21 |
|
1.3.4 本课题的技术路线 |
21-23 |
|
2 大花蕙兰的快速繁殖技术研究 |
23-34 |
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2.1 材料 |
23-25 |
|
2.1.1 实验材料 |
23 |
|
2.1.2 主要试剂 |
23 |
|
2.1.3 培养基的配制及接种 |
23-25 |
|
2.1.4 主要仪器 |
25 |
|
2.1.5 培养条件 |
25 |
|
2.2 实验方法 |
25-27 |
|
2.2.1 技术路线 |
25 |
|
2.2.2 茎尖的消毒 |
25 |
|
2.2.3 正交实验设计筛选原球茎的诱导培养基 |
25-26 |
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2.2.4 正交实验设计筛选原球茎增殖培养基 |
26 |
|
2.2.5 原球茎分化培养基 |
26-27 |
|
2.2.6 诱导生根培养 |
27 |
|
2.3 实验结果与分析 |
27-32 |
|
2.3.1 原球茎诱导的最佳配方的数学运算 |
27-29 |
|
2.3.2 原球茎增殖的最佳配方的数据分析 |
29-31 |
|
2.3.3 原球茎分化的最佳配方 |
31-32 |
|
2.3.4 诱导生根的最佳配方 |
32 |
|
2.4 讨论 |
32-34 |
|
3 各种因素对大花蕙兰原球茎增殖的影响 |
34-39 |
|
3.1 实验材料 |
34-35 |
|
3.1.1 实验材料 |
34 |
|
3.1.2 主要试剂 |
34 |
|
3.1.3 培养基的配制及接种 |
34 |
|
3.1.4 主要仪器设备 |
34 |
|
3.1.5 培养条件 |
34-35 |
|
3.2 实验内容 |
35 |
|
3.2.1 培养方式大花蕙兰原球茎增殖的影响 |
35 |
|
3.2.2 切割方式对大花蕙兰原球茎增殖的影响 |
35 |
|
3.2.3 切块大小对大花蕙兰原球茎增殖的影响 |
35 |
|
3.3 结果与分析 |
35-37 |
|
3.3.1 原球茎增殖量的计算 |
35 |
|
3.3.2 培养方式大花蕙兰原球茎增殖的影响 |
35-36 |
|
3.3.3 切割方式对大花蕙兰原球茎增殖的影响 |
36-37 |
|
3.3.4 切块大小对大花蕙兰原球茎增殖的影响 |
37 |
|
3.4 讨论 |
37-39 |
|
4 褐变机理的初步探索 |
39-48 |
|
4.1 实验材料 |
40 |
|
4.1.1 实验材料 |
40 |
|
4.1.2 主要试剂 |
40 |
|
4.1.3 主要仪器设备 |
40 |
|
4.1.4 培养基的配制及接种 |
40 |
|
4.1.5 培养条件 |
40 |
|
4.2 实验内容 |
40-42 |
|
4.2.1 实验材料处理方法 |
41 |
|
4.2.2 假鳞茎的组织培养 |
41 |
|
4.2.3 总酚(TP)的测定 |
41 |
|
4.2.4 褐变度(BD)的测定 |
41 |
|
4.2.5 PAL活力测定 |
41-42 |
|
4.3 结果与分析 |
42-45 |
|
4.3.1 原球茎诱导培养期间酚类物质总量的分析 |
42-43 |
|
4.3.2 原球茎诱导培养期间BD变化分析 |
43 |
|
4.3.3 大花惠兰诱导培养期间PPO活性的变化 |
43-44 |
|
4.3.4 大花惠兰诱导培养期间PAL酶活性的变化 |
44-45 |
|
4.4 讨论 |
45-48 |
|
4.4.1 褐变机理的初步探讨 |
45-46 |
|
4.4.2 热激的褐变抑制机理探讨 |
46-48 |
|
5 褐变控制的研究 |
48-52 |
|
5.1 材料 |
48-49 |
|
5.1.1 实验材料 |
48 |
|
5.1.2 主要试剂 |
48 |
|
5.1.3 培养基的配制及接种 |
48 |
|
5.1.4 主要仪器设备 |
48 |
|
5.1.5 培养条件 |
48-49 |
|
5.2 实验内容 |
49 |
|
5.2.1 对培养材料进行预处理 |
49 |
|
5.2.2 在培养基中加入还原性物质或吸附剂 |
49 |
|
5.2.3 对外植体进行热激处理 |
49 |
|
5.3 结果与分析 |
49-50 |
|
5.4 讨论 |
50-52 |
|
6 结论及后续工作建议 |
52-55 |
|
6.1 本文的主要研究内容和结果 |
52 |
|
6.2 后续工作建议 |
52-55 |
|
致 谢 |
55-56 |
|
参考文献 |
56-61 |
|
附 录 |
61-63 |
|
| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.160002 |