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蝴蝶兰的离体培养研究

Form: 论文之家作者：吕晓辉 Publish: 2007-8-24 Hits:-

【中文题名】

蝴蝶兰的离体培养研究

【英文题名】

【学科专业】

细胞生物学

【论文级别】

硕士论文

【投稿时间】

2007-8-24

【中关键词】

蝴蝶兰,原球茎,愈伤组织,体细胞胚胎发生,褐化,

【英关键词】

Phalaenopsis,protocorm-like body （PLB）,callus,somatic embryogenesis,browning,

【分类导航】

农业科学>园艺>观赏园艺（花卉和观赏树木）>多年生花卉类>其他花卉类>兰科植物

【论文摘要】

蝴蝶兰是兰科(Orchidaceae)蝴蝶兰属(Phalaenopsis)中一种重要的观赏植物。离体培养是蝴蝶兰工厂化育苗的一个重要途径。本研究利用组织培养技术，对蝴蝶兰进行离体培养，并就离体培养中体细胞胚胎的发生、褐化等相关问题进行研究，取得如下结果。探讨了离体状态下，影响蝴蝶兰休眠花梗腋芽萌发的因素。研究发现，外源激素是诱导萌发必不可少的因素。MS+5.0 mg/L BA+0.5 mg/L NAA培养基较适合休眠芽的诱导。中间部位的花梗腋芽较上部腋芽容易萌发。以蝴蝶兰的花梗腋芽为外植体，诱导休眠芽萌发得到不定芽。对不定芽的无菌叶片进行原球茎诱导。利用正交设计方法探讨了培养基类型、6-BA、NAA、AC四种因素对蝴蝶兰叶片诱导原球茎的影响。结果表明：6-BA是影响蝴蝶兰叶片诱导原球茎的主要因素，培养基类型次之，NAA和AC的影响程度较弱。蝴蝶兰叶片诱导原球茎的最优组合是MS+5.0 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+0.1 g/L AC+150ml/L CM。研究了影响原球茎的增殖的因素。采用正交设计方法探讨了培养基类型、6-BA、NAA、有机添加物四种因素对...

【论文题纲】

摘要	3-5
Abstract	5-7
缩略词表	7-11
第一章引言	11-21
1.1 蝴蝶兰的特性	11-12
1.2 蝴蝶兰的市场价值及前景	12-13
1.3 国内外蝴蝶兰的研究进展	13-21
1.3.1 蝴蝶兰的繁殖	13-16
1.3.1.1 原球茎的诱导	14
1.3.1.2 原球茎的增殖	14-15
1.3.1.3 原球茎的分化与生根	15
1.3.1.4 丛生芽的诱导	15
1.3.1.5 种子萌发及影响因素	15-16
1.3.2 蝴蝶兰的育种	16-17
1.3.3 蝴蝶兰原球茎的形态建成及体细胞胚胎发生	17-18
1.3.4 蝴蝶兰培养过程中的褐化问题	18-19
1.3.5 问题与展望	19-21
第二章利用蝴蝶兰花梗腋芽进行植株再生体系的研究	21-30
2.1 材料与方法	21-22
2.1.1 试验仪器	21
2.1.2 试验试剂	21
2.1.3 试验材料	21
2.1.4 试验方法	21-22
2.1.4.1 花梗消毒及腋芽萌发	21
2.1.4.2 原球茎的诱导	21
2.1.4.3 原球茎的增殖及分化	21-22
2.1.4.4 蝴蝶兰的生根培养	22
2.1.4.5 炼苗及移栽	22
2.2 结果与分析	22-27
2.2.1 腋芽的萌发	22-23
2.2.2 原球茎的诱导	23-24
2.2.3 原球茎的增殖及分化	24-26
2.2.4 不同培养条件对蝴蝶兰幼苗生根的影响	26-27
2.3 讨论	27-30
2.3.1 诱导腋芽萌发	27
2.3.2 蝴蝶兰叶片诱导原球茎	27-28
2.3.3 原球茎的增殖	28-29
2.3.4 蝴蝶兰幼苗的生根	29-30
第三章原球茎诱导愈伤组织和体细胞胚胎发生的研究	30-41
3.1 材料和方法	30-31
3.1.1 试验仪器	30
3.1.2 试验试剂	30
3.1.3 材料	30
3.1.4 方法	30
3.1.5 组织学和形态学观察	30-31
3.2 结果和分析	31-38
3.2.1 6-BA、2,4-D和蔗糖浓度对愈伤组织诱导的影响	31-32
3.2.2 6-BA、NAA和蔗糖浓度对愈伤组织诱导的影响	32-33
3.2.3 体细胞胚胎的形成	33-38
3.3 讨论	38-41
3.3.1 碳源对从原球茎形成愈伤组织的影响	38
3.3.2 植物生长调节因子对愈伤组织诱导的影响	38-39
3.3.3 体细胞胚胎的形成和PLB的再生	39
3.3.4 组织学观察	39-41
第四章蝴蝶兰叶片离体培养中与褐化相关的酶研究	41-53
4.1 材料和方法	41-44
4.1.1 试验仪器	41
4.1.2 试验试剂	41-42
4.1.3 材料	42
4.1.4 方法	42-44
4.1.4.1 过氧化物酶(POD)活性的测定	42
4.1.4.2 多酚氧化酶(PPO)活性的测定	42-43
4.1.4.3 苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的测定	43
4.1.4.4 PPO和POD同工酶谱分析	43
4.1.4.5 叶绿素含量测定	43-44
4.2 结果与分析	44-48
4.2.1 蝴蝶兰外植体褐化过程中POD活力的变化	44-45
4.2.2 蝴蝶兰外植体褐化过程中PPO活力的变化	45
4.2.3 蝴蝶兰外植体褐化过程中PAL活力的变化	45-46
4.2.4 蝴蝶兰叶片在褐化过程中POD同工酶的变化	46-47
4.2.5 蝴蝶兰叶片在褐化过程中PPO同工酶的变化	47-48
4.2.6 蝴蝶兰叶片在褐化过程中叶绿素a、b含量的变化	48
4.3 讨论	48-53
4.3.1 PPO和POD活性分析	48-50
4.3.2 PAL活性分析	50-51
4.3.3 蝴蝶兰叶片褐化过程中PPO、POD和PAL之间的关系	51-52
4.3.4 蝴蝶兰叶片在褐化过程中POD、PPO同工酶分析	52
4.3.5 蝴蝶兰叶片褐化过程中叶绿素含量的变化	52-53
第五章总结与展望	53-56
参考文献	56-66
附录	66-68
致谢	68-69
硕士期间发表的文章	69

【DOI】

LunWen.ID:2.2008.160536



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