百合高频再生体系的建立及农杆菌介导基因的转入
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百合高频再生体系的建立及农杆菌介导基因的转入
作者:钟光驰 Publish: 2007-8-29 Hits:-
【中文题名】 百合高频再生体系的建立及农杆菌介导基因的转入
【英文题名】 Establishment of High Efficient Regeneration System of Lilium and Agrobacterium-mediated Genetic Transformation
【学科专业】 细胞生物学
【论文级别】 硕士论文
【投稿时间】 2007-8-29
【中关键词】 麝香百合,高频再生体系,农杆菌,愈伤组织,遗传转化,
【英关键词】 lilium longiflorum,high regeneration system,agrobacterium,callus,genetic transformation,
【分类导航】 生物科学>植物学>植物细胞遗传学>>>
【论文摘要】  百合是多年生球根花卉,属于单子叶植物,具有较高的经济价值和观赏价值,现已成为世界上最重要的鲜切花之一。植物分子生物学的迅速发展,为改良植物品质和性状提供了全新的途径,利用转基因的手段改良百合性状和品质变得切实可行。农杆菌作为遗传转化载体成本低廉、转化率较高,是应用最广泛的外源基因导入法。但是百合是单子叶植物,对农杆菌具有不敏感性,所以要探索有效途径提高农杆菌介导百合转化率。本实验以麝香百合的愈伤组织为转化材料,以pBI121(无外源基因)为转化载体,研究农杆菌介导的麝香百合转化方法,为麝香百合的遗传转化打下基础。 1.建立高频再生体系 百合再生植株小鳞片和百合花丝均能诱导出大量愈伤组织,且愈伤组织分化率都比较高,所以将二者进行比较,选择最佳受体材料。小鳞片在激素浓度为6-BA 0.5mg/L,NAA0.1mg/L时再生小植株小鳞片的愈伤形成率最高,达到90%;而花丝在激素浓度为6-BA1.0mg/L,NAA 0.5mg/L愈伤形成率最高,达到86.3%,所以,再生苗小鳞片的愈伤形成能力要比花丝强。小鳞片在激素浓度为6-BA 0.5 mg/L,NAA 0.05 mg/L时愈伤组织分化率...
【论文题纲】
摘要 5-7
Abstract 7-9
第1章 综述 9-19
1.1 百合属植物概述 9
1.2 百合高频再生体系的建立 9-11
1.3 百合的遗传转化 11-18
1.4 农杆菌介导百合转化的研究进展与百合基因工程的现状 18-19
第2章 引言 19-21
第3章 材料与方法 21-28
3.1 供试材料 21-23
3.2 实验方法 23-28
第4章 结果和分析 28-41
4.1 百合再生小植株鳞片建立高频再生体系 28-30
4.2 花丝建立高频再生体系 30-32
4.3 将上述两种材料进行比较并选择 32
4.4 取芽作生根实验并移栽 32-33
4.5 卡那霉素(Km)对愈伤组织的抗性筛选 33
4.6 卡那霉素(Km)对生根的影响 33-34
4.7 头孢霉素(Cef)抑菌试验 34-35
4.8 转化条件的研究 35-38
4.9 基因表达检测方法 38-41
第5章 结论 41-42
5.1 建立高频再生体系 41
5.2 抗生素筛选压的确定 41
5.3 影响转化率的因素 41-42
第6章 讨论 42-45
6.1 高频再生体系的建立 42-43
6.2 遗传转化率的影响因素 43
6.3 百合转基因工程的前景 43-45
参考文献 45-49
致谢 49-51
在学期间所发表的文章 51
【DOI】 LunWen.ID:2.2008.160551
付费论文:有参考文献 300元
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