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贵州春兰的离体培养及野生资源遗传多样性的分子评价

作者：王国鼎 Publish: 2007-8-29 Hits:-

【中文题名】

贵州春兰的离体培养及野生资源遗传多样性的分子评价

【英文题名】

In Vitro Culture and Genetic Diversity Evaluation of Chunlan (Cymbidium Goeringii Rchb.f.) in GuiZhou

【学科专业】

植物学

【论文级别】

硕士论文

【投稿时间】

2007-8-29

【中关键词】

春兰,离体培养,遗传多样性,RAPD,分子标记,

【英关键词】

Cymbidium goeringii Rchb,In vitro culture,Genetic diversity,RAPD,Phylogeny,

【分类导航】

生物科学>植物学>植物细胞遗传学>>>

【论文摘要】

春兰(Cymbidium goeringii Rchb．f．)是一种具有很高观赏性价值的兰科兰属植物，传统上采用分株繁殖。随着现代生物技术的发展，以组织培养为主要手段的生物技术逐步应用到春兰的繁殖过程中，大幅度的提高了春兰的繁殖系数。而对春兰种质资源的遗传多样性研究，则有利于春兰种质资源的收集、保存、鉴定、创新和合理利用。本研究在春兰的离体培养和遗传多样性等领域开展了工作，以期为遗传改良和资源的开发利用提供理论指导和构筑技术平台。取得的结果如下： 1建立和优化了春兰种子培养技术体系对春兰种子进行了非共生萌发研究，结果发现：果龄、灭菌方式、赤霉素预处理、基本培养基、碳源及添加植物生长调节剂等因子对种子的萌发率有很大的影响。适合春兰种子萌发的最佳培养基为：MS+NAA(1.0mg／L)+6-BA(1.0mg／L)+GA(1.5mg／L)+蔗糖(3.0％)+琼脂(0.7％)。首次较为全面对影响种子萌发的多个因素进行探讨，完善了春兰组织培养体系。 2建立和优化了兰属植物RAPD-PCR实验体系对影响RAPD-PCR的Mg~(2+)、dNTPs、Taq酶及引物浓度等因子进行...

【论文题纲】

摘要	6-7
Abstract	7-9
缩略词表	9-10
前言	10-11
第一章研究综述	11-24
1 兰科植物离体培养及其应用的研究进展	11-18
1.1 兰科植物离体培养	11-16
1.1.1 外植体来源	11-14
1.1.1.1 胚培养	11-13
1.1.1.2 茎尖及侧芽培养	13
1.1.1.3 叶片培养	13
1.1.1.4 其他外植体培养	13-14
1.1.2 培养基及外界条件的研究	14-16
1.1.2.1 培养基	14-15
1.1.2.2 外界条件	15-16
1.2 离体培养在兰科植物遗传改良上的应用	16-18
1.2.1 杂交育种	16
1.2.2 离体诱变	16-17
1.2.3 遗传工程	17-18
1.2.3.1 转基因研究	17
1.2.3.2 原生质体的培养与融合	17-18
1.3 人工种子	18
1.4 种质资源的离体保存	18
2 遗传标记在遗传多样性研究中的应用	18-24
2.1 遗传多样性研究的意义	18-19
2.2 遗传多样性的研究方法	19-23
2.2.1 形态学方法	19-20
2.2.2 细胞学方法	20
2.2.3 生化标记方法	20-21
2.2.4 分子标记方法	21-23
2.2.4.1 多位点标记技术	21-22
2.2.4.2 单位点标记技术	22-23
2.3 RAPD标记在兰科植物遗传多样性研究中的应用	23-24
第二章春兰的离体培养	24-37
1 引言	24
2 本研究的目的和内容	24-25
2.1 研究目的	24-25
2.2 研究主要内容	25
3 材料和方法	25-28
3.1 实验材料	25
3.2 实验方法	25-28
3.2.1 外植体的灭菌方式	25
3.2.2 赤霉素预处理对种子萌发的影响	25-26
3.2.3 基本培养基对种子萌发的影响	26
3.2.4 碳源对种子萌发的影响	26
3.2.5 激素对种子萌发的影响实验设计	26-27
3.2.6 原球茎的增殖培养	27-28
3.2.7 统计指标	28
4 结果与分析	28-33
4.1 果龄对种子萌发的影响	28-29
4.2 不同灭菌方式对种子萌发的影响	29-30
4.3 不同赤霉素浓度的预处理对种子萌发的影响	30
4.4 基本培养基对萌发率的影响	30-31
4.5 不同碳源对种子萌发的影响	31
4.6 激素对种子萌发的影响	31-33
4.6.1 生长素种类和浓度对萌发率的影响	31-32
4.6.2 细胞分裂素种类和浓度对萌发率的影响	32-33
4.6.3 赤霉素浓度对萌发率的影响	33
4.7 原球茎的产生与增殖	33
5 讨论	33-37
第三章贵州春兰及其近缘种遗传多样性的评价	37-67
1 引言	37-38
2 研究的目的和内容	38
2.1 研究目的	38
2.2 研究内容	38
3 材料和方法	38-44
3.1 形态学评价	38
3.1.1 材料	38
3.1.2 形态学数据	38
3.2 遗传多样性的RAPD评价	38-44
3.2.1 材料	38-41
3.2.1.1 贵州春兰及其近缘种遗传多样性的RAPD评价	38-39
3.2.1.2 春兰不同自然分布区遗传多样性的RAPD评价	39-41
3.2.2 实验方法	41-44
3.2.2.1 DNA的分离与检测	41-43
3.2.2.2 RAPD-PCR实验体系的建立与优化	43
3.2.2.3 随机引物的筛选	43-44
3.2.2.4 RAPD标记数据	44
3.3 数据处理	44
3.3.1 形态学数据	44
3.3.2 分子标记数据	44
3.3.3 Mantel相关性检测	44
4 结果与分析	44-61
4.1 贵州春兰及其近缘种的形态学评价	44-46
4.2 贵州春兰及其近缘种的RAPD评价	46-61
4.2.1 基因组DNA的分离	46-47
4.2.2 春兰及其近缘种RAPD-PCR实验体系的建立与优化	47-49
4.2.3 引物筛选	49-50
4.2.4 12种兰属植物的RAPD鉴别	50-52
4.2.5 春兰及其近缘种亲缘关系的RAPD分析	52-54
4.2.6 贵州春兰不同自然分布区遗传多样性的RAPD评价	54-61
4.2.6.1 不同样品的RAPD标记的多态性	54-55
4.2.6.2 不同样品的多态性位点百分率	55-57
4.2.6.3 样品相似性的 RAPD分析	57-61
4.3 遗传距离的相关性检测	61
5 讨论	61-67
5.1 形态学标记与RAPD标记	61-63
5.2 春兰及其近缘种的RAPD鉴别	63
5.3 不同标记系统在供试兰属植物遗传多样性分析上的比较	63-64
5.4 关于莲瓣兰的归类问题	64-65
5.5 不同自然分布区春兰野生资源的遗传多样性	65-67
参考文献	67-77
图版与说明	77-79
致谢	79-80

【DOI】

LunWen.ID:2.2008.160558



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