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荔枝转基因胚性愈伤组织原生质体高频率再生

作者：黄枝英 Publish: 2006-10-31 Hits:-

【中文题名】

荔枝转基因胚性愈伤组织原生质体高频率再生

【英文题名】

High Frequency Regeneration of Protoplasts from Litchi Transgenic Embryogenic Calli

【学科专业】

果树学

【论文级别】

硕士论文

【投稿时间】

2006-10-31

【中关键词】

荔枝,转基因抗性胚性愈伤组织,转基因原生质体,体细胞胚胎发生,转基因植株,

【英关键词】

litchi,transgenic resistant embryogenic callus（TREC）,transgenic protoplast,somatic embryogenesis,transgenic plant,

【分类导航】

农业科学>园艺>果树园艺>热带及亚热带果类>荔枝>

【论文摘要】

本研究以采用基因枪转化法，将外源htp和gus(uid A)基因转入荔枝(Litchi chinensis Soon．)晚熟优良品种‘下番枝’，并经筛选得到的11个荔枝转基因抗性胚性愈伤组织(Transgenic resistant embryogenic calli，TREC)细胞系为材料，进行荔枝转基因抗性胚性愈伤组织长期继代保持系统的优化及其gus检测：选择其中的5个转基因抗性细胞系(Q811、Q81.535，Q9221、Q9223和Q1016)进行原生质体分离和高频率再生培养；采用转基因原生质体来源的愈伤组织进行体胚诱导，并再生转基因植株。主要研究结果如下： 1．荔枝转基因抗性胚性愈伤组织长期继代保持系统的优化。采用交替培养基培养荔枝转基因抗性胚性愈伤组织，继代2年，转基因抗性胚性愈伤组织仍然保持旺盛生长而且GUS表达量稳定。适合的交替培养基为附加1.0 mg·L~(-1)2，4—D的MS培养基和附加1.0 mg·L~(-1)2，4—D+50 mg·L~(-1)潮霉素的MS培养基。 2．荔枝转基因抗性胚性愈伤组织的GUS检测。荔枝转基因抗性胚性愈伤组织长期继代保持过程中...

【论文题纲】

缩写词	8-9
中文摘要	9-11
英文摘要	11-13
第一章引言	13-27
1 植物原生质体研究进展	13-18
1.1 植物原生质体培养概况	13-14
1.2 植物原生质体遗传操作研究进展	14-16
1.3 植物原生质体培养在品种改良上的应用	16-18
2 原生质体培养技术	18-23
2.1 原生质体的分离与纯化	18-21
2.2 原生质体培养	21-23
3 研究背景及主要内容	23-27
3.1 研究背景	23-26
3.2 主要研究内容及意义	26-27
第二章荔枝转基因抗性胚性愈伤组织长期继代保持系统的优化及其gus检测	27-32
1 材料与方法	27-28
2 结果与分析	28-30
2.1 荔枝转基因抗性胚性愈伤组织继代保持培养基的筛选	28-29
2.2 荔枝转基因抗性胚性愈伤组织的 GUS检测	29-30
3 讨论	30-32
3.1 2，4-D在荔枝转基因抗性胚性愈伤组织继代保持中的作用	30-31
3.2 潮霉素在荔枝转基因抗性胚性愈伤组织继代保持中的作用	31-32
第三章荔枝转基因抗性胚性愈伤组织原生质体分离条件的优化	32-41
1 材料与方法	32-33
2 结果与分析	33-39
2.1 影响荔枝转基因抗性胚性愈伤组织原生质体分离的因素	33-39
2.1.1 酶类组合的影响	33-34
2.1.2 酶液中甘露醇浓度的影响	34-35
2.1.3 愈伤组织培养时间的影响	35
2.1.4 酶解方式的影响	35-36
2.1.5 酶解时间的影响	36-37
2.1.6 质膜稳定剂的影响	37-38
2.1.7 pH值的影响	38
2.1.8 不同抗性细胞系材料的影响	38-39
2.2 荔枝转基因抗性胚性愈伤组织原生质体的纯化	39
3 讨论	39-41
3.1 荔枝转基因抗性胚性愈伤组织分离原生质体的关键技术	39-40
3.2 荔枝转基因抗性胚性愈伤组织原生质体分离的应用价值	40-41
第四章荔枝转基因胚性愈伤组织原生质体高频率再生	41-52
1 材料与方法	41-44
2 结果与分析	44-49
2.1 荔枝转基因抗性胚性愈伤组织原生质体培养	44-49
2.1.1 培养基成分的影响	44-47
2.1.2 原生质体培养密度的影响	47-48
2.1.3 不同活力原生质体的影响	48
2.1.4 培养条件的影响	48-49
2.2 荔枝转基因抗性胚性愈伤组织原生质体再生小克隆的释放、增殖	49
3 讨论	49-52
3.1 荔枝转基因抗性胚性愈伤组织原生质体高频率再生的技术关键	49-50
3.2 培养基对荔枝转基因抗性胚性愈伤组织原生质培养的影响	50-52
第五章荔枝转基因原生质体再生愈伤组织的体胚发生	52-61
1 材料与方法	52-53
2 结果与分析	53-59
2.1 荔枝转基因原生质体再生小克隆培养形成胚性愈伤组织	53-54
2.2 荔枝转基因原生质体再生愈伤组织的 GUS检测	54-55
2.3 荔枝转基因原生质体再生愈伤组织的体胚发生	55-58
2.3.1 不同培养方式对原生质体再生愈伤组织体胚发生的影响	55-56
2.3.2 原生质体来源的不同抗性细胞系材料体胚发生能力的情况	56-57
2.3.3 不同附加物对原生质体再生愈伤组织体胚发生的影响	57-58
2.4 荔枝转基因原生质体再生愈伤组织的体胚成熟	58
2.5 荔枝转基因原生质体再生愈伤组织成熟体胚诱导成苗	58-59
3 讨论	59-61
3.1 荔枝转基因原生质体再生愈伤组织体胚发生的关键技术	59
3.2 荔枝转基因原生质体再生愈伤组织体胚发生的优势	59-61
第六章小结	61-63
1 荔枝转基因抗性胚性愈伤组织长期继代保持系统的优化及其 GUS检测	61
2 荔枝转基因抗性胚性愈伤组织原生质体分离条件的优化	61
3 荔枝转基因抗性胚性愈伤组织原生质体高频率再生体系的建立	61-62
4 荔枝转基因原生质体再生愈伤组织的 GUS检测	62
5 荔枝转基因原生质体再生愈伤组织的体胚发生	62-63
参考文献	63-71
图版及图版说明	71-80
致谢	80

【DOI】

LunWen.ID:2.2008.159478



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