| 【中文题名】 | 罗汉果性别的分子标记研究 |
| 【英文题名】 | Studies on Sex of Siraidia Grosvenorii by Genetic Marker |
| 【学科专业】 | 生物化学与分子生物学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2007-10-11 |
| 【中关键词】 | 罗汉果,性别,RAPD,EST同工酶,克隆, |
| 【英关键词】 | Siraidia grosvenorii,sex,RAPD,EST isozyme,clone, |
| 【分类导航】 | 生物科学>植物学>植物细胞遗传学>植物基因工程>> |
| 【论文摘要】 |
罗汉果(Siraidia grosvenorii(Swingle)C. Jeffrey)为葫芦科(Cucurbitaceae)罗汉果属(Siraitia)的雌雄异株植物,具有重要的医疗和保健价值,是广西特有的经济植物。罗汉果的栽培需要优良的罗汉果雌、雄品种。对罗汉果进行雌雄性别的分子标记研究,可为罗汉果早期性别鉴定以及雌雄单株选育提供理论基础。
本研究主要采用随机引物扩增多态性DNA(RAPD)技术和同工酶方法对罗汉果雌雄株进行性别分子标记等的研究。研究内容及结果如下:
1.以栽培品种青皮果的雌雄株叶片为实验材料,用随机引物S60(ACCCGGTCAC),S90 (AGGGCCGTCT)扩增得到与罗汉果雄性性别相关的DNA分子标记。根据引物名以及片段大小将差异带分别命名为S90-300、S90-400、S60-750。将这三条差异片段回收、克隆及测序,获得的序列大小分别为305bp,405bp,746bp。
在NCBI数据库中用BLAST对这3个差异片段进行序列同源性比较,结果表明这3个序列与其它生物体DNA序列同源性较小,且同源序列中未发现来自罗汉果或葫芦科的序列,表明这三... |
| 【论文题纲】 |
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摘要 |
3-5 |
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Abstract |
5-10 |
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前言 |
10-23 |
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1. 植物性别与性别决定 |
10-12 |
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1.1 植物的性别 |
10 |
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1.2 雌雄异株植物的性别决定 |
10-12 |
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1.3 植物性别的研究意义 |
12 |
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2. 雌雄株植物性别鉴定方法简述 |
12-19 |
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2.1 形态特征鉴别法 |
12 |
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2.2 生理生化指标鉴别 |
12-15 |
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2.3 染色体组型鉴别法 |
15-16 |
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2.4 DNA 分子标记鉴别法 |
16-19 |
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3. 罗汉果研究概况 |
19-21 |
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3.1 罗汉果分类 |
19-20 |
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3.2 罗汉果的生物学特性 |
20 |
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3.3 罗汉果染色体组型的研究 |
20 |
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3.4 罗汉果应用现状 |
20-21 |
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3.5 罗汉果的栽培现状 |
21 |
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4. 本研究的目的和意义 |
21-23 |
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第一章 青皮罗汉果RAPD 标记的研究 |
23-43 |
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1. 实验技术路线 |
23 |
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2. 材料与试剂 |
23-25 |
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2.1 实验材料 |
23 |
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2.2 仪器设备 |
23 |
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2.3 化学试剂 |
23-25 |
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3. 实验方法 |
25-30 |
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3.1 CTAB 法提取青皮罗汉果总 DNA 的提取 |
25-26 |
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3.2 罗汉果雄特异 DNA 的克隆及测序 |
26-30 |
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3.2.1 RAPD 反应 |
26-27 |
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3.2.2 差异片段的回收 |
27 |
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3.2.3 DNA 的克隆 |
27-30 |
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3.2.4 重组质粒的鉴定 |
30 |
|
3.2.5 DNA 序列测定 |
30 |
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3.2.6 罗汉果雄性基因特异标记 DNA 序列的相似性分析 |
30 |
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4. 结果与分析 |
30-42 |
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4.1 罗汉果总 DNA 的提取 |
30-31 |
|
4.2 RAPD-PCR 结果 |
31-32 |
|
4.3 DNA 片段回收结果 |
32 |
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4.4 重组质粒 DNA 电泳分析 |
32-33 |
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4.5 重组质粒的 PCR 扩增及酶切鉴定 |
33-34 |
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4.6 雄特异片段的测序结果及分析 |
34-42 |
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5. 讨论 |
42-43 |
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第二章 雄株及四个栽培品种的罗汉果雌株的 RAPD 分析 |
43-50 |
|
1. 材料与方法 |
43 |
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1.1 实验材料 |
43 |
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1.2 实验仪器及试剂 |
43 |
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1.3 实验与方法 |
43 |
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2. 结果与分析 |
43-48 |
|
2.1 罗汉果总 DNA 提取结果 |
43-44 |
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2.2 RAPD 体系建立结果 |
44 |
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2.3 雌雄集群 RAPD 分析 |
44-47 |
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2.4 雄个体的 RAPD 分析 |
47-48 |
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3. 讨论 |
48-50 |
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第三章 两个品种罗汉果实生苗的酯酶同工酶研究 |
50-55 |
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1. 材料与方法 |
50-52 |
|
1.1 材料 |
50 |
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1.2 实验方法 |
50-52 |
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1.2.1 酶液的制备 |
50 |
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1.2.2 凝胶电泳 |
50-51 |
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1.2.3 同工酶染色 |
51-52 |
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2. 结果与分析 |
52-53 |
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3. 讨论 |
53-55 |
|
全文小结 |
55-56 |
|
参考文献 |
56-61 |
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附录 |
61-70 |
|
致谢 |
70-71 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.159717 |
