| 【中文题名】 | 野生毛葡萄芽变单株的遗传和细胞生物学基础研究 |
| 【英文题名】 | Studies on the Genetic and Biological Fundations of the Sport Plant from Vitis Quinquangularis Rehd |
| 【学科专业】 | 植物学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2007-9-19 |
| 【中关键词】 | 毛葡萄,芽变,遗传,细胞生物学,ISSR, |
| 【英关键词】 | Vitis quinquangularis Rehd.,sport,inheritance cell biology,ISSR, |
| 【分类导航】 | 农业科学>园艺>果树园艺>浆果类>葡萄> |
| 【论文摘要】 |
毛葡萄(Vitis quinquangularis Rehd．)原产于我国，在广西野生资源蕴藏量十分丰富。随着广西葡萄酿酒业的发展，其人工栽培面积也在迅速增加。但毛葡萄雌雄异株，人工栽培后营养生长过旺，开花多、生理落果严重，丰产稳产性差。因此，培育出具有两性花、适应南方气候条件栽培、抗病虫害能力强、丰产稳产、酿造性状优良的毛葡萄改良新品种对促进广西毛葡萄的人工栽培以及葡萄酿酒产业的发展具有重要意义。本研究以野生毛葡萄芽变单株为材料，从形态学、果实品质、细胞生物学和分子生物学等方面对其进行分析研究，主要结果如下：
1．野生毛葡萄芽变单株与对照的植物学性状和生物学特性比较
野生毛葡萄芽变单株在叶片、嫩梢、枝条、花型等外观形态方面与对照差异显著，特别是花型由雄花突变为两性花。坐果率、果实出汁率和扦插成活率分别比对照提高了168％、34.6％和171％，物候期比对照提前大约一个月(其中果实成熟期提前2个月)，从开花到浆果充分成熟只需约75d，远少于对照的约105d。
2．野生毛葡萄芽变单株与对照(雌株)的果实品质比较
野生毛葡萄芽变单株果实的外观品质和营养品质都明显优于对照，... |
| 【论文题纲】 |
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摘要 |
4-7 |
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ABSTRACT |
7-13 |
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前言 |
13-21 |
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一、果树芽变及芽变选种 |
13-15 |
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二、关于果树芽变的国内外研究现状 |
15-19 |
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三、本课题立论依据及意义 |
19-21 |
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第一章 材料与方法 |
21-29 |
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1.1 植物学性状和生物学特性观察 |
21 |
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1.1.1 材料 |
21 |
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1.1.2 方法 |
21 |
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1.2 果实品质的比较研究 |
21-22 |
|
1.2.1 材料 |
21 |
|
1.2.2 方法 |
21-22 |
|
1.3 花粉特性研究 |
22 |
|
1.3.1 材料 |
22 |
|
1.3.2 花粉粒的大小与形态观察 |
22 |
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1.3.3 花粉萌发试验 |
22 |
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1.4 染色体倍性变异研究 |
22-23 |
|
1.4.1 材料 |
22 |
|
1.4.2 方法 |
22-23 |
|
1.5 ISSR(锚定简单重复序列)分析 |
23-29 |
|
1.5.1 材料 |
23 |
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1.5.1.1 实验材料 |
23 |
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1.5.1.2 主要试剂及来源 |
23 |
|
1.5.1.3 主要仪器设备 |
23 |
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1.5.2 试剂的配制 |
23-24 |
|
1.5.3 基因组DNA的提取与检测 |
24-25 |
|
1.5.3.1 基因组DNA的提取 |
24-25 |
|
1.5.3.2 基因组DNA质量检测 |
25 |
|
1.5.4 最佳反应体系与扩增程序 |
25-26 |
|
1.5.5 引物的筛选及扩增产物的检测 |
26 |
|
1.5.6 差异带的回收 |
26 |
|
1.5.7 大肠杆菌JM109菌株感受态细胞的制备 |
26-27 |
|
1.5.8 目标片段与载体连接 |
27 |
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1.5.9 DNA转化感受态细胞 |
27 |
|
1.5.10 重组质粒的筛选及鉴定 |
27-28 |
|
1.5.11 DNA序列测定及分析 |
28-29 |
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第二章 结果与分析 |
29-55 |
|
2.1 植物学性状和生物学特性 |
29-31 |
|
2.1.1 植物学性状 |
29-30 |
|
2.1.2 生物学特性 |
30-31 |
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2.2 果实品质的比较研究 |
31-33 |
|
2.3 花粉特性研究 |
33-38 |
|
2.3.1 花粉粒大小及形态特征 |
33-37 |
|
2.3.1.1 花粉大小 |
33-34 |
|
2.3.1.2 花粉外形 |
34-36 |
|
2.3.1.3 纹饰特征 |
36 |
|
2.3.1.4 萌发沟、孔 |
36-37 |
|
2.3.2 花粉萌发试验 |
37-38 |
|
2.4 染色体形态及倍性变异分析 |
38-39 |
|
2.5 ISSR分析结果 |
39-55 |
|
2.5.1 DNA的质量及纯度鉴定结果 |
39 |
|
2.5.2 ISSR分子标记最佳反应体系的建立 |
39-44 |
|
2.5.2.1 模板DNA适宜浓度的确定 |
40 |
|
2.5.2.2 Mg~(2+)浓度对PCR结果的影响 |
40-41 |
|
2.5.2.3 引物浓度对PCR结果的影响 |
41-42 |
|
2.5.2.4 dNTP浓度对PCR结果的影响 |
42 |
|
2.5.2.5 TaqDNA聚合酶对PCR结果的影响 |
42-43 |
|
2.5.2.6 退火温度对PCR扩增的影响 |
43-44 |
|
2.5.2.7 葡萄属植物ISSR-PCR分析最佳反应条件 |
44 |
|
2.5.3 多态性引物的筛选 |
44-49 |
|
2.5.4 芽变单株与对照间的遗传相似性分析 |
49 |
|
2.5.5 差异片段的回收与检测 |
49-50 |
|
2.5.6 目标片段的克隆测序 |
50-51 |
|
2.5.7 目标片段的测序结果分析 |
51-55 |
|
2.5.7.1 目标片段的测序结果 |
51-52 |
|
2.5.7.2 目标片段测序结果与核苷酸序列数据库比对分析 |
52-55 |
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第三章 讨论 |
55-59 |
|
3.1 野生毛葡萄芽变单株与对照的某些性状差异 |
55 |
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3.2 野生毛葡萄芽变单株和对照果实品质的比较 |
55-56 |
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3.3 花型遗传问题 |
56 |
|
3.4 花粉特征与变异以及可育性 |
56-57 |
|
3.5 染色体倍性与核型 |
57 |
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3.6 ISSR引物的规律性研究 |
57-58 |
|
3.7 特异性片段与变异 |
58 |
|
3.8 对今后研究工作的设想 |
58-59 |
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第四章 结论 |
59-61 |
|
参考文献 |
61-68 |
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附录 |
68-69 |
|
致谢 |
69-70 |
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攻读硕士学位期间发表论文情况 |
70 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.159723 |
