| 【中文题名】 | Elafin重组气道上皮细胞与细菌生物膜的相互作用 |
| 【英文题名】 | The Interaction between Pseudomonas Aeruginosa Biofilm and Airway Epithelial Cells Transfected by Elafin Gene |
| 【学科专业】 | 内科学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2006-12-11 |
| 【中关键词】 | Elafin,铜绿假单胞菌,生物膜,气道上皮细胞,, |
| 【英关键词】 | Elafin,Pseudomonas aeruginosa,Biofilm,Airway epithelia, |
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| 【论文摘要】 |
目的:观察天然抗菌多肽Elafin重组气道上皮细胞与铜绿假单胞菌生物膜的相互作用以及对细菌生物膜作用的异质性。
方法:(1)体外细胞培养气道上皮A549细胞,将已构建好的含有绿色荧光蛋白标记的pEGFP-N1-elafin表达载体通过脂质体转染系统(LipofectamineTM 2000)进行A549细胞转染重组,倒置荧光显微镜观察其重组效率。(2)体外平板法制备铜绿假单胞菌生物膜(BF)模型7天后,用银染法以及扫描电镜鉴定BF的形成。(3)设转染未含Elafin基因空载体的A549细胞作为对照组、重组后的A549细胞(转染未诱导组)、猪胰弹力蛋白酶诱导(NE组)、铜绿假单胞菌上清诱导(Pa组,实验组),各孵育48h后,分别采用ELISA技术和Western Blot检测各组上清液中Elafin的分泌水平和细胞内Elafin的含量;将铜绿假单胞菌BF载体放入四组细胞中继续孵育8小时后取出:①于4、8、12、24小时等4个时相点观察细胞形态的破坏率,②于8小时用MTT法测定细胞上清液中细菌存活数,③同时四组载体经银染后用图像分析系统进行BF的形态测量、后三组载体采用扫描电镜观察各组BF的形态... |
| 【论文题纲】 |
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符号说明 |
5-7 |
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中文摘要 |
7-10 |
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英文摘要 |
10-14 |
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论文正文：Elafin 重组气道上皮细胞与细菌生物膜的相互作用 |
14-44 |
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前言 |
14-16 |
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第一部分：气道上皮细胞的培养和体外重组 |
16-22 |
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1 材料与方法 |
16-18 |
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2 结果 |
18-20 |
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3 讨论 |
20-22 |
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第二部分：铜绿假单胞菌生物膜模型的建立和鉴定 |
22-27 |
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1 材料与方法 |
22-23 |
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2 结果 |
23-25 |
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3 讨论 |
25-27 |
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第三部分：Elafin 重组气道上皮细胞与铜绿假单胞菌生物膜的相互作用 |
27-35 |
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1 材料与方法 |
27-30 |
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2 结果 |
30-34 |
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3 讨论 |
34-35 |
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第四部分：Elafin 重组气道上皮细胞对细菌生物膜的异质性 |
35-43 |
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1 材料与方法 |
35-37 |
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2 结果 |
37-39 |
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3 讨论 |
39-43 |
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结论 |
43-44 |
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参考文献 |
44-49 |
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文献综述一：蛋白酶抑制剂对肺炎性损伤的保护作用 |
49-57 |
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文献综述二：铜绿假单胞菌感染与气道微环境改变 |
57-63 |
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致谢 |
63-64 |
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研究生期间发表的论文目录 |
64 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.181463 |
