| 【中文题名】 | RGS4与GR结构域相互作用的初步研究 |
| 【英文题名】 | The Research of the Interaction of RGS4 and GR Domains |
| 【学科专业】 | 临床检验诊断学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2007-1-22 |
| 【中关键词】 | rgs4,GR,结构域,酵母双杂交,GST,pulldown |
| 【英关键词】 | GR domains,RGS4 gene,yeast two hybrid,GST-pulldown, |
| 【分类导航】 | >>>>> |
| 【论文摘要】 | 糖皮质激素的多种生理和药理效应可能与其非基因组效应有关，糖皮质激素受体(Glucocorticoid Receptor，GR)参与某些非基因组效应的信号转导，G蛋白信号转导调节因子(Regulator of G
protein signaling 4，RGS4)与GR之间的相互作用可能是调节这一效应的重要途径之一。本研究拟采用酵母双杂交技术探讨RGS4与GR之间是否存在相互作用，进而明确相互作用的确切位点。
该研究工作分为两个部分：1、利用酵母双杂交技术研究RGS4与GR各结构域之间的相互作用；2、利用GST-pulldown技术研究RGS4及GR各结构域蛋白之间相互作用。
采用SD大鼠肝组织RNA，构建RGS4蛋白全编码框表达质粒作为诱饵蛋白表达质粒，并构建GR(AB、CD、EF、C、D)结构域的AD质粒，成功地建立了酵母双杂交体系。酵母双杂交结果显示，RGS4全编码框表达质粒转染酵母细胞后无自激活作用，GR各个 |
| 【论文题纲】 |
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中文摘要 |
6-8 |
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英文摘要 |
8-10 |
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前言 |
10-12 |
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第一部分 RGS4与GR结构域间相互作用的酵母双杂交研究 |
12-47 |
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前言 |
12-13 |
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实验一 酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定 |
13-29 |
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1、实验材料 |
13-18 |
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2、实验方法 |
18-27 |
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3、实验结果 |
27-29 |
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实验二 GR各个结构域的构建 |
29-36 |
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1、实验材料 |
29 |
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2、实验方法 |
29-34 |
|
3、实验结果 |
34-36 |
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实验三 RGS4与GR结构域间的相互作用的酵母双杂交研究 |
36-42 |
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1、实验材料 |
36-38 |
|
2、实验方法 |
38-40 |
|
3、实验结果 |
40-42 |
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讨论 |
42-45 |
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参考文献 |
45-47 |
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第二部分 RGS4及GR各结构域蛋白之间相互作用的GST-pulldown研究 |
47-68 |
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前言 |
47-48 |
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实验一 RGS4原核表达载体pGEX4T-1-RGS4的构建 |
48-53 |
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1、实验材料 |
48 |
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2、实验方法 |
48-51 |
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3、实验结果 |
51-53 |
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实验二、pGEX4T-1-RGS4原核表达载体的诱导表达和鉴定 |
53-59 |
|
1、实验材料 |
53-55 |
|
2、实验方法 |
55-58 |
|
3、实验结果 |
58-59 |
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实验三、RGS4与GR结构域之间的GST pulldown研究 |
59-62 |
|
1、实验材料 |
59 |
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2、实验方法 |
59-61 |
|
3、实验结果 |
61-62 |
|
讨论 |
62-66 |
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参考文献 |
66-68 |
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文献综述 |
68-80 |
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参考文献 |
78-80 |
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全文总结 |
80-81 |
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致谢 |
81 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.175750 |
