HIV-1 DNA疫苗中试生产工艺研究及PTD-P24重组蛋白的构建、表达和纯化-基础医学-论文之家

HIV-1 DNA疫苗中试生产工艺研究及PTD-P24重组蛋白的构建、表达和纯化

作者：程海 Publish: 2007-8-31 Hits:-

【中文题名】

HIV-1 DNA疫苗中试生产工艺研究及PTD-P24重组蛋白的构建、表达和纯化

【英文题名】

Manufacturing Process Study of HIV-1 DNA Vaccine and Construction, Expression and Purification of PTD-P24 Fusion Protein

【学科专业】

微生物学

【论文级别】

硕士论文

【投稿时间】

2007-8-31

【中关键词】

DNA疫苗,生产工艺,PTD-P24蛋白,构建,表达,

【英关键词】

DNA vaccine,manufacturing process,PTD-P24 fusion protein,construction,expression,

【分类导航】

医药、卫生>基础医学>医学免疫学>>>

【论文摘要】

DNA疫苗是继传统疫苗和基因工程蛋白亚单位疫苗之后的新一代疫苗,质粒DNA大规模制备技术对DNA疫苗的产业化具有重要意义。论文第一部分从我国重大科研课题的需求以及生物制药行业发展的前景出发确立了HIV-1 DNA疫苗中试生产工艺研究课题。在上下游研究、生产和质控人员的配合下,经过不懈努力,比较顺利的完成了课题任务。基于实验室小试工艺研究的基础之上,在GMP条件下,成功地实现了DNA疫苗生产工艺的放大,建立了有自主知识产权的临床用DNA疫苗制备工艺。稳定了75 L发酵罐补料分批发酵工艺,发酵20小时后收获菌体约60g湿菌体/ L,质粒产量≥60mg/L。在确保高密度培养的前提下实现了质粒的高产量。通过组合多种质粒DNA纯化手段并优化各种参数,建立了稳定、简单、易放大的DNA疫苗中试纯化工艺。运用LiCl沉淀和精胺沉淀等粗纯手段把绝大多数杂质成分消灭在大容量、低成本的粗纯阶段。在做好粗纯的基础上尽可能减少昂贵费时的层析工艺步骤,简化整个流程。DNA疫苗纯化工艺开发较好地贯彻了“强化提取、简化精制”的指导原则,生产出了符合临床应用要求的DNA疫苗制品,总体质粒收率大于40%。与国外工艺相比,该工艺减少了精...

【论文题纲】

摘要	3-4
Abstract	4-7
综述	7-18
1 DNA 疫苗生产工艺研究进展	7-12
2 蛋白转导结构域	12-18
1 引言	18-21
1.1 研究价值和意义	18
1.2 国内外研究现状	18-20
1.3 本研究拟解决的问题	20-21
正文	21-52
2 HIV-1 DNA 疫苗中试生产工艺研究	21-34
2.1 材料与方法	21-27
2.2 结果与分析	27-30
2.3 讨论	30-33
2.4 小结	33-34
3 PTD-P24 重组蛋白的构建、表达和纯化	34-51
3.1 材料与方法	34-39
3.2 结果与分析	39-47
3.3 讨论	47-50
3.4 小结	50-51
4 结论	51-52
参考文献	52-56
附录	56-60
致谢	60-61
作者简介	61-62
在读期间发表的学术论文	62

【DOI】

LunWen.ID:2.2008.176180



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