| 【中文题名】 | 抗CD22人源化基因工程多价微型抗体的初步表达 |
| 【英文题名】 | Primary Expression of Anti-CD22 Humanize Engineering Multivalent and Miniantibody |
| 【学科专业】 | 预防兽医 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2007-9-14 |
| 【中关键词】 | CD22,人源化基因工程抗体,巴斯德毕赤氏酵母,昆虫杆状病毒,蛋白表达, |
| 【英关键词】 | CD22,Humanize engineering antibody,Recombinant baculovirus,methylotrophi Pichia pastoris,protein expression, |
| 【分类导航】 | 医药、卫生>基础医学>医学免疫学>>> |
| 【论文摘要】 |
1997年,美国FDA批准了有史以来第一个癌症治疗的裸抗体——“美罗华”嵌合抗体(Rituxan)。尽管美罗华对非霍奇金淋巴瘤(NHL)有效而且毒性可以控制,但并不是对所有的病人都有疗效,甚至所有有治疗反应的病人最后都会复发,然而美罗华激励研究者去寻找新的靶点。CD22是众多靶点中的一个,表达于正常和癌变的B细胞表面。以CD22为靶点的治疗不会影响任何不表达CD22的组织,也不会抑制新的B细胞生成。
NHL的治疗方法有放射治疗、外科治疗、生物治疗等。免疫导向治疗作为生物治疗的一种,在淋巴瘤治疗中将发挥重要作用。研究结果表明,多价微型抗体由于抗原结合位点数目的增加而有效地提高了其亲和性,所形成的抗原-抗体复合物更为稳定,更适宜于免疫导向治疗。
本实验的主要目的是探索表达抗CD22人源化基因工程多价微型抗体的方法,以期获得表达目的抗体的基因工程菌株和重组病毒株。
本实验首先通过PCR分别扩增出目的基因Fc-500、CH3-1300、Fc-1600,再通过亚克隆构建分泌表达质粒pPIC9-CH3和pPIC9-Fc,电转化到巴斯德毕赤氏酵母GS115中,通过同源重组,将目的基因整合到... |
| 【论文题纲】 |
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摘要 |
4-5 |
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ABSTRACT |
5-7 |
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第一部分 前言 |
7-17 |
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第一章 抗CD22抗体治疗非霍奇金淋巴瘤的研究进展 |
7-12 |
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1.CD22简介 |
7-9 |
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2.非霍奇金淋巴瘤的治疗 |
9-10 |
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3.抗CD22抗体在治疗中类型 |
10-12 |
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第二章 人源化抗体和多价抗体的研究进展 |
12-15 |
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1.鼠抗体人源化及人源抗体制备技术的研究进展 |
12-13 |
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2.基因工程多价抗体构建的研究进展 |
13-15 |
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第三章 表达系统的选择 |
15-17 |
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第二部分 实验研究 |
17-48 |
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实验一 抗CD22人源化基因工程多价微型抗体在毕赤氏酵母表达系统中的初步表达 |
17-37 |
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材料与方法 |
17-30 |
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1.材料与试剂配制 |
17-21 |
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2.实验路线 |
21 |
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3.实验方法 |
21-30 |
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结果 |
30-34 |
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讨论 |
34-36 |
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小结 |
36-37 |
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实验二 抗CD22人源化基因工程多价微型抗体在杆状病毒表达系统中的初步表达 |
37-48 |
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材料与方法 |
37-43 |
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1.材料与试剂配制 |
37-38 |
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2.实验路线 |
38 |
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3.实验方法 |
38-43 |
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结果 |
43-46 |
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讨论 |
46-47 |
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小结 |
47-48 |
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参考文献 |
48-54 |
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致谢 |
54-55 |
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硕士期间发表的文章情况 |
55 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.176312 |