| 【中文题名】 | 噬菌体作为疫苗载体诱导小鼠脾细胞产生细胞因子类型的研究 |
| 【英文题名】 | The Analysis on the Types of Cytokines Produced in Mice Induced by the Phage as Epitope Vaccine |
| 【学科专业】 | 细胞生物学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2007-10-10 |
| 【中关键词】 | 系统性白念菌感染,Hsp90,噬菌体展示,Th1型细胞因子,Th2型细胞因子, |
| 【英关键词】 | ★candidiasis,Heat-shock protein90,phage displaying,Th1 type cytokine,Th2 type cytokine, |
| 【分类导航】 | 医药、卫生>基础医学>医学免疫学>>> |
| 【论文摘要】 |
白色念珠菌是一种寄生于健康人体的正常菌群,在机体的免疫力下降或者正常菌群失调的情况下,就会转变成致病菌。免疫抑制剂的应用增加了病人对念珠菌的易感性,使医院内患者念珠菌感染的发病率不断增加。
热休克蛋白90(Hsp90)是白色念珠菌在侵染机体过程中分泌的一种毒性因子,同时,作为念珠菌的一种免疫优势抗原,可以诱导感染机体产生特异性抗体。Matthews和本实验室的工作证明,抗Hsp90的抗体是一种保护性抗体。
我们课题组已经证明,噬菌体展示的表位能够诱导小鼠产生体液免疫应答和细胞免疫应答。在念珠菌感染过程中,CD4+T细胞的分化方向是决定机体对念珠菌感染抗性或易感性的重要方面。为了进一步研究噬菌体作为表位载体,诱导小鼠产生细胞因子的类型,本研究利用展示有C表位的杂合噬菌体、野生噬菌体和与匙孔血蓝蛋白(KLH)偶联的化学合成C表位(KLH-C),免疫C57BL/6J小鼠,再采用定量ELISA方法,检测脾细胞培养上清中分泌细胞因子的水平。同时用RT-PCR方法分析了mRNA水平上细胞因子的转录,确定了检测小鼠体内脾中Th1和Th2型细胞因子的转录。得到的结果如下:
1.噬菌体作为疫苗... |
| 【论文题纲】 |
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中文摘要 |
4-5 |
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英文摘要 |
5-9 |
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引言 |
9-10 |
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第一章 文献综述 |
10-18 |
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一、系统性白色念珠菌感染 |
10-14 |
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（一） 白色念珠菌免疫优势抗原及体液免疫应答 |
10-12 |
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1. 白色念珠菌热休克蛋白90(Hsp90) |
10-12 |
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2. 分泌型天冬氨酸蛋白酶(Sap) |
12 |
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3. 热休克蛋白70（Hsp70） |
12 |
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（二） 抗白色念珠菌的细胞免疫应答 |
12-13 |
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（三） 抗白色念珠菌的先天免疫应答 |
13-14 |
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1. 中性粒细胞 |
13-14 |
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2. 树突状细胞（DC） |
14 |
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3. NK细胞和巨噬细胞 |
14 |
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二、白色念珠菌疫苗研究进展 |
14-16 |
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（一） 全菌疫苗 |
14-15 |
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（二） 表位和亚单位疫苗的研究 |
15-16 |
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1. 抗原/ 表位的载体研究 |
15-16 |
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2. 应用免疫佐剂来增强疫苗的免疫效果 |
16 |
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（三） 真菌DNA 疫苗 |
16 |
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三、本论文研究意义 |
16-18 |
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第二章 实验材料与方法 |
18-22 |
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一、实验材料 |
18 |
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二、实验仪器 |
18 |
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三、实验方法 |
18-22 |
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（一） 制备和纯化展示Hsp90 表位LKVIRK的杂合噬菌体 |
18-19 |
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（二） 免疫C57bL/6J小鼠 |
19 |
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（三） 提取脾中的RNA |
19 |
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（四） RT-PCR |
19-20 |
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（五） 定量ELISA方法检测脾细胞培养上清中细胞因子的表达 |
20-21 |
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（六） 统计学分析 |
21-22 |
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第三章 实验结果与分析 |
22-28 |
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一、实验结果 |
22-28 |
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（一） 成功制备得到杂合噬菌体 |
22 |
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（二） 杂合噬菌体可诱导C57bL/6J小鼠Th1 型细胞因子mRNA的转录增加,对Th2 型细胞因子mRNA的转录没有影响 |
22-25 |
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1. 小鼠脾中Th1 型细胞因子mRNA的转录增加 |
22-24 |
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2. 脾中Th2 型细胞因子IL-10 的转录在实验组和对照组之间相似 |
24-25 |
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（三） 噬菌体增强了体外培养脾细胞的Th1 型细胞因子的分泌，对Th2 型细胞因子的分泌没有影响 |
25-28 |
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1. 噬菌体可诱导脾细胞培养上清中Th1 型细胞因子的分泌 |
25-27 |
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2. 噬菌体对脾细胞培养上清中Th2 型细胞因子IL-10 的分泌没有影响 |
27-28 |
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第四章 讨论 |
28-31 |
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一、噬菌体作为疫苗载体与KLH具有相似的作用，能够增加免疫鼠脾中TH1 型细胞因子的产生，对TH2 型细胞因子的产生没有影响 |
28 |
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二、噬菌体展示表位诱导的细胞免疫应答反应 |
28-29 |
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三、不同类型细胞因子间的调控作用 |
29 |
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四、小结 |
29-30 |
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五、本论文创新点 |
30-31 |
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参考文献 |
31-37 |
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致谢 |
37-38 |
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发表论文及参加项目情况 |
38 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.176315 |
