| 【中文题名】 | 日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库的构建与东方田鼠抗血吸虫抗性相关基因筛选 |
| 【英文题名】 | Construction of Phage Display cDNA Library from Adult Worms of Schistosoma Japonicum and Screening of Genes Related to the Schistosoma-resistance of Microtus Fortis |
| 【学科专业】 | 生物化学与分子生物学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2007-9-18 |
| 【中关键词】 | 日本血吸虫,噬菌体展示cDNA文库,成虫,东方田鼠,亲和淘洗, |
| 【英关键词】 | Schistosoma japonicum,phage display cDNA library,adult worms,Microtus fortis,biopanning, |
| 【分类导航】 | 医药、卫生>基础医学>医学寄生虫学>医学蠕虫学>> |
| 【论文摘要】 |
日本血吸虫病(Schistosomiasis japonica)是我国一种危害严重的人畜共患寄生虫病。东方田鼠是迄今发现的唯一一种具有抗血吸虫病作用的哺乳动物。如能筛选、克隆出东方田鼠抗血吸虫抗性相关的日本血吸虫基因，可以为开发抗血吸虫疫苗和治疗药物提供新技术、新思路。
噬菌体展示技术(phage display)是近年建立和发展起来的利用噬菌体融合表达外源基因的一项新技术，已广泛应用于分子间识别机制的研究。本研究首次应用T7噬菌体展示系统构建了日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库，并用东方田鼠阴性血清筛选该文库，以期筛选到与东方田鼠抗血吸虫抗性相关的日本血吸虫基因。
方法与结果
1．日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库的构建：原始文库的库容量为4.98×10~6pfu，扩增后文库滴度为3.85x 10~(11)pfu／ml。对随机挑取的96个噬菌斑进行PCR鉴定，重组率为93.8％，其中95.6％的插入片段大于300 bp。7种特异性引物均能从文库中钓取到日本血吸虫成虫相关基因。
2．东方田鼠抗血吸虫抗性相关基因的筛选：分离东方田鼠阴性血清，用亲和淘洗的方法筛选文库... |
| 【论文题纲】 |
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摘要 |
6-7 |
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Abstract |
7-11 |
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第一章 绪论 |
11-25 |
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1.1 日本血吸虫病 |
11-13 |
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1.2 血吸虫疫苗的研究 |
13-15 |
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1.3 东方田鼠抗日本血吸虫的研究 |
15-19 |
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1.4 日本血吸虫cDNA文库的构建 |
19-20 |
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1.5 噬菌体展示技术在抗血吸虫疫苗研究中的应用 |
20-25 |
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第二章 日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库的构建 |
25-38 |
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2.1 材料与方法 |
25-32 |
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2.2 结果 |
32-36 |
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2.3 讨论 |
36-38 |
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第三章 东方田鼠抗日本血吸虫抗性相关基因筛选 |
38-49 |
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3.1 材料与方法 |
38-43 |
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3.2 结果 |
43-47 |
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3.3 讨论 |
47-49 |
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第四章 全文结论 |
49-50 |
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4.1首次成功构建高质量的日本血吸虫成虫噬菌体展示cONA文库 |
49 |
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4.2首次用东方田鼠阴性血清筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库,获得了多个具有进一步研究价值的日本血吸虫新基因片段: |
49-50 |
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参考文献 |
50-56 |
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附录 |
56-59 |
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致谢 |
59-60 |
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作者简历 |
60 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.176317 |
