| 【中文题名】 | 棉花纤维发生的AFLP分子标记 |
| 【英文题名】 | |
| 【学科专业】 | 植物学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2001-10-25 |
| 【中关键词】 | 棉花,纤维,分子标记,AFLP,, |
| 【英关键词】 | cotton,fiber initiation,molecular marker,AFLP, |
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| 【论文摘要】 |
利用突变体是研究基因及其功能的有效手段。徐州142无绒无絮
(fuzzless-lintless,fl)是纤维发育正常的徐州142的天然突变体,除种子无
毛外,fl突变体在表型上与野生型(wild type,WT)没有区别。因此本论
文主要以徐州142无绒无絮(无纤维)突变体(fl)与徐州142野生型近
等基因系为材料,利用稳定可靠、重复性好、覆盖面广、多态性检出率高
的AFLP分子标记技术,寻找筛选与棉花纤维发生相关的AFLP标记。主
要结果如下:
1.棉花基因组DNA提取技术的改进
由于棉花富含多糖和酚类物质,因而很难得到高质量的基因组
DNA。而AFLP分子标记技术成功的关键是以高质量的DNA为模板。实
验中通过改进棉花基因组DNA提取技术,采用在提取缓冲液中加入PVP_(40)
和β-巯基乙醇;样品加入提取缓冲液后快速振荡混匀;尽量减少沉淀时
间;挑出DNA沉淀和溶解离心去除杂质等措施,获得了高质量的棉花基
因组DNA。
2.近等基因系间的AFLP分析
利用AFLP试剂盒提供的全部... |
| 【论文题纲】 |
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中文摘要 |
5-7 |
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英文摘要 |
7-10 |
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一、 文献综述 |
10-23 |
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1. 分子标记的研究进展 |
10-18 |
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1.1 遗传标记及其发展 |
10-11 |
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1.2 DNA分子标记的种类 |
11-12 |
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1.3 主要分子标记技术及其原理 |
12-16 |
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1.4 分子标记在棉花育种上的应用 |
16-18 |
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2. 棉花纤维的研究进展 |
18-23 |
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2.1 棉花纤维细胞的分化和发育研究 |
18-19 |
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2.2 棉花纤维分子生物学研究进展 |
19-23 |
|
二、 引言 |
23-25 |
|
三、 材料与方法 |
25-38 |
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1. 实验材料 |
25-28 |
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2. 实验方法 |
28-38 |
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2.1 棉花DNA的提取和检测 |
28-29 |
|
2.2 RAPD实验程序 |
29-30 |
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2.3 AFLP实验过程 |
30-33 |
|
2.4 银染 |
33-34 |
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2.5 目标片段的回收 |
34 |
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2.6 PCR产物的纯化、克隆和鉴定 |
34-38 |
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四、 结果与分析 |
38-49 |
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1. 提取DNA的质量 |
38-39 |
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2. RAPD分析 |
39 |
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3. AFLP分析体系 |
39-42 |
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4. 近等基因系间的AFLP分析 |
42 |
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5. F_2分离群体中CF_1标记的验证 |
42-43 |
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6. F_3分离群体中CF_1标记的验证 |
43-44 |
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7. 陆地棉品种(系)间CF_1标记的验证 |
44 |
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8. 目标片段的回收、克隆和测序 |
44-49 |
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五、 讨论 |
49-58 |
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1. 棉花基因组DNA提取 |
49-50 |
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2. 选择分子标记技术 |
50-51 |
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3. 影响AFLP分析的主要因素和体系优化 |
51-52 |
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4. 关于银染 |
52-53 |
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5. 纤维发生标记的可靠性 |
53-54 |
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6. 无纤维突变的基因及表达 |
54-55 |
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7. 特征片段(CF_1)和共有片段(Cb)的可能关系 |
55 |
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8. 标记与基因的关系 |
55-56 |
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9. 调节纤维发生的可能途径 |
56-57 |
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10. 延长AFLP片段的途径 |
57-58 |
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六、 结论 |
58-59 |
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七、 简缩语表 |
59-60 |
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八、 参考文献 |
60-67 |
|
致谢 |
67 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.153942 |