| 【中文题名】 | 冬青属苦丁茶种质资源的RAPD分析 |
| 【英文题名】 | Study on RAPD Analysis of the Germplasm Resources of "Kudingcha Tea" in Holly |
| 【学科专业】 | 茶学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2003-7-31 |
| 【中关键词】 | 冬青属苦丁茶,苦丁茶冬青,遗传差异,RAPD分析,分类鉴定, |
| 【英关键词】 | Kudingcha Tea in Holly,Ilex kudingcha C.J.Tseng,Genetic difference,RAPD analysis,Classification, |
| 【分类导航】 | 农业科学>农作物>经济作物>饮料作物>茶> |
| 【论文摘要】 |
本文系统地介绍以苦丁茶冬青(Ilex kudingcha C. J. Tseng)为代表的冬青属苦丁茶种质材料之RAPD分析。研究结果表明，苦丁茶冬青RAPD分析的最佳PCR反应体系为：25μ1反应混合物中含模板DNA 20ng～40ng、1.5mmol／L～2.0mmol／L Mg~(2+)、200μmol／L dNTPs、1.5U Taq、5pmol引物；最佳反应程序为94℃预变性4min；94℃变性30sec，36℃退火30sec，72℃延伸2min，45个循环；72℃后延伸7min；4℃冷却拿出。本研究中所有实验材料之RAPD分析均在上述最佳PCR反应体系和反应程序的条件下进行。对冬青属“苦丁茶”的4个物种即苦丁茶冬青、大叶冬青(I. latifolia Thunb.)、五棱冬青(I. pentagona S. K. Chen,Y. X. Feng et C. F. Liang)、枸骨(I. cornuta Lindl.)以及一个介于五棱冬青与苦丁茶冬青之间的中间类型共22份种质材料进行PCR扩增。用50个10碱基随机引物进行RAPD多态性检测，筛选出27个多态性良好的引物。以这27个引物对上... |
| 【论文题纲】 |
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前言 |
9-15 |
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1 我国“苦丁茶”资源的物种多样性 |
9 |
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2 冬青属苦丁茶的研发概况 |
9-11 |
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3 苦丁茶冬青的研发概况及其种质资源的遗传多样性 |
11-12 |
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4 应用RAPD技术研究冬青属苦丁茶种质资源的重要意义 |
12-15 |
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材料与方法 |
15-21 |
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1 试验材料 |
15-17 |
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2 实验试剂与实验仪器 |
17-18 |
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2.1 主要化学试剂及其配制 |
17-18 |
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2.2 主要实验仪器与设备 |
18 |
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3 实验方法 |
18-21 |
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3.1 DNA的提取、纯化及检测 |
18-19 |
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3.2 PCR影响因素及实验条件的优化 |
19-20 |
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3.3 引物的筛选 |
20 |
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3.4 PCR反应 |
20 |
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3.5 数据分析 |
20-21 |
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结果与分析 |
21-40 |
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1 PCR影响因素及实验条件优化的研究结果 |
21-25 |
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1.1 模板DAN用量的适宜范围 |
21-22 |
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1.2 dNTPs用量对PCR结果的影响 |
22 |
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1.3 Mg~(2+)浓度对PCR结果的影响 |
22-23 |
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1.4 PCR热循环的反应参数 |
23-24 |
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1.5 PCR最佳反应体系和反应程序的确立 |
24-25 |
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2 冬青属苦丁茶不同种质材料的RAPD分析结果 |
25-30 |
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2.1 DNA提取的质量 |
25-26 |
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2.2 引物的筛选及DNA扩增结果 |
26-29 |
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2.3 聚类分析 |
29-30 |
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3 苦丁茶冬青不同类群种质材料及其近缘种质材料的RAPD分析 |
30-40 |
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3.1 DNA提取的质量 |
30-32 |
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3.2 引物的筛选及DNA扩增结果 |
32-37 |
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3.3 聚类分析 |
37-40 |
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讨论 |
40-43 |
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1 关于RAPD各因素对实验的影响 |
40 |
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2 遗传多样性研究中所选用引物的数量对评估结果的影响 |
40 |
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3 冬青属苦丁茶的遗传多样性 |
40-42 |
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4 RAPD分子标记技术在植物分类研究中的应用潜力 |
42-43 |
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参考文献 |
43-48 |
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致谢 |
48-49 |
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作者简介 |
49 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.154120 |
