Mono基因向棉花基因组的导入及其对棉花发育的影响-经济作物-论文之家

您现在的位置：硕士论文 >> 农业论文 >> 农作物 >> 经济作物 >> 正文

Mono基因向棉花基因组的导入及其对棉花发育的影响

作者：范玉朋 Publish: 2005-12-5 Hits:-

【中文题名】

Mono基因向棉花基因组的导入及其对棉花发育的影响

【英文题名】

Transferring Mono Genes to the Cotton (Gossypium Hirsutum L.) Genome and the Effects on the Plant Development

【学科专业】

作物遗传育种

【论文级别】

硕士论文

【投稿时间】

2005-12-5

【中关键词】

陆地棉,单加氧酶基因,遗传转化,生育特性,,

【英关键词】

Upland Cotton （Gossypium hirsutum L.）,Monooxygenase gene,Genetic transformation,Growth characteristics,

【分类导航】

农业科学>农作物>经济作物>纤维作物>棉>

【论文摘要】

棉花是我国重要的经济作物,也是我国引种最为成功的外来物种。由于我国棉花种质资源匮乏,采用常规杂交育种方法,很难培育出在农艺性状和经济性状方面有突破性的新品种。采用转基因技术,将有重要经济利用价值的外源基因导入栽培的陆地棉基因组中,是培育棉花新品种和创造育种新材料的一条有效途径。本研究利用棉花茎尖为外植体,通过农杆菌介导的转基因技术,将生长素合成有关的单加氧酶基因(mono)导入陆地棉基因组,以期培育出丰产、优质、早熟、雄性不育等棉花新品种或新材料。本研究取得的主要实验结果如下: 1.以发芽5-8d的棉花无菌苗茎尖为外植体,在0.8-1.2OD的农杆菌中浸染15min后,经过2d共培养转入含Km的选择培养基上进行筛选,三种不同的转化结构均获得了抗性苗。在选择培养基上进行Km抗性试验表明:通过延长筛选时间,30mg/L的Km可以起到良好的选择作用,100mg/L的Cef可以较好地抑制细菌生长。 2.本研究共转化了3000多个茎尖,通过嫁接方法对转化后的Km抗性再生苗进行定植,成活率达到13.9%-72.2%,通过此方法共获得117株田间成活的再生苗。经PCR鉴定其中82...

【论文题纲】

摘要	5-6
Abstract	6-8
缩写词表	8-9
1 文献综述	9-17
1．1 基因工程的方法培育雄性不育系	9-11
1．1．1 利用花器官特异启动子及细胞毒素基因	9-10
1．1．2 利用外源物质代谢的毒害作用	10-11
1．1．3 利用反义 RNA途径	11
1．2 用基因工程的方法获得恢复系	11-12
1．2．1 利用雄性不育基因的抑制基因	11-12
1．2．2 利用雄性不育基因的反义基因	12
1．3 激素类生长物质的作用及其相关基因的研究现状	12-15
1．3．1 生长素基因工程	13-14
1．3．2 细胞分裂素基因工程	14
1．3．3 Rol基因导入导致雄性不育的基因工程	14-15
1．4 利用转mono基因获得的雄性不育来构建“二系法”的主要原理	15-17
2 研究的目的及意义	17-18
3 材料与方法	18-26
3．1 试验材料	18-20
3．1．1 棉花材料	18
3．1．2 根癌农杆菌和转化载体	18-19
3．1．3 部分试剂来源	19
3．1．4 培养基	19-20
3．1．5 获得的 T0代转化植株编号	20
3．2 试验方法	20-25
3．2．1 根癌农杆菌介导的棉花遗传转化	20-22
3．2．2 转化植株的 PCR检测	22-23
3．2．3 转化植株的 Southern杂交检测	23-25
3．2．4 转化植株的 GUS检测	25
3．2．5 转化植株的花粉育性观察与检测	25
3．2．6 转基因植株生育特性的调查	25
3．3 数据分析	25-26
4 结果与分析	26-44
4．1 根癌农杆菌介导的棉花遗传转化	26-29
4．1．1 Km浓度对外植体分化的影响	26-27
4．1．2 抑菌剂的选择与使用	27-28
4．1．3 激素处理对茎尖诱导不定芽的影响	28
4．1．4 菌株不同状态对转化的影晌	28
4．1．5 再生苗的扩繁	28
4．1．6 影响再生苗嫁接成活率的因素	28-29
4．2 转化植株的 PCR检测	29-32
4．2．1 转基因植株 T0代 PCR检测	29-30
4．2．2 转基因植株 T1代 PCR检测	30-32
4．3 T0代转基因植株的 Southern检测	32-35
4．3．1 植物总 DNA的 KpnI 46hr酶切	32-33
4．3．2 Southern杂交结果	33-35
4．4 转化植株的 GUS检测	35
4．5 转基因植株的育性观察	35-38
4．5．1 T0代花粉育性的染色与观察	36-38
4．5．2 T1代转基因植株育性观察	38
4．6 T0代生育特性观察	38-43
4．6．1 T0代发育特性的调查	41-42
4．6．2 T0代经济性状的调查	42-43
4．7 T1代生育特性观察	43-44
5 讨论	44-52
5．1 棉花遗传转化方法	44-46
5．1．1 外植体的选择	44-45
5．1．2 激素对棉花茎尖分化的影响	45
5．1．3 抗生素对抗性苗筛选的影响	45-46
5．1．4 转基因再生苗的嫁接与扩繁	46
5．2 GUS报告基因的表达	46-47
5．3 转基因植株的分子生物学检测	47-48
5．3．1 转基因植株的 PCR检测	47-48
5．3．2 转基因植株的 Southern杂交	48
5．4 Mono基因对转基因棉花生育特性的影响	48-49
5．5 不同转化结构对转基因植株花粉育性的影响	49-50
5．5．1 转基因植物的育性表现	49-50
5．5．2 转基因植株不育的温度敏感性	50
5．6 还需要进一步的工作	50-51
5．7 Mono基因的应用潜力和该课题的研究展望	51-52
附录	52-58
参考文献	58-65
致谢	65

【DOI】

LunWen.ID:2.2008.154962



付费论文：有参考文献 300元

1、注册会员 2、购买本文 3、下载文章
注:此文为收费论文，需付费购买。每页大约1000字。

代写论文流程

载入中…

Web lunwenjia


热门搜索：陆地棉论文单加氧酶基因遗传转化生育特性

经济作物最新论文

经济作物热门论文