药用石斛组织培养体系的建立及细胞悬浮培养技术的研究-经济作物-论文之家

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药用石斛组织培养体系的建立及细胞悬浮培养技术的研究

Form: 论文之家作者：王国梅 Publish: 2006-11-21 Hits:-

【中文题名】

药用石斛组织培养体系的建立及细胞悬浮培养技术的研究

【英文题名】

The Establishing of Tissue Culture of Medicine Dentrobium and Research of Cell Suspension Culture

【学科专业】

作物遗传育种

【论文级别】

硕士论文

【投稿时间】

2006-11-21

【中关键词】

药用石斛,原球茎,组织培养,细胞悬浮培养,,

【英关键词】

Medicine Dendrobium,Protocorm,Tissue culture,Cell suspension culture,

【分类导航】

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【论文摘要】

本论文系统地论述了金钗石斛的组织培养和细胞悬浮培养技术，建立了金钗石斛组织培养体系并优化了金钗石斛原球茎悬浮培养的培养条件，为金钗石斛试管苗的人工种植及利用细胞悬浮培养技术来获取其有效成份的研究提供了参考依据，试验结果如下： 1、石斛原球茎固体培养时鲜重净增殖倍数较高，较佳原球茎增殖培养条件为：B5培养基+6-BA0.5mg／L+NAA0.2mg／L，椰子汁添加浓度为每升15％，最适培养周期为30d。 2、五种不同培养方式比较试验表明：液体24h／d振荡培养和固体培养方式对原球茎增殖最好，其次是液体12h／d振荡培养和半固体培养，液体静止培养方式最差。 3、石斛原球茎悬浮培养对原球茎鲜重增殖效果较好，较佳培养条件为：B5培养基+6-BA2.0mg／L+NAA0.3mg／L，接种量和培养液比例为3.0g∶30ml，24h／d光照培养，在转速为100r／min振荡式摇床上24h／d振荡培养，最适培养周期为30d。 4、固体培养和液体悬浮培养的石斛原球茎细胞生长曲线大致呈“S”型。细胞生长曲线显示延迟期为0-10d，对数增长期为10-30d，稳定期为

【论文题纲】

前言	11-26
第一章材料与方法	26-43
1.1 试验材料与方法	26-28
1.1.1 试验材料	26
1.1.2 材料的处理和培养方法	26-27
1.1.2.1 材料处理	26
1.1.2.2 培养基	26-27
1.1.2.3 培养方法及培养条件	27
1.1.3 观察与统计方法	27-28
1.1.4 石斛中主要药用成份石斛多糖含量的测定方法	28
1.1.5 数据分析及统计	28
1.2 药用石斛组织培养体系建立的试验设计	28-38
1.2.1 不同固体培养基和培养天数对石斛原球茎增殖的影响试验	28-29
1.2.2 不同种类和浓度的激素配比对石斛原球茎增殖的影响试验	29
1.2.2.1 不同激素配组试验设计	29
1.2.2 激素配比正交试验设计	29-30
1.2.3 天然添加物和有机附加物对石斛原球茎增殖的影响试验	30-31
1.2.3.1 天然添加物试验	30
1.2.3.2 有机附加物试验	30-31
1.2.4 不同培养路线对原球茎增殖的影响试验	31
1.2.5 原球茎分化试验	31-33
1.2.5.1 6-BA和KT的浓度梯度试验	31-32
1.2.5.2 不同浓度NAA和6-BA或KT配组试验	32-33
1.2.6 石斛苗增殖试验	33-34
1.2.6.1 不同基本培养基对石斛苗增殖的影响试验	33
1.2.6.2 6-BA和NAA配组浓度筛选试验	33-34
1.2.7 石斛苗生根试验	34-35
1.2.7.1 NAA对石斛苗生根影响的试验	34
1.2.7.2 IBA对石斛苗生根影响的试验	34-35
1.2.7.3 6-BA与不同浓度的NAA或IBA配组对石斛生根壮苗的影响	35
1.2.8 石斛试管苗移栽试验	35-38
1.2.8.1 不同处理的苔藓对石斛试管苗移栽的影响	35-36
1.2.8.2 不同移栽基质对石斛试管苗移栽的影响	36
1.2.8.3 不同苗生长方式和苗数对石斛苗移栽的影响试验	36-37
1.2.8.4 不同生根处理的石斛苗移栽试验	37-38
1.3 金钗石斛细胞悬浮培养试验设计	38-42
1.3.1 不同培养基及培养方式对原球茎增殖的影响试验设计	38-39
1.3.1.1 原球茎在不同液体培养基中24h／d振荡培养的试验设计	38
1.3.1.2 原球茎在不同液体培养基12h／d振荡培养的试验设计	38-39
1.3.1.3 原球茎在不同半固体培养基中培养的试验设计	39
1.3.1.4 原球茎在不同液体培养基中静止培养的试验设计	39
1.3.2 激素对石斛原球茎悬浮培养的影响试验	39-40
1.3.2.1 不同浓度的6-BA与NAA或IBA配组试验	39-40
1.3.2.2 不同浓度的NAA筛选试验	40
1.3.3 不同培养方式对原球茎增殖的试验设计	40-41
1.3.4 细胞生长曲线的测定	41
1.3.5 不同的培养液体积和接种量对石斛原球茎增殖的影响	41
1.3.5.1 不同的培养液体积试验设计	41
1.3.5.2 不同接种量的试验设计	41
1.3.6 光照对石斛原球茎悬浮培养增殖的影响	41-42
1.4 不同培养条件下石斛中石斛多糖含量的比较	42-43
第二章结果和分析	43-74
2.1 药用石斛组织培养体系的建立	43-64
2.1.1 不同固体培养基和培养天数对石斛原球茎增殖的影响	43-44
2.1.1.1 基本培养基和培养天数对原球茎增殖的影响	43-44
2.1.1.2 小结	44
2.1.2 不同种类和浓度的激素配比对石斛原球茎增殖的作用	44-46
2.1.2.1 NAA或IBA对原球茎增殖的作用效果	44-45
2.1.2.2 不同激素配比对原球茎增殖的影响	45-46
2.1.2.3 小结	46
2.1.3 不同种类和浓度的添加物对石斛原球茎增殖的影响	46-49
2.1.3.1 天然添加物对原球茎增殖的影响	46-48
2.1.3.2 不同浓度的有机添加剂对石斛原球茎增殖的影响	48
2.1.3.3 小结	48-49
2.1.4 不同培养路线对原球茎增殖培养的影响	49-50
2.1.5 不同种类及浓度的激素组合对石斛原球茎分化的影响	50-52
2.1.5.1 不同浓度的6-BA和KT对原球茎分化的效应	50-51
2.1.5.2 NAA浓度的筛选	51-52
2.1.5.3 小结	52
2.1.6 不同基本培养基和不同激素组合对石斛苗增殖的影响	52-55
2.1.6.1 不同基本培养基对石斛苗增殖的作用	52-53
2.1.6.2 不同种类及浓度的激素组合对石斛苗增殖的影响	53-54
2.1.6.3 小结	54-55
2.1.7 不同种类及浓度的激素组合对石斛苗生根壮苗的影响	55-59
2.1.7.1 NAA对石斛苗生根壮苗的影响	55-56
2.1.7.2 IBA对石斛苗生根壮苗的影响	56-57
2.1.7.3 6-BA与不同浓度的NAA或IBA配组对石斛苗生根壮苗的作用	57-59
2.1.7.4 小结	59
2.1.8 不同栽培基质对移栽的石斛试管苗的影响	59-64
2.1.8.1 不同处理的苔藓对成活率的影响	59-60
2.1.8.2 不同移栽基质及组合对石斛试管苗移栽的影响	60-61
2.1.8.3 不同苗生方式和苗数对石斛试管苗移栽的影响	61-62
2.1.8.4 不同生根处理中石斛苗的移栽成活率的比较	62-63
2.1.8.5 小结	63-64
2.2 金钗石斛原球茎细胞悬浮培养	64-73
2.2.1 不同培养方式对原球茎增殖的的作用	64-66
2.2.1.1 不同液体培养基24h／d振荡培养对原球茎增殖的影响	64
2.2.1.2 不同液体培养基12h／d振荡培养对原球茎增殖的影响	64-65
2.2.1.3 不同半固体培养基对原球茎增殖的影响	65-66
2.2.1.4 静止培养的液体培养基对原球茎增殖的影响	66
2.2.1.5 小结	66
2.2.2 激素对悬浮培养的原球茎增殖的影响	66-68
2.2.2.1 不同浓度的6-BA与NAA、IBA组配对悬浮培养原球茎增殖的效应	66-67
2.2.2.2 同一浓度6-BA与不同浓度的NAA配组对原球茎悬浮培养的作用	67-68
2.2.2.3 小结	68
2.2.3 不同培养方式的比较	68-69
2.2.4 细胞生长曲线	69-70
2.2.5 不同的培养液体积和接种量对石斛原球茎增殖的影响	70-72
2.2.5.1 培养液体积对悬浮培养的影响	70-71
2.2.5.2 接种量对金钗石斛原球茎增殖的影响	71-72
2.2.5.3 小结	72
2.2.6 光照对石斛原球茎悬浮培养生长的影响	72-73
2.3 不同培养条件下石斛中石斛多糖含量的比较	73-74
第三章讨论	74-79
3.1 影响药用石斛组织培养的主要因素	74-75
3.1.1 基本培养基	74
3.1.2 植物激素	74
3.1.3 天然提取物和有机添加物	74-75
3.1.4 试管苗基质和移栽条件及管理	75
3.2 药用石斛细胞悬浮培养的主要影响因素	75-78
3.2.1 高产细胞株系的筛选	75-76
3.2.2 培养液和植物激素的作用	76-77
3.2.3 诱导子和前体物质的添加	77
3.2.4 接种量的影响	77
3.2.5 培养条件的优化	77-78
3.2.6 培养细胞的采收时间	78
3.3 药用植物中次生代谢物的研究及开发应用前景	78-79
第四章结论	79-80
参考文献	80-85
附录	85-87
致谢	87-88
攻读学位期间发表的论文	88

【DOI】

LunWen.ID:2.2008.155461



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