| 【中文题名】 | 大豆对SMV3号株系的抗性遗传分析及抗性基因的分离 |
| 【英文题名】 | Inheritance of Resistance to SMV3 and Separation of Resistance Gene in Soybean |
| 【学科专业】 | 作物遗传育种 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2006-12-29 |
| 【中关键词】 | 大豆花叶病毒,抗性鉴定,抗性基因,SSR,cDNA-AFLP, |
| 【英关键词】 | Soybean mosaic virus,resistance identifies,resistance gene,SSR,cDNA-AFLP, |
| 【分类导航】 | 农业科学>农作物>经济作物>油料作物>大豆> |
| 【论文摘要】 | 由花叶病毒引起的大豆花叶病毒病(soybean mosaic virus,SMV)是我国大豆生产中的严重病害。它可导致大规模的大豆减产。因此,迫切需要应用现代分子生物学的方法从整体水平上深入研究抗病机理,以寻找提高抗性的行之有效的方法。本文通过对抗病×感病杂交组合的后代分析,验证了高抗SMV的大豆品系95-5383的抗性遗传规律,利用cDNA-AFLP技术分析大豆花叶病毒病侵染后的基因表达情况,回收108条与抗病基因相关的差异片段,为后续工作的进行打下基础。本文主要研究结果如下:
1.利用人工汁液摩擦法对6份大豆亲本资源接种SMV3号株系进行抗性鉴定,不同品种接种后的症状类型不同,表明品种和株系间存在互作。
2.利用筛选出的高抗SMV3号株系的大豆品系95-5383与1个感病品种IA2020,配制杂交组合,对组合的F_1、F_(2:3)家系接种SMV3鉴定抗性。结果表明,中品95-5383与感病品种IA2020杂交组合的F_1代表现为感病,F_(2:3)家系的分离比例为1:2:1,表明中品95-5383对SMV3号株系的抗性受一对隐性基因控制。
3.通过对浙江材... |
| 【论文题纲】 |
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独创性声明 |
2 |
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关于学位论文使用授权的说明 |
2-3 |
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摘要 |
3-5 |
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Abstract |
5-10 |
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第一章 文献综述 |
10-26 |
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1.1 植物的抗病机制 |
10-11 |
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1.2 植物的抗病基因 |
11-13 |
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1.3 大豆花叶病毒病研究 |
13-16 |
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1.3.1 SMV的形态及鉴定 |
13 |
|
1.3.2 SMV症状表现 |
13-14 |
|
1.3.3 SMV株系划分 |
14 |
|
1.3.4 大豆对SMV抗性的遗传研究 |
14-16 |
|
1.4 大豆抗花叶病基因研究 |
16-19 |
|
1.4.1 SMV抗病基因的研究现状 |
16-17 |
|
1.4.2 大豆抗SMV基因的分子标记 |
17-19 |
|
1.5 植物抗病基因的分离技术 |
19-21 |
|
1.5.1 转座子标签技术 |
19-20 |
|
1.5.2 图位克隆 |
20-21 |
|
1.6 分离表达基因的方法 |
21-23 |
|
1.6.1 DDRT-PCR差异显示法 |
21-22 |
|
1.6.2 cDNA-AFLP |
22-23 |
|
1.7 本研究的意义及技术路线 |
23-26 |
|
1.7.1 本实验目的意义 |
23-24 |
|
1.7.2 技术路线 |
24-26 |
|
第二章 大豆对 SMV3号株系的病毒检测及抗性鉴定 |
26-34 |
|
2.1 材料与方法 |
27-28 |
|
2.1.1 试验材料 |
27 |
|
2.1.2 试验方法 |
27 |
|
2.1.5 结果分析 |
27-28 |
|
2.2 网室亲本对SMV3的抗性鉴定 |
28-30 |
|
2.2.1 供鉴大豆种质 |
28 |
|
2.2.2 毒源 |
28-29 |
|
2.2.3 接种 |
29 |
|
2.2.4 抗性分级标准 |
29 |
|
2.2.5 结果与分析 |
29-30 |
|
2.3 网室群体 F_(2:3)对 SMV3的抗性鉴定 |
30-31 |
|
2.4 结果与分析 |
31 |
|
2.4.1 F_(2:3)接种 SMV3后基因型分析 |
31 |
|
2.4.2 大豆品种接种 SMV后的严重度分析 |
31 |
|
2.5 讨论 |
31-34 |
|
2.5.1 DAS-ELISA程序的研究 |
31-32 |
|
2.5.2 接种鉴定 |
32-34 |
|
第三章 大豆抗花叶病毒病基因型的分子标记辅助鉴定 |
34-42 |
|
3.1 材料与方法 |
35-36 |
|
3.1.1 对照材料 |
35 |
|
3.1.2 试验材料 |
35 |
|
3.1.3 分子标记 |
35-36 |
|
3.2 试验方法 |
36-37 |
|
3.2.1 接种鉴定 |
36 |
|
3.2.2 DNA提取 |
36 |
|
3.2.3 SSR鉴定 |
36 |
|
3.2.4 统计分析 |
36-37 |
|
3.3 结果与分析 |
37-39 |
|
3.3.1 接种 SMV的鉴定结果 |
37 |
|
3.3.2 亲本 SSR引物筛选结果 |
37 |
|
3.3.3 SSR多态性分析 |
37-38 |
|
3.3.4 聚类结果 |
38-39 |
|
3.4 讨论 |
39-40 |
|
3.4.1 利用SSR指纹图谱分析大豆花叶病毒(SMV3)病抗源的遗传多样性 |
39-40 |
|
3.4.2 抗病性状,基因型和分子标记结果的一致性 |
40 |
|
3.4.3 大豆花叶病毒病抗源的改造,利用及展望 |
40 |
|
3.5 结论 |
40-42 |
|
第四章 利用cDNA-AFLP技术分离大豆抗 SMV3基因 |
42-60 |
|
4.1 材料 |
42 |
|
4.2 方法 |
42-49 |
|
4.2.1 总RNA的提取 |
42-43 |
|
4.2.2 cDNA的合成 |
43-44 |
|
4.2.3 AFLP技术 |
44-49 |
|
4.3 结果与分析 |
49-56 |
|
4.3.1 大豆接种后叶片总RNA提取 |
49-50 |
|
4.3.2 双链cDNA的合成 |
50-51 |
|
4.3.3 cDNA-AFLP |
51-56 |
|
4.4 讨论 |
56-59 |
|
4.4.1 回收的与抗 SMV密切相关的cDNA片段 |
56 |
|
4.4.2 cDNA-AFLP试验体系中应注意的问题 |
56-57 |
|
4.4.3 材料及取样时期的选择 |
57 |
|
4.4.4 关于 cDNA-AFLP方法在分离抗病基因中的应用前景 |
57-58 |
|
4.4.5 内标基因的引入 |
58-59 |
|
4.4.6 选择合适的引物组合 |
59 |
|
4.4.7 二次扩增结果 |
59 |
|
4.5 下一步工作 |
59-60 |
|
参考文献 |
60-67 |
|
致谢 |
67-68 |
|
个人简介 |
68 |
|
| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.155493 |