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四川红景天的组织培养及其抗性基因表达情况的检测

作者：白丽莉 Publish: 2007-8-8 Hits:-

【中文题名】

四川红景天的组织培养及其抗性基因表达情况的检测

【英文题名】

【学科专业】

生物物理学

【论文级别】

硕士论文

【投稿时间】

2007-8-8

【中关键词】

红景天,植物组织培养,抗性基因,营养条件,,

【英关键词】

Rhodiola rosea,plant tissue culture,resistant genes,nutrition condition,

【分类导航】

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【论文摘要】

红景天作为一种珍贵藏药植物,因其具有清热解毒和燥湿的功效,早期主要用于治疗肺炎以及由传染病引起的发烧和清血管热,现认为其还具有抗疲劳、抗衰老、抗缺氧、抗紫外线辐射等作用,是非常有开发前途的环境适应性药用植物。红景天生长环境极其恶劣且多变,如缺氧、低温干燥、狂风、强紫外线照射、昼夜温差大等,这使其具备了其它植物所罕有的特殊适应性物质,也导致其自然资源极其匮乏。红景天种子繁殖相当困难,由高山引种至低海拔地区进行驯化栽培时病虫害发生很严重,加上人们大量地采挖其野生资源,使得其已濒临灭绝的境地。因此加强红景天的组织培养及其快速繁殖,保护其自然资源及其遗传多样性极其迫切。中国有红景天属植物73种,其中以云南、四川及西藏的种类最多,西藏有32种,四川省有22种。现有不少关于云南和西藏红景天的组织培养报道,但未见有关四川红景天组织培养的报道。本研究首次对四川野生红景天进行组织培养,并成功获得其愈伤组织和再生植株。在组织培养过程中,我们研究不同的取材时间、不同的外植体以及不同的营养条件对红景天愈伤组织诱导的影响、植物激素对愈伤组织的分化和生根培养等方面的影响,以及组织培养几个时期抗性基因表达的情况。研究结...

【论文题纲】

摘要	4-6
ABSTRACT	6-11
第一章绪论	11-27
1.1 红景天属植物研究进展	11-19
1.1.1 红景天属植物的生态学研究	11-12
1.1.2 红景天属植物的化学成分和药理作用研究	12-19
1.2 红景天植物的开发与利用	19-23
1.2.1 产品开发	19-20
1.2.2 红景天属植物的栽培研究	20-21
1.2.3 组织培养研究	21-22
1.2.4 细胞培养	22
1.2.5 人工合成红景天苷	22-23
1.3 红景天濒危原因的分析	23-24
1.3.1 内因	23
1.3.2 外因	23-24
1.4 组织培养设计方法	24
1.5 组培过程中抗性研究	24-25
1.6 立题依据和主要内容	25-27
第二章实验材料和方法	27-39
2.1 材料	27
2.2 试验设计	27
2.3 方法	27-31
2.3.1 配制培养基	27-30
2.3.2 取材	30
2.3.3 接种	30
2.3.4 培养条件	30
2.3.5 愈伤组织的诱导	30-31
2.3.6 愈伤组织的分化	31
2.3.7 生根培养	31
2.4 愈伤组织生长情况统计	31-32
2.4.1 愈伤组织生长势	31-32
2.4.2 愈伤组织生长情况统计计算公式	32
2.4.3 愈伤组织分化出芽和生根情况统计	32
2.5 抗性基因表达情况的检测	32-39
2.5.1 总DNA 和总RNA 的提取	32-35
2.5.2 引物设计与合成	35
2.5.3 PCR 扩增	35-36
2.5.4 RT-PCR 扩增	36
2.5.5 RT-PCR 扩增片段回收、克隆及测序	36-39
第三章结果和分析	39-51
3.1 外植体取材时间和部位	39-41
3.1.1 不同取材时间对茎段和叶片成活率和愈伤组织启动情况的影响	39-40
3.1.2 不同取材时间对茎段和叶片成愈率及生长诱导值的影响	40-41
3.2 植物激素的作用	41-44
3.2.1 愈伤组织的诱导情况	41-42
3.2.2 愈伤组织分化情况	42-43
3.2.3 生根培养情况	43-44
3.3 抗性基因的检测	44-51
3.3.1 PCR 扩增电泳结果	44
3.3.2 RT-PCR 扩增电泳结果	44-45
3.3.3 RT-PCR 克隆测序及比对结果	45-51
第四章讨论	51-60
4.1 外植体的取材	51-53
4.2 植物激素的作用	53-55
4.2.1 植物激素对愈伤组织诱导的效应	53-54
4.2.2 6-BA 和2,4-D 对愈伤组织分化出芽的效应	54-55
4.2.3 NAA 对生根培养的效应	55
4.3 碳源的影响	55-56
4.4 组织培养过程中抗性基因的表达	56-59
4.5 结论	59-60
致谢	60-61
参考文献	61-67
硕士期间取得的研究成果	67-68

【DOI】

LunWen.ID:2.2008.155753



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