| 【论文摘要】 |
利用基因工程进行茶树遗传改良的研究一直被受人们的关注。本研究以龙井43#、槠叶种、农抗早优良品种为材料,通过建立合适的再生体系,利用农杆菌法转化,将含有反义TCS基因的工程菌,导入龙井43#、槠叶种、农抗早优良品种茶树成熟胚,并通过GUS瞬时表达情况对农杆菌法转化参数进行了优化,用Kan对转化后的材料进行筛选,获得以下结果:
1.茶树成熟胚的培养
本研究在前人基础上首次以成熟胚作为外植体培养,建立了愈伤组织再生体系和胚萌发体系,为茶树的遗传转化奠定了基础。研究证明:在愈伤组织再生体系中,培养基和基因型是影响成熟胚愈伤组织诱导和再生频率的主要因素。龙井43#和农抗早在附加2 mg/L 2,4-D、0.5mg/L KT的MS培养基上出愈率最高,而槠叶种则在附加2 mg/L 2,4-D、1.0mg/L KT的MS培养基上诱导效果较好。基因型主要影响愈伤组织的再生频率,龙井43#分化率为14.2%,而农抗早分化率为8.5%,槠叶种分化率为3.3%,根的分化率达到40%,获得完整植株大概需要一年半的时间;在胚萌发体系中,成熟胚直接培养,快速获得再生苗,2 mg/L 6-BA的MS培养基适合成熟... |