农杆菌法介导反义咖啡碱合成酶基因转入茶树成熟胚的研究
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农杆菌法介导反义咖啡碱合成酶基因转入茶树成熟胚的研究
作者:蔡海云 Publish: 2007-8-31 Hits:-
【中文题名】 农杆菌法介导反义咖啡碱合成酶基因转入茶树成熟胚的研究
【英文题名】 Study on Antisense TCS Gene by Agrobacterium-mediated Transformation to Mature Embryo of Tea Plant
【学科专业】 茶学
【论文级别】 硕士论文
【投稿时间】 2007-8-31
【中关键词】 茶树,成熟胚,反义TCS,农杆菌,转化,
【英关键词】 tea plant (Camellia sinensis),mature embryos,antisense TCS gene,Agrobacterium tumefaciens,transformation,
【分类导航】 农业科学>农作物>经济作物>饮料作物>>
【论文摘要】  利用基因工程进行茶树遗传改良的研究一直被受人们的关注。本研究以龙井43#、槠叶种、农抗早优良品种为材料,通过建立合适的再生体系,利用农杆菌法转化,将含有反义TCS基因的工程菌,导入龙井43#、槠叶种、农抗早优良品种茶树成熟胚,并通过GUS瞬时表达情况对农杆菌法转化参数进行了优化,用Kan对转化后的材料进行筛选,获得以下结果: 1.茶树成熟胚的培养 本研究在前人基础上首次以成熟胚作为外植体培养,建立了愈伤组织再生体系和胚萌发体系,为茶树的遗传转化奠定了基础。研究证明:在愈伤组织再生体系中,培养基和基因型是影响成熟胚愈伤组织诱导和再生频率的主要因素。龙井43#和农抗早在附加2 mg/L 2,4-D、0.5mg/L KT的MS培养基上出愈率最高,而槠叶种则在附加2 mg/L 2,4-D、1.0mg/L KT的MS培养基上诱导效果较好。基因型主要影响愈伤组织的再生频率,龙井43#分化率为14.2%,而农抗早分化率为8.5%,槠叶种分化率为3.3%,根的分化率达到40%,获得完整植株大概需要一年半的时间;在胚萌发体系中,成熟胚直接培养,快速获得再生苗,2 mg/L 6-BA的MS培养基适合成熟...
【论文题纲】
中文摘要 3-4
英文摘要 4-6
一、文献综述 6-13
1.1 茶树组织培养 6-8
1.2 茶树遗传转化研究进展 8-10
1.3 反义 RNA 技术及其在植物中的应用 10-13
二、引言 13-15
1、研究意义 13-14
2、本研究的技术路线 14-15
三、成熟胚的培养 15-24
3.1 材料 15-16
3.2 方法 16
3.3 结果与分析 16-21
3.4 讨论 21-24
四、农杆菌法转化成熟胚 24-37
4.1 材料 24
4.2 方法 24-28
4.3 结果与分析 28-34
4.4 讨论 34-37
五、结论 37-38
1 成熟胚的培养 37
2 农杆菌转化体系的建立 37
3 转化体筛选的结果 37-38
参考文献 38-43
附录 43-48
致谢 48-49
作者简介 49
【DOI】 LunWen.ID:2.2008.155785
付费论文:有参考文献 300元
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