农杆菌介导的双价抗虫基因转入大豆的研究-经济作物-论文之家

您现在的位置：硕士论文 >> 农业论文 >> 农作物 >> 经济作物 >> 正文

农杆菌介导的双价抗虫基因转入大豆的研究

作者：高耸巍 Publish: 2007-10-10 Hits:-

【中文题名】

农杆菌介导的双价抗虫基因转入大豆的研究

【英文题名】

Transfer of Bivalent Insect Genes into Soybean Mediated by Agrobacterium Tumefaciens

【学科专业】

植物学

【论文级别】

硕士论文

【投稿时间】

2007-10-10

【中关键词】

大豆,抗虫,遗传转化,,,

【英关键词】

soybean,insect-resistance,genetic transformation,

【分类导航】

农业科学>农作物>经济作物>油料作物>大豆>

【论文摘要】

大豆生育期间受害虫侵害严重,常给大豆生产造成巨大损失。大量喷施化学杀虫剂,不仅会增强害虫的抗药性,使益虫及其它生态区系遭受破坏,而且严重污染环境,提高生产成本,破坏生态平衡。常规育种及栽培技术由于育种年限长,遗传资源有限,抗虫机制不甚明了,以及害虫新生物型的发展导致抗性不稳定等原因已有一定的局限性,收效不大。因此利用植物基因工程技术使大豆达到抗虫的目的受到密切关注。本文利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法将含有豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(CpTI)和人工合成的GFM CryIA B.t杀虫基因的双价抗虫基因植物表达载体pGBI121S 4ABC用于栽培大豆品种“吉林20号”、“吉林27号”的转化。未成熟子叶诱导的体细胞胚经与农杆菌共培养,在筛选培养基上获得抗性胚体并萌发成可育转化植株。经PCR鉴定,GUS酶活性检测证实,外源抗虫基因存在于再生植株的细胞中。

【论文题纲】

中文摘要	4-5
英文摘要	5-9
引言	9-21
1. 我国大豆生产的基本概况	9-10
2. 转基因大豆的生产概况	10
3. 植物虫害的基本概况及应对策略简介	10-11
4. 抗虫基因的抗虫原理及其应用现状	11-16
4.1 抗虫基因的分类	11-12
4.2 Bt 基因的抗虫原理	12-13
4.3 Bt 杀虫蛋白的基本分子结构	13
4.4 Bt 杀虫蛋白基因定位及其表达和修饰	13-15
4.4.1 Bt 杀虫蛋白基因定位	13-14
4.4.2 Bt 基因的表达和修饰	14
4.4.3 Bt 杀虫基因的改造和载体的构建	14-15
4.5 第二代抗虫基因	15-16
5. 转双价抗虫基因植物的研究	16-17
5.1 转双价抗虫基因植物的提出	16-17
5.2 获得转双价抗虫基因植物的研究现状	17
6. 大豆农杆菌介导法发展概况	17-18
7. 农杆菌介导的遗传转化机理	18-20
8. 本研究的意义	20-21
材料和方法	21-30
1. 材料	21-22
1.1 试材	21
1.2 菌株和质粒	21
1.3 试剂	21-22
1.4 仪器设备	22
2. 方法	22-30
2.1 培养基的配制	22-24
2.1.1 大肠杆菌培养基	22
2.1.2 农杆菌培养基	22-23
2.1.3 大豆转化培养基	23-24
2.1.3.1 基本培养基 B5、MS	23
2.1.3.2 生长培养基 GM	23
2.1.3.3 共培养培养基 S、M_卫1	23
2.1.3.4 筛选诱芽培养基 MSE	23-24
2.1.3.5 生根培养基	24
2.1.4 大豆幼胚培养基	24
2.2 大豆的转化流程	24-26
2.2.1 菌液的制备	24-25
2.2.2 灭菌过程	25
2.2.3 接种大豆	25
2.2.4 转化过程	25
2.2.5 筛选诱芽培养	25-26
2.2.6 根的诱导	26
2.2.7 移栽	26
2.3 大豆幼胚的组织培养流程	26
2.4 卡那霉素筛选愈伤组织的梯度试验方法	26-27
2.5 转基因植株的检测	27-30
2.5.1 GUS 组织化学分析	27
2.5.2 PCR检测	27-30
2.5.2.1 DNA 的提取与纯化	27-28
2.5.2.2 引物序列	28
2.5.2.3 PCR 反应体系	28-29
2.5.2.4 PCR 反应程序	29
2.5.2.5 电泳检测	29-30
结果与分析	30-36
1.大豆幼胚组织培养再生苗的获得	30-32
2. 卡那霉素筛选愈伤组织的梯度实验	32
3. 转基因大豆的获得	32-34
4. 转基因大豆的检测	34-36
讨论	36-37
结论	37-38
参考文献	38-42
致谢	42

【DOI】

LunWen.ID:2.2008.155880



付费论文：有参考文献 300元

1、注册会员 2、购买本文 3、下载文章
注:此文为收费论文，需付费购买。每页大约1000字。

代写论文流程

载入中…

Web lunwenjia


热门搜索：大豆论文抗虫遗传转化

经济作物最新论文

经济作物热门论文