| 【论文摘要】 |
目的:体外分离、培养人乳牙牙髓干细胞,分析其生物学特征及向成骨细胞诱导分化的能力。为口腔颌面外科骨缺损的新颖治疗方法——骨组织工程提供具备较强增殖能力和良好成骨功能的种子细胞,并为其用于临床骨缺损的治疗提供实验及理论基础。
方法:采用酶消化法分离、有限稀释法纯化,获得人乳牙牙髓干细胞。测定细胞克隆形成率,细胞计数法测生长曲线,细胞爬片行HE染色、抗波形蛋白(Vimentin)、抗STRO-1、抗CD44免疫组化染色。使用矿化诱导液使乳牙牙髓干细胞向成骨细胞诱导,观察细胞形态变化,行HE染色、碱性磷酸酶染色、Von Kossa染色、Van Gieson染色和抗骨钙素免疫组化染色,鉴定其成骨细胞的生物学特征。
结果:通过酶消化法和有限稀释法获得了人乳牙牙髓干细胞,体外扩增达20代。计算细胞克隆形成率为11-24个/103细胞,细胞倍增时间为39.77小时,表达Vimentin、STRO-1和CD44,说明其为具有快速增殖能力的间充质干细胞。人乳牙牙髓干细胞在矿化诱导液的作用下,细胞形态变为多角形,ALP阳性细胞达80%以上,形成钙化结节,经Van Gieson和Von Kossa染色呈阳... |
