| 【中文题名】 | 欧洲七叶树体细胞胚发生和植株再生研究 |
| 【英文题名】 | |
| 【学科专业】 | 林木遗传育种 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2004-7-28 |
| 【中关键词】 | 欧洲七叶树,离体培养,快速繁殖,体细胞胚发生,胚性愈伤组织,体细胞胚 |
| 【英关键词】 | Aesculus hippocastanum L,Tissue culture,Mass propagation,Somatic embryogenesis,Embryogenic callus tissue,somatic embryo,histo-cytology, |
| 【分类导航】 | 农业科学>林业>森林树种>阔叶乔木>> |
| 【论文摘要】 | 欧洲七叶树是重要的园林绿化树种,并具有重要的医药价值,国内引种栽培有限,种苗供不应求,通过细胞工程技术快速繁殖性状优良的再生植株,具有重要的应用价值和理论意义。本文就欧洲七叶树的组织培养和体细胞胚发生以及植株再生进行了系统研究,主要结果如下:
以植物细胞具有全能性的理论为依据,以欧洲七叶树幼嫩叶片为外植体,进行体细胞胚胎发生研究,研究结果表明,诱导愈伤组织的适宜培养基是MS+2,4-D 2mg/L+KT0.2mg/L,MS+BA 8mg/L+NAA 1mg/L有利于胚性愈伤组织的诱导和增殖,添加ZT 2mg/L或BA 5mg/L和IAA 0.2mg/L的MS培养基有利于体细胞胚发育和成熟,体细胞胚可直接诱导次生胚发生,MS+KT 0.1mg/L+NAA 0.01 mg/L或MS+ZT 0.1mg/L+NAA 0.01 mg/L培养基诱导效果最好,增殖频率分别为214%、256%。
以欧洲七叶树体细胞胚的子叶为外植体,诱导次生胚发生或分化不定芽。结果表明,MS+ZT 0.5~2mg/L+BA 1mg/L+IAA 0.2mg/L培养基可直接诱导体胚发生,诱导率超过80%;MS+BA 2mg... |
| 【论文题纲】 |
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致谢 |
2-3 |
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摘要 |
3-4 |
|
Abstract |
4-14 |
|
第一章 文献综述 |
14-27 |
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1 木本植物体细胞胚发生研究动态 |
14-15 |
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1.1 理论依据 |
14 |
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1.2 国际研究进展 |
14-15 |
|
1.3 国内研究进展 |
15 |
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2 林木体细胞胚发生培养过程及影响因素 |
15-20 |
|
2.1 体细胞胚发生的特点 |
15 |
|
2.2 体细胞胚发生的培养过程 |
15-16 |
|
2.2.1 胚性愈伤组织的诱导及选择 |
15-16 |
|
2.2.2 胚性愈伤组织的保持、增殖及后期原胚的形成 |
16 |
|
2.2.3 体细胞胚的发育及成熟 |
16 |
|
2.2.4 体细胞胚的萌发 |
16 |
|
2.3 影响体细胞胚发生的因素 |
16-20 |
|
2.3.1 基因型 |
17 |
|
2.3.2 外植体来源和生理状态 |
17-18 |
|
2.3.3 生长调节物质 |
18-19 |
|
2.3.4 培养条件 |
19-20 |
|
3 体细胞胚发生技术的应用 |
20-22 |
|
3.1 基因工程 |
20 |
|
3.2 种质保存 |
20-21 |
|
3.3 人工种子 |
21 |
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3.4 揭示合子胚发育机制 |
21-22 |
|
3.5 了解体细胞胚发生的分子本质 |
22 |
|
4 体细胞胚发生的细胞生物学研究 |
22-23 |
|
4.1 体细胞胚发生的起源 |
22 |
|
4.2 体细胞胚发生的方式 |
22 |
|
4.3 体细胞胚不同的发育阶段 |
22-23 |
|
5 体细胞胚发生的分子生物学研究 |
23-24 |
|
6 体细胞胚发生的遗传稳定性研究 |
24-25 |
|
7 本研究内容、目标及意义 |
25-27 |
|
7.1 欧洲七叶树生物学特性 |
25-26 |
|
7.2 七叶树属种苗繁育研究现状 |
26 |
|
7.3 本研究目标及意义 |
26-27 |
|
第二章 欧洲七叶树体细胞胚发生 |
27-39 |
|
一 欧洲七叶树体细胞胚发生 |
27-34 |
|
1 实验材料 |
27 |
|
2 培养基筛选 |
27 |
|
3 实验方法 |
27-28 |
|
3.1 愈伤组织的诱导 |
27 |
|
3.2 胚性愈伤组织的诱导和增殖 |
27 |
|
3.3 体细胞胚的发育和增殖 |
27 |
|
3.4 体细胞胚的萌发及移栽 |
27-28 |
|
4 实验结果 |
28-30 |
|
4.1 愈伤组织的形成 |
28 |
|
4.2 胚性愈伤组织的诱导 |
28-29 |
|
4.3 体细胞胚的发育 |
29 |
|
4.4 体细胞胚的萌发及移植 |
29-30 |
|
5 分析与讨论 |
30-33 |
|
5.1 材料的选择 |
30 |
|
5.2 消毒剂的选择 |
30 |
|
5.3 生长调节物质的影响 |
30 |
|
5.4 特殊的生理隔离现象 |
30-31 |
|
5.5 “合生”叶片的出现 |
31-33 |
|
图版1 欧洲七叶树体细胞胚发生过程 |
33-34 |
|
二 欧洲七叶树重复体细胞胚发生 |
34-39 |
|
1 起源于体细胞胚的重复体细胞胚发生 |
34-35 |
|
1.1 材料和方法 |
34 |
|
1.2 实验结果 |
34-35 |
|
2 起源于体细胞胚子叶的重复体细胞胚发生 |
35-36 |
|
2.1 材料与方法 |
35 |
|
2.2 实验结果 |
35-36 |
|
2.2.1 生长调节物质的影响 |
35-36 |
|
2.2.1.1 TDZ、BA、KT对重复体细胞胚发生的影响 |
35-36 |
|
2.2.1.2 ZT对重复体细胞胚的影响 |
36 |
|
2.2.2 取材部位对重复体细胞胚发生的影响 |
36 |
|
2.2.3 机械损伤对重复体细胞胚发生的影响 |
36 |
|
3 讨论与分析 |
36-38 |
|
3.1 发生周期短 |
36 |
|
3.2 接种数目的影响 |
36-37 |
|
3.3 机械损伤的影响 |
37 |
|
3.4 “孪生”植株现象 |
37-38 |
|
图版2 欧洲七叶树重复体细胞胚发生过程 |
38-39 |
|
第三章 欧洲七叶树不定芽诱导及快速繁殖 |
39-47 |
|
1 起源于胚芽的不定芽诱导及快速繁殖 |
39-42 |
|
1.1 实验材料及处理 |
39 |
|
1.2 实验方法 |
39 |
|
1.2.1 培养基的筛选 |
39 |
|
1.2.2 试管苗的移栽 |
39 |
|
1.3 实验结果 |
39-42 |
|
1.3.1 不定芽的增殖 |
39-40 |
|
1.3.2 不定芽的壮苗培养 |
40-41 |
|
1.3.3 试管苗的生根 |
41-42 |
|
1.3.4 试管苗的移栽 |
42 |
|
2 起源于叶片的不定芽诱导及快速繁殖 |
42-43 |
|
2.1 实验材料及处理 |
42 |
|
2.2 实验结果 |
42-43 |
|
2.2.1 直接器官发生产生不定芽 |
42-43 |
|
2.2.2 间接器官发生产生不定芽 |
43 |
|
3 起源于体细胞胚子叶的不定芽诱导及快速繁殖 |
43-45 |
|
3.1 材料与方法 |
43 |
|
3.2 实验结果 |
43-45 |
|
3.2.1 生长调节物质的影响 |
43-44 |
|
3.2.2 不同部位分化不定芽能力的比较 |
44-45 |
|
4 分析与讨论 |
45-46 |
|
4.1 材料的选择 |
45 |
|
4.2 生长调节物质的影响 |
45 |
|
4.3 应答反应敏感 |
45-46 |
|
4.4 极性现象明显 |
46 |
|
图版3 欧洲七叶树不定芽诱导和快速繁殖各阶段 |
46-47 |
|
第四章 欧洲七叶树体细胞胚发生及不定芽诱导的细胞生物学观察 |
47-56 |
|
1 材料与方法 |
47 |
|
1.1 材料 |
47 |
|
1.2 方法 |
47 |
|
2 结果分析 |
47-50 |
|
2.1 欧洲七叶树体细胞胚发生 |
47-48 |
|
2.1.1 胚性愈伤组织与非胚性愈伤组织的差别 |
47 |
|
2.1.2 体细胞胚的起源及发生部位 |
47-48 |
|
2.1.3 体细胞胚的发育过程 |
48 |
|
2.1.4 “合生”叶的发生部位 |
48 |
|
2.1.5 体细胞胚发生过程的生理隔离现象 |
48 |
|
2.2 重复体细胞胚发生 |
48-49 |
|
2.2.1 利用体细胞胚重复体细胞胚发生 |
48 |
|
2.2.2 利用体细胞胚的子叶重复体细胞胚发生 |
48-49 |
|
2.2.3 “孪生”植株 |
49 |
|
2.3 欧洲七叶树不定芽诱导 |
49-50 |
|
2.3.1 起源于胚芽的不定芽诱导 |
49 |
|
2.3.2 起源于体细胞胚子叶的不定芽诱导 |
49-50 |
|
图版4 胚性细胞与非胚性细胞 |
50-51 |
|
图版5 体细胞胚的起源 |
51-53 |
|
图版6 体细胞胚的发育 |
53 |
|
图版7 球形胚与母体脱离过程 |
53-55 |
|
图版8 欧洲七叶树重复体细胞胚发生 |
55 |
|
图版9 起源于胚芽的不定芽诱导 |
55 |
|
图版10 起源于子叶的不定芽诱导 |
55-56 |
|
第五章 主要结论及展望 |
56-59 |
|
1 主要结论 |
56 |
|
1.1 体细胞胚发生及植株再生体系的建立 |
56 |
|
1.2 欧洲七叶树体细胞胚发生的细胞生物学观察 |
56 |
|
2 存在问题 |
56-57 |
|
3 研究展望 |
57-58 |
|
3.1 作为转基因体系中的研究平台 |
57 |
|
3.2 揭示体细胞胚发生的生化基础 |
57 |
|
3.3 建立体细胞胚发生的悬浮细胞系 |
57 |
|
3.4 生物反应器的应用 |
57-58 |
|
图版11 生物反应器的应用 |
58-59 |
|
附录1 七叶树体细胞胚发生研 |
59-62 |
|
1 影响七叶树结实率低的原因分析 |
59-60 |
|
1.1 雌雄蕊发育的不同步性 |
59 |
|
1.2 营养供应的影响 |
59-60 |
|
2 七叶树体细胞胚发生研究 |
60-61 |
|
2.1 材料 |
60 |
|
2.2 外植体处理 |
60 |
|
2.3 实验结果 |
60 |
|
2.4 实验分析 |
60-61 |
|
图版12 七叶树体细胞胚发生 |
61-62 |
|
附录2 硕士期间申请专利和发表专业论文情况 |
62 |
|
附录3 缩略词中英文对照表 |
62-63 |
|
参考文献 |
63-65 |
|
| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.161765 |