杨树再生体系的建立及Bar基因转化的研究
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杨树再生体系的建立及Bar基因转化的研究
作者:张静 Publish: 2005-7-28 Hits:-
【中文题名】 杨树再生体系的建立及Bar基因转化的研究
【英文题名】 Establishment on Regeneration System of Populus and Studies on Transformation of Bar Gene
【学科专业】 生物物理
【论文级别】 硕士论文
【投稿时间】 2005-7-28
【中关键词】 抗除草剂Bar基因,84K杨(P.,alba×P.,glandulosa),根癌农杆菌,遗传转化
【英关键词】 Herbicide resistance Bar gene,Poplar 84K(P. alba×P. glandulosa),Agrobacterium tumefaciens,Genetic transformation,
【分类导航】 农业科学>林业>森林树种>阔叶乔木>>
【论文摘要】 杨树分布广,适应性强,不仅是重要的经济树种,还在水土保持和维护生态平衡方面发挥重要作用。杨树生长周期短,离体操作容易,基因组相对较小,是根癌农杆菌的天然宿主,是研究木本植物分子生物学和林木基因工程的模式植物。在杨树苗圃育苗中,杂草严重影响其产量和品质,抗除草剂Bar基因是基因工程研究中常用的目的基因和选择标记基因,研究杨树组织培养再生体系和除草剂Bar基因的遗传转化,可为杨树组织培养工厂化育苗和杨树基因工程的研究提供理论和技术基础。 本试验以杨树优良品种 84K 杨为受体,探讨了在 84K 杨再生过程中,各种因素对 84K 杨组织培养再生体系的影响,旨在建立具有良好的稳定性和重复性,易于再生,有很高再生频率的植物基因转化受体系统,为提高 84K 杨再生效率和遗传转化效率提供理论基础。将真核表达载体转入农杆菌中以获得工程菌,并在此基础上通过农杆菌介导法试图将抗除草剂 Bar 基因转入 84K 杨中,并对 84K 杨遗传转化体系做了深入的研究,旨在选育出抗除草剂杨树新品种,为工厂化育苗建立基础,并为研究杨树及木本植物的遗传转化,基因结构和表达等分子生物学内容提供很好的研究材料和理论基础,具有重要的理论和现实...
【论文题纲】
中文摘要 3-5
Abstract 5-9
第一章 文献综述 9-15
1.1 杨树遗传转化的意义 9
1.2 抗除草剂基因在杨树遗传转化中的研究进展 9-11
1.3 杨树遗传转化系统的研究现状 11-12
1.4 杨树遗传转化受体系统的研究进展 12-15
第二章 引言 15-16
第三章 材料与方法 16-24
3.1 试验材料 16
3.2 主要仪器设备及试剂 16-17
3.3 试验方法 17-24
3.3.1 杨树再生体系的建立 17-20
3.3.2 工程菌的构建 20-21
3.3.3 遗传转化体系的研究 21-23
3.3.4 转化苗的分子检测 23-24
第四章 结果与分析 24-46
4.1 杨树再生体系的建立 24-35
4.2 工程菌的构建 35-37
4.3 遗传转化体系的研究 37-46
第五章 讨论 46-51
5.1 84K 杨高效再生体系的建立 46-48
5.1.1 外植体的苗龄对84K 杨腋芽诱导的影响 46
5.1.2 影响84K 杨叶片不定芽玻璃化形成的因素 46-47
5.1.3 激素对84K 杨组培快繁的影响 47-48
5.2 农杆菌叶盘法介导Bar 基因遗传转化体系的研究 48-51
5.2.1 农杆菌有效抑制问题 48
5.2.2 选择压的确定 48
5.2.3 菌液浓度与侵染时间 48-49
5.2.4 预培养与共培养时间 49
5.2.5 乙酰丁香酮加入方式和浓度 49-51
第六章 结论 51-52
参考文献 52-58
附录A 58-59
致谢 59-60
作者简介 60
【DOI】 LunWen.ID:2.2008.161928
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