| 【论文摘要】 |
目的:建立兔脂肪间充质干细胞的体外分离培养方法,鉴定并分析其生物学特性,并探索脂肪组织来源干细胞体外培养的最佳条件方法:选用新西兰大白兔,无菌取出腹股沟脂肪,胶原酶法分离出兔脂肪干细胞,并进行体外培养,取2代以后的兔脂肪干细胞观察其形态特征,并绘制细胞生长曲线及倍增时间。比较了不同胶原酶浓度、胶原酶消化时间和血清浓度对于脂肪来源干细胞体外培养的不同效果。结果:①兔脂肪干细胞原代及传代细胞形态:原代及传代的兔脂肪干细胞均呈长梭形或多边形贴壁生长,生长分化活跃。②兔脂肪干细胞的生长曲线及倍增时间:传代的兔脂肪干细胞生长曲线呈“s”形,倍增时间为55h。○3兔脂肪干细胞的成脂分化诱导,经油红染色的办法,其成脂分化的阳性率为65%○4采用0.5mg/ml、1mg/ml、1.5mg/ml、2mg/ml四种不同胶原酶浓度进行消化后发咸,在消化时间为1h时,2mg/ml组细胞总数最多,活细胞比率与其他组有统计学差异。在消化时间为2h时,细胞总数较1h各组均增加,同时,1mg/ml组、1.5mg/ml组和2mg/ml组消化细胞总数无统计学差异,活细胞比率1mg/ml组和1.5mg/ml组最高。采用5%、10%、15... |
