| 【论文摘要】 |
背景:自1986年Chen冻存人卵成功10余年来,学者们虽对卵子冷冻做了大量工作,但进展缓慢,人们一直在寻求简便、经济、高效的卵子冷冻方法。采用程序化冷冻法,细胞内容易形成冰晶,损伤细胞膜系统。而玻璃化冷冻法是采用高浓度的冷冻保护剂,在快速冷冻过程中,形成一种极其黏稠的无结构的玻璃样状态,有效的避免了卵母细胞内冰晶的形成。玻璃化冷冻法不仅操作简单,而且省时,不需要昂贵的仪器,为卵子冷冻带来了希望。而且,玻璃化冷冻在原有方法的基础之上不断地改进,追求冷冻保护液的低毒,为了加速降温和复温速率,人们不断地在载体上进行改进,如OPS法,是通过减小管腔和管壁厚度,且仅吸入1-2μL含卵冷冻保护液,使冷冻速率达到20000℃/分。尽管如此,由于卵子冷冻技术的不成熟,它仍然没有成为一项常规的治疗手段而应用于临床。
目的:本实验通过建立小鼠实验模型,比较程序化和OPS玻璃化冷冻效果,探讨卵子冷冻的具体方法,为卵子冷冻技术应用于临床提供实验依据。
方法:通过促超排卵获取小鼠MⅡ期卵母细胞,随机分组,观察不同冷冻方法、高浓度的冷冻保护液,对卵子的成活及进一步发育潜能的影响;不同的IVF前培养时间冻融卵子... |
