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织纹螺肌肉中肌原纤维结合型蛋白酶的分离纯化和性质分析

作者：蔡扬鹏 Publish: 2007-9-27 Hits:-

【中文题名】

织纹螺肌肉中肌原纤维结合型蛋白酶的分离纯化和性质分析

【英文题名】

Purification and Characterization of Myofibril-bound Proteinases from the Muscle of Basketshell Nassarius Siquinjorensis

【学科专业】

食品科学

【论文级别】

硕士论文

【投稿时间】

2007-9-27

【中关键词】

织纹螺,金属蛋白酶,丝氨酸蛋白酶,分离纯化,,

【英关键词】

basketshell,metalloproteinase,serine proteinase,purification,

【分类导航】

工业技术>轻工业、手工业>食品工业>一般性问题>基础科学>食品化学

【论文摘要】

织纹螺属软体动物肉食螺类,在底栖群落中扮演重要的角色。本课题以西格织纹螺为对象,对其肌原纤维自身降解的机理进行探索,分离纯化了肌原纤维结合型金属蛋白酶和丝氨酸蛋白酶并进行性质分析。此外,对织纹螺肌肉内源性丝氨酸蛋白酶抑制剂也做了初步研究。西格织纹螺肌原纤维在55℃水浴加热处理时发生明显的自身降解,其中肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MHC)降解消失,副肌球蛋白(paramyosin,PM)发生显著降解,而肌动蛋白仅发生微弱的降解。蛋白酶抑制剂实验发现这种肌原纤维自身降解现象分别受金属蛋白酶抑制剂1,10-phenanthroline和丝氨酸蛋白酶抑制剂Benzamidine部分抑制。当EDTA和Benzamidine共同存在时,自身降解几乎被完全抑制。实验结果提示这种自身降解可能由内源性肌原纤维结合型金属蛋白酶和丝氨酸蛋白酶共同作用引起。织纹螺肌原纤维热抽提处理制备得的粗酶液经过DEAE-Sepharose阴离子交换柱层析,SP-Sepharose阳离子交换柱层析和Phenyl-Sepharose疏水柱层析,分离得到具有金属蛋白酶活力的蛋白质,简称为织纹螺MBMP(my...

【论文题纲】

摘要	4-5
Abstract	5-11
第一章引言	11-19
1.1 基质金属蛋白酶(MATRIX METALLOPROTEINASES，MMPS) 的简介及研究现状	12-14
1.2 肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶（MYOFIBRIL-BOUNDSERINE PROTEINASE，MBSP）的简介及研究现状	14-15
1.3 织纹螺	15-19
第二章实验材料与方法	19-32
2.1 材料	19
2.2 试剂	19-20
2.3 实验所用溶液及其配制	20-21
2.4 仪器	21-22
2.5 实验方法	22-29
2.6 蛋白质浓度测定	29
2.7 SDS-PAGE	29-32
第三章结果与分析	32-64
3.1 织纹螺肌原纤维的自身降解	32-33
3.2 织纹螺MBMP的初步分离和性质分析	33-47
3.3 织纹螺MBSP的分离纯化及性质研究	47-62
3.4 织纹螺肌原纤维中丝氨酸蛋白酶抑制剂的初步分离和性质分析	62-64
第四章讨论与结论	64-69
4.1 讨论	64-67
4.2 结论与展望	67-69
致谢	69-70
参考文献	70-77
在学期间发表的学术论文目录	77

【DOI】

LunWen.ID:2.2008.79006



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