| 【中文题名】 | 鲤鱼体细胞系的构建及鱼类核移植技术的初步研究 |
| 【英文题名】 | Preliminary Studies on Somatic Cell Iines Construction on for Common Carp(Cyprinus Carpio) and Nuclei-Transfer Techniques for Fish |
| 【学科专业】 | 生物化学与分子生物学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2004-9-6 |
| 【中关键词】 | 鲤鱼,金鱼,体细胞,核移植,, |
| 【英关键词】 | common carp,golden carp,somatic cell,nuclear-transfer, |
| 【分类导航】 | 农业科学>水产、渔业>水产基础科学>水产生物学>> |
| 【论文摘要】 | 本文以鲤科鱼类鲤鱼和金鱼为实验材料，取鲤鱼吻端上皮及鳍条组织进行体外培养，并对其进行传代建成了体细胞系，分析了建系过程中培养细胞的生物学特性，其中包括细胞形态学分析、细胞生长曲线的绘制、克隆生成率的检测、细胞对温度适应性的观察、细胞染色体数目的统计及其细胞冻存、复苏程序的摸索等。同时利用继代培养细胞做供体移入鲤鱼和金鱼的具核未受精卵中。实验结果如下：
1.建立了鲤鱼吻端上皮细胞和尾鳍细胞系，现已传至第65代。
2.分析了原代培养细胞及继代培养细胞的生物学特性。
①形态学观察，细胞在培养过程中呈梭形细胞增多的趋势。
②从绘制的生长曲线来看，继代培养细胞在48-72h期间生长最旺盛，分裂速度较快。
③克隆形成率的计算结果显示，吻端上皮和尾鳍第31代细胞克隆生成率都在70%以上。
④对细胞对温度适应性观察可见，鲤鱼细胞对温度的适应性很强，并且对低温的耐受力大大超过对高温的耐受力。
⑤细胞染色体数目统计表明，原代细胞染色体数目和继代培养细胞染色体数目均为2n=100，为正常的二倍体，未出现变异。
⑥在冻存、复苏过程中，我们采取了逐步降温及其悬至液氮罐口两种程序，同时使用甘油和DMSO（... |
| 【论文题纲】 |
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中文摘要 |
6-7 |
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英文摘要 |
7-9 |
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1 引言 |
9-14 |
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2 材料与方法 |
14-17 |
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2.1 细胞培养 |
14 |
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2.1.1 实验材料 |
14 |
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2.1.2 试剂 |
14 |
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2.2 核移植 |
14 |
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2.3 方法 |
14-17 |
|
2.3.1 细胞培养 |
14 |
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2.3.2 培养细胞生物学特性分析 |
14-16 |
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2.3.3 核移植 |
16-17 |
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3 结果 |
17-34 |
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3.1 体细胞系建立 |
17-24 |
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3.1.1 形态学观察 |
17-20 |
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3.1.2 生长曲线的绘制 |
20 |
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3.1.3 细胞对温度的适应性 |
20-21 |
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3.1.4 细胞克隆生成率 |
21 |
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3.1.5 染色体分析 |
21-23 |
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3.1.6 细胞的冻存与复苏 |
23-24 |
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3.2 核移植 |
24-34 |
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4 讨论 |
34-38 |
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4.1 细胞系建立 |
34-35 |
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4.2 核移植 |
35-38 |
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5 结 论 |
38-39 |
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参考文献 |
39-42 |
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攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
42-43 |
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致 谢 |
43 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.164989 |
