| 【中文题名】 | 大黄鱼抗病功能基因的克隆与分析 |
| 【英文题名】 | Cloning and Analysis of Disease-resistance Genes from Large Yellow Croaker |
| 【学科专业】 | 水产养殖学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2007-9-27 |
| 【中关键词】 | 大黄鱼,RT-PCR,定量PCR,ACP,抗病功能基因, |
| 【英关键词】 | large yellow croaker,RT-PCR,real time PCR,ACP,disease-resistance genes, |
| 【分类导航】 | 农业科学>水产、渔业>水产基础科学>水产生物学>水产动物学> |
| 【论文摘要】 |
对大黄鱼腹腔注射副溶血弧菌(实验组)或0.9%氯化钠溶液(对照组),在注射4h、1d、2d、4d、8d、12d和16d后尾部取血,测定其血清中一氧化氮合酶、溶菌酶和酪氨酸酶活力的变化情况。结果表明,注射副溶血弧菌后大黄鱼血清中溶菌酶活力在2d和12d显著高于对照组,在16d则显著低于对照组;酪氨酸酶活力在4d和16d显著高于对照组,在8d极显著高于对照组;但大黄鱼体内的一氧化氮合酶活力没有明显增加。表明大黄鱼血清中的溶菌酶和酪氨酸酶参与了机体对副溶血弧菌的免疫防御。
本研究在上述结果的基础上,利用RT-PCR技术克隆了大黄鱼TNFα、Mx、IgL和IgH基因,并采用定量PCR技术分析了这四个基因的表达情况。结果如下:(1)TNFαcDNA序列全长1339 bp,5’UTR为68 bp,ORF为759 bp,3’UTR为512 bp,可编码252个氨基酸,分子量大约为28kDa。由该序列推导的多肽含有跨膜域及TNF家族的标签序列。同源性分析表明该序列与其它硬骨鱼类甚至哺乳动物的TNFα具有很高的相似性。进化分析显示,大黄鱼TNFα与其它硬骨鱼类TNFα占据进化上独立的分支,而哺乳类TNFα则形... |
| 【论文题纲】 |
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摘要 |
4-5 |
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Abstract |
5-9 |
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第一章 引言 |
9-15 |
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1.1 大黄鱼形态特征、自然分布与地理种群 |
9-10 |
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1.2 大黄鱼渔业的历史沿革 |
10-11 |
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1.3 本研究的背景和目的意义 |
11-12 |
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1.4 主要研究内容和技术路线 |
12-14 |
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1.5 参考文献 |
14-15 |
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第二章 弧菌感染对大黄鱼血液免疫指标的影响 |
15-23 |
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2.1 材料与方法 |
15-16 |
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2.2 结果 |
16-18 |
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2.3 讨论 |
18-21 |
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2.4 参考文献 |
21-23 |
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第三章 RT-PCR 技术克隆大黄鱼弧菌诱导表达基因 |
23-50 |
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3.1 材料与方法 |
24-30 |
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3.2 结果 |
30-42 |
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3.3 讨论 |
42-46 |
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3.4 参考文献 |
46-50 |
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第四章 改良ACP 技术快速克隆大黄鱼弧菌诱导表达基因 |
50-63 |
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4.1 ACP 技术的基本原理 |
50-52 |
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4.2 ACP 技术的优点 |
52-53 |
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4.3 ACP 技术在差异表达基因克隆中的应用 |
53 |
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4.4 材料与方法 |
53-57 |
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4.5 结果与讨论 |
57-61 |
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4.6 参考文献 |
61-63 |
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第五章 弧菌诱导表达基因的实时荧光定量PCR 分析 |
63-74 |
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5.1 材料与方法 |
63-65 |
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5.2 结果 |
65-68 |
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5.3 讨论 |
68-72 |
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5.4 参考文献 |
72-74 |
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第六章 结论与展望 |
74-75 |
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致谢 |
75-76 |
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在学期间发表的学术论文和研究成果 |
76 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.165261 |
