| 【中文题名】 | 稳定高表达HSPB1对大鼠心肌细胞氧化损伤的保护作用研究 |
| 【英文题名】 | HSPB1 Overexpression and Its Protection Against Oxidative Damage Induced by H_2O_2 in Rat Cardiomyocyte Cell Line H9c2 |
| 【学科专业】 | 老年医学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2005-7-22 |
| 【中关键词】 | 热休克蛋白B1,心肌细胞,线粒体膜电位,ROS,细胞凋亡, |
| 【英关键词】 | HSPB1,Cardiomyocyte,Mitochondrial Membrane Potential,Reactive Oxygen Species,Apoptosis, |
| 【分类导航】 | 医药、卫生>内科学>心脏、血管（循环系）疾病>心脏疾病>> |
| 【论文摘要】 | 目的:克隆和重组人心肌热休克蛋白B1(heat shock protein B1,HSPB1)基因,观察HSPB1高表达对大鼠心肌细胞氧化应激的保护作用并阐明其可能机制。
方法:1.将RT-PCR获得的人心肌HSPB1基因全长cDNA,重组入真核表达载体pCDNA3.1~+。2.将重组体pCDNA3.1~+/HSPB1瞬时转染293T细胞株进行真核表达活性测定,随后转染大鼠心肌细胞系H9c2,经G418选择性培养获得稳定转染细胞系。3.以稳定转染细胞系H9c2(HSPB1 H9c2)和空载体转染的H9c2(CON)为实验对象,不同浓度H_2O_2刺激后,倒置光学显微镜观察细胞形态学变化,并观察HSPB1高表达对高浓度H_2O_2诱导的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放的影响和低浓度H_2O_2诱导的细胞凋亡的影响。4.用荧光探针DCFH-DA和JC-1分别检测HSPB1 H9c2和CON细胞中内源性活性氧自由基产生的量及线粒体内膜跨膜电位水平。
结果:1.成功构建重组体pCDNA3.1~+/HSPB1,经酶切分析,得到含有630bp目的条带的阳性克隆。... |
| 【论文题纲】 |
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中文摘要 |
3-5 |
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英文摘要 |
5-7 |
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前言 |
7-15 |
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第一部分 HSPB1基因的克隆、重组和表达 |
15-37 |
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人心肌HSPB1基因克隆、重组和鉴定 |
15-29 |
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在大鼠心肌细胞系H9c2中稳定高表达HSPB1 |
29-37 |
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第二部分 HSPB1对大鼠心肌细胞过氧化损伤的保护作用 |
37-58 |
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HSPB1稳定高表达减少H_2O_2引起的形态学改变 |
37-40 |
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HSPB1稳定高表达减少高剂量H_2O_2引起的损伤性LDH释放 |
40-44 |
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HSPB1稳定高表达减少低剂量H_2O_2引起的细胞凋亡 |
44-48 |
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HSPB1稳定高表达减少内源性活性氧的产生 |
48-51 |
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HSPB1稳定高表达减轻H_2O_2诱导的线粒体膜电位丧失 |
51-58 |
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小结 |
58-59 |
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参考文献 |
59-63 |
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致谢 |
63-64 |
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综述及参考文献 |
64-74 |
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在读期间发表的相关文章 |
74-75 |
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论文独创性声明 |
75 |
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论文使用授权声明 |
75 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.178856 |
