| 【论文摘要】 | 目的:观察雌激素和吉非贝齐对载脂蛋白AⅠ(Apolipoprotein A Ⅰ,ApoA Ⅰ)基因转录活性和表达的影响,探讨ApoA Ⅰ基因启动子区域调控元件在基因转录调控中的作用和潜在机制。
方法:在体外培养的HepG2细胞中,分别加入1,10,20,30μ mol/L的雌激素或20,40,50,60μg/ml的吉非贝齐共同孵育24小时,收集细胞提取RNA及核蛋白;在HepG2细胞中加入10μ mol/L雌激素或40μ g/ml吉非贝齐培养1,6,24小时分别提取RNA及核蛋白。RNA采用逆转录-聚合酶链反应方法测定不同剂量及不同时间点的ApoA Ⅰ mRNA表达。以ApoA
Ⅰ基因启动子肝特异性增强子的A位点序列为探针,用凝胶电泳迁移率滞后实验(EMSA),测定加入雌激素刺激的HepG2细胞核蛋白提取物与A位点的结合情况:以ApoA Ⅰ基因启动子-77～-45bp(drug reaction element,DRE)序列为探针,用EMSA实验测定加入吉非贝齐刺激的HepG2细胞核蛋白提取物与DRE位点的结合情况
结果:(1)用不同剂量的雌激素刺激HepG2细胞,ApoA Ⅰ的... |
