| 【中文题名】 | 腺病毒介导的HSV-tk/GCV体系对晶状体上皮细胞的作用 |
| 【英文题名】 | Effects of Adenovirus-mediated HSV-tk/GCV System on Lens Epithelium |
| 【学科专业】 | 眼科学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2002-7-22 |
| 【中关键词】 | 晶状体上皮细胞,腺病毒载体,单纯疱疹病毒胸苷激酶,丙氧鸟苷,后发性白内障,细胞凋亡 |
| 【英关键词】 | Lens epithelial cells,Adenoviral vector,Herps simplex virus thymidine kinase(HSV-tk),Ganciclovir(GCV),Posterior capsule opacification(PCO),Cell apoptosis, |
| 【分类导航】 | 医药、卫生>眼科学>>>> |
| 【论文摘要】 |
目的:研究腺病毒载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)基因/GCV(丙氧鸟苷)自杀基因治疗系统对体外培养的牛晶状体上皮细胞的杀伤效应,并观察该治疗系统所引起的晶状体上皮细胞的凋亡和坏死现象,以验证细胞死亡的机制。
方法:将腺病毒载体在293细胞中扩增,纯化并滴定病毒的滴度。利用携带HSV-tk基因(自杀基因)的重组腺病毒载体ADV/HSV-tk,感染体外培养的牛晶状体上皮细胞,然后用GCV治疗,以MTT比色法和台盼蓝拒染法来测定在不同浓度(0-250ug/ml)的GCV作用下,不同的时间(1-7天)下,HSV-tk/GCV自杀基因治疗系统对晶状体上皮细胞的杀伤效应,并验证HSV-tk/GCV体系的旁观者效应以及观察不同的病毒感染细胞的时间(1-8小时)和不同的病毒复合感染度(MOI)(0.1-1000)对其杀伤效应的影响。实验以切除E_1区的空腺病毒载体ADV/Empty作为对照。然后利用电镜,TUNEL法(脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法)和吖啶橙-溴化乙啶(AO-EB)染色法观察晶状体上皮细胞的凋亡和坏死现象,并测定和比较实验组与对照组晶状体细胞的凋亡和坏死情况。
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| 【论文题纲】 |
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中文摘要 |
3-5 |
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英文摘要 |
5-8 |
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前言 |
8-10 |
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第一部分: 腺病毒介导的HSV-tk/GCV体系对晶状体上皮细胞杀伤效应的研究 |
10-21 |
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第二部分: 腺病毒介导的HSV-tk/GCV体系引起晶状体上皮细胞凋亡和坏死现象的观察 |
21-31 |
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结论 |
31-32 |
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参考文献 |
32-34 |
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综述: 后发性白内障的基因治疗 |
34-42 |
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致谢 |
42 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.193945 |