p42/p44 MAPK信号通路对缺氧及血清刺激下RPE细胞表达HIF-1α和VEGF的影响-眼科学-论文之家

p42/p44 MAPK信号通路对缺氧及血清刺激下RPE细胞表达HIF-1α和VEGF的影响

作者：赵炜 Publish: 2005-7-19 Hits:-

【中文题名】

p42/p44 MAPK信号通路对缺氧及血清刺激下RPE细胞表达HIF-1α和VEGF的影响

【英文题名】

Role of p42/p44 MAPK Signal Transduction Pathway in Expression of HIF-1α and VEGF in Human Retinal Pigment Epithelium Cells under Hypoxia and Serum

【学科专业】

眼科学

【论文级别】

硕士论文

【投稿时间】

2005-7-19

【中关键词】

【英关键词】

age-related macular degeneration （AMD）,retinal pigment epithelium （RPE）,choroidal neovascularization,hypoxia,hypoxia-inducible factor l（HIF-l）,vascular endothelial growth factor （VEGF）,mitogen-actived protein kinase（MAPK）,signal transduction pathway,

【分类导航】

医药、卫生>眼科学>视网膜及视神经疾病>>>

【论文摘要】

研究背景脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)和视网膜新生血管(retinal neovascularization,RNV)的形成和多种眼部疾病有关,通常会造成严重的视力丧失,最终导致失明,如糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)和年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)受缺氧调节的特性使它成为重要的促新生血管生成因子,参与缺氧诱导的视网膜及脉络膜新生血管形成。视网膜微血管内皮细胞、周细胞和视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞均可产生VEGF,其中以RPE细胞表达VEGF的能力最为显著。在缺氧条件下,缺氧诱导因子-1(hvpoxia inducible factor-1,HIF-1)作为机体对缺氧的一种适应性反应,会表达并激活转录下游基因,如VEGF、EPO和糖酵解酶等,促进机体内环境的重新稳定。其中,VEGF诱导的眼部新生...

【论文题纲】

缩略语表	6-8
中文摘要	8-11
英文摘要	11-15
前言	15-17
文献回顾	17-26
正文	26-51
p42／p44 MAPK信号通路对缺氧及血清刺激下RPE细胞表达HIF-1α和VEGF的影响	26-51
1 引言	26
2 主要材料、试剂和仪器	26-29
3 研究方法	29-38
3.1 RPE细胞的培养和鉴定	29-30
3.1.1 RPE细胞的原代培养	29
3.1.2 RPE细胞的冻存	29
3.1.3 RPE细胞的复苏	29-30
3.1.4 RPE细胞的鉴定	30
3.2 缺氧和血清的影响	30-38
3.2.1 免疫组化染色分析人RPE细胞磷酸化p42/p44 MAPK的表达	30-31
3.2.2 Western blot分析人RPE磷酸化p42／p44 MAPK的表达	31-32
3.2.3 RT-PCR分析人RPE细胞中HIF-1α mRNA的表达	32-35
3.2.4 免疫组织化学染色分析人RPE细胞HIF-1α蛋白的表达	35
3.2.5 western blot分析人RPE细胞HIF-1α蛋白的表达	35-36
3.2.6 免疫荧光染色法检测人RPE细胞内VEGF的表达	36
3.2.7 ELISA检测人RPE细胞上清中VEGF的含量	36-37
3.2.8 MTT法检测缺氧人RPE细胞条件培养基对人脐静脉内皮细胞增殖的影响	37-38
4 结果	38-48
4.1 RPE细胞的生长和鉴定	38-39
4.2 免疫组织化学染色分析人RPE细胞磷酸化p42／p44 MAPK的表达	39-40
4.3 Western blot分析人RPE磷酸化p42／p44 MAPK的表达	40-41
4.4 RT-PCR分析人RPE细胞中HIF-1α mRNA的表达	41-43
4.5 免疫组织化学染色分析人RPE细胞HIF-1α蛋白的表达	43
4.6 Western blot分析人RPE细胞中HIF-1α蛋白的表达	43-44
4.7 免疫荧光染色法检测人RPE细胞内VEGF的表达	44-46
4.8 ELISA检测人RPE细胞上清中VEGF的含量	46-47
4.9 MTT法检测人RPE调理液对人脐静脉内皮细胞增殖的影响	47-48
5 讨论	48-51
小结	51-52
参考文献	52-56
附录	56-60
个人简历和研究成果	60-61
志谢	61-62

【DOI】

LunWen.ID:2.2008.194387



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