| 【中文题名】 | 艾瑞昔布和格列齐特代谢酶表型确定与TD-0232酶诱导研究 |
| 【英文题名】 | CYP Reaction Phenotyping for Imrecoxib and Gliclazide, and Induction Study of TD-0232 |
| 【学科专业】 | 微生物与生化药学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2006-8-4 |
| 【中关键词】 | 药物代谢,细胞色素P450（CYP）,艾瑞昔布,格列齐特,TD-0232,诱导 |
| 【英关键词】 | |
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| 【论文摘要】 |
为更好的进行药物研发,本文以重组CYP酶,混合人肝微粒体为工具,采用液相-质谱联用方法检测,对艾瑞昔布和格列齐特进行体外CYP代谢酶表型确定研究;同时对TD-0232进行动物(大鼠)体内肝CYP诱导研究。
研究结果表明CYP2C9为艾瑞昔布羟基化代谢的主要代谢酶,代谢贡献高达62.5%,CYP2D6次之,代谢贡献为21.1%;CYP2C9和CYP2C19为格列齐特羟基化代谢(包括6β-羟基化代谢和甲基羟化代谢)的主要代谢酶;经过对微粒体活性的检测,TD-0232对大鼠肝CYP存在轻微诱导。初步确立了体外药物代谢酶表型确定的研究模型及动物体内CYP酶的诱导模型。 |
| 【论文题纲】 |
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第一章 前言 |
8-20 |
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1.1 药物代谢 |
8-10 |
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1.2 CYP 概述 |
10-13 |
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1.3 人体的主要 CYP 简介 |
13-15 |
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1.4 CYP 的多态性及在药物开发中的作用 |
15-16 |
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1.5 CYP 的诱导和抑制 |
16-17 |
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1.6 主要的药物体外代谢研究方法 |
17-19 |
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1.7 本文研究目标 |
19-20 |
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第二章 艾瑞昔布的体外羟基化代谢研究 |
20-31 |
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2.1 实验材料 |
21 |
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2.2 方法 |
21-24 |
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2.2.1 重组酶孵育体系 |
21-22 |
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2.2.2 重组 CYP 酶活力检测 |
22-23 |
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2.2.2.1 rCYP2C9 酶活检测 |
22 |
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2.2.2.2 rCYP2D6 酶活检测 |
22-23 |
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2.2.2.3 rCYP3A4 酶活检测 |
23 |
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2.2.2.4 测定重组酶对艾瑞昔布代谢能力 |
23 |
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2.2.3 线性条件检测 |
23-24 |
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2.2.4 酶动力学参数测定 |
24 |
|
2.3 结果 |
24-29 |
|
2.3.1 酶活力检测 |
24-26 |
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2.3.2 线性条件检验 |
26-27 |
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2.3.3 主要代谢酶对艾瑞昔布的代谢 |
27-28 |
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2.3.4 主要代谢酶动力学参数 |
28-29 |
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2.3.5 TNR 法评估各rCYP 酶作用大小 |
29 |
|
2.4 讨论 |
29-31 |
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第三章 格列齐特的药物代谢酶研究 |
31-45 |
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3.1 实验材料 |
32-33 |
|
3.2 方法 |
33-37 |
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3.2.1 微粒体孵育 |
33-34 |
|
3.2.2 RAF 的测定 |
34 |
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3.2.3 动力学研究 |
34 |
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3.2.4 抑制研究 |
34-35 |
|
3.2.5 体内代谢研究 |
35 |
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3.2.6 代谢物分析 |
35-37 |
|
3.2.6.1 甲苯磺丁脲4'-羟化代谢物 |
35 |
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3.2.6.2 安非它酮甲基代谢物 |
35-36 |
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3.2.6.3 格列齐特代谢物分析方法 |
36-37 |
|
3.3 结果 |
37-42 |
|
3.3.1 孵育体系线性条件的检测 |
37 |
|
3.3.2 格列齐特的代谢 |
37-40 |
|
3.3.3 确定介导格列齐特羟化反应的 CYP |
40-41 |
|
3.3.4 化学抑制 |
41-42 |
|
3.4 讨论 |
42-45 |
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第四章 TD-0232 对 CYP 酶诱导研究 |
45-55 |
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4.1 材料与方法 |
45-50 |
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4.1.1 药品与试剂 |
45-46 |
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4.1.2 实验动物 |
46 |
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4.1.3 制备大鼠肝微粒体 |
46-47 |
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4.1.4 微粒体中蛋白浓度测定 |
47 |
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4.1.5 微粒体中 CYP450 酶含量测定 |
47-48 |
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4.1.6 微粒体孵化实验 |
48 |
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4.1.7 酶活性测定 |
48-49 |
|
4.1.8 分析仪器及条件 |
49-50 |
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4.1.8.1 CYP1A（对乙酰氨基酚）的测定 |
49 |
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4.1.8.2 CYP2C（4'-羟基甲苯磺丁脲）的测定 |
49-50 |
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4.1.8.3 CYP3A（咪达唑仑）和 CYP2D（O-去甲基右美沙芬） |
50 |
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4.2 结果 |
50-53 |
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4.3 讨论 |
53-55 |
|
结论 |
55-57 |
|
参考文献 |
57-64 |
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中文摘要 |
64-66 |
|
ABSTRACT |
66-68 |
|
致谢 |
68-69 |
|
作者简历 |
69 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.198975 |
