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摘要 |
11-12 |
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ABSTRACT |
12-13 |
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第1章 引言 |
13-21 |
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1.1 PTTG简介 |
13-14 |
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1.2 泛素-蛋白酶体途径 |
14-16 |
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1.3 蛋白质敲减技术 |
16-17 |
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1.4 绿色荧光蛋白简介与应用 |
17-19 |
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1.5 课题的创新点 |
19 |
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1.6 硕士论文的主要内容 |
19-21 |
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1.6.1 Fbox~(β-TrCP)-PBF、PTTG-EGFP融合蛋白表达质粒及对照质粒的构建 |
19-20 |
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1.6.2 Fbox~(β-TrCP)-PBF对外源PTTG降解作用的研究 |
20 |
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1.6.3 Fbox~(β-TrCP)-PBF对内源PTTG的降解作用及引起的抑癌效应 |
20-21 |
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第2章 Fbox~(β-TrCP)-PBF、PTTG-EGFP融合蛋白表达质粒及对照质粒的构建 |
21-35 |
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2.1 引言 |
21 |
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2.2 材料与方法 |
21-31 |
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2.2.1 细胞 |
21 |
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2.2.2 菌种 |
21 |
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2.2.3 质粒 |
21-22 |
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2.2.4 主要试剂 |
22-23 |
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2.2.5 耗材 |
23 |
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2.2.6 溶液配制 |
23 |
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2.2.7 仪器 |
23-24 |
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2.2.8 方法 |
24-31 |
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2.3 实验结果 |
31-34 |
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2.3.1 各目标DNA片段的克隆 |
31-32 |
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2.3.2 Fbox~(β-TrCP)-PBF融合蛋白表达质粒的构建 |
32 |
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2.3.3 PTTG-EGFP融合蛋白表达质粒的构建 |
32-33 |
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2.3.4 对照用Fbox~(β-TrCP)和PBF表达质粒的构建 |
33-34 |
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2.4 讨论 |
34-35 |
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第3章 Fbox~(β-TrCP)-PBF对外源PTTG降解作用的研究 |
35-45 |
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3.1 引言 |
35 |
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3.2 材料与方法 |
35-39 |
|
3.2.1 试剂 |
35-36 |
|
3.2.2 耗材 |
36 |
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3.2.3 溶液配制 |
36 |
|
3.2.4 仪器 |
36-37 |
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3.2.5 实验方法 |
37-39 |
|
3.3 实验结果 |
39-43 |
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3.3.1 各融合蛋白表达质粒在真核细胞内的表达 |
39-40 |
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3.3.2 Fbox~(β-TrCP)-PBF对外源PTTG的降解效果 |
40-41 |
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3.3.3 Fbox~(β-TrCP)-PBF对外源PTTG的时间梯度降解率 |
41-42 |
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3.3.4 Fbox~(β-TrCP)-PBF降解外源PTTG的泛素-蛋白酶体途径依赖性分析 |
42-43 |
|
3.4 讨论 |
43-45 |
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第4章 Fbox~(β-TrCP)-PBF对内源PTTG的降解作用及引起的抑癌效应 |
45-54 |
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4.1 引言 |
45 |
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4.2 材料与方法 |
45-50 |
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4.2.1 试剂 |
45-46 |
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4.2.2 耗材 |
46 |
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4.2.3 溶液配制 |
46 |
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4.2.4 主要仪器 |
46-47 |
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4.2.5 研究方法 |
47-50 |
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4.3 实验结果 |
50-53 |
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4.3.1 Fbox~(β-TrCP)-PBF降低HeLa细胞内的PTTG蛋白水平 |
50 |
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4.3.2 Fbox~(β-TrCP)-PBF对HeLa细胞PTTG、bFGF和EVGF mRNA水平的影响 |
50-51 |
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4.3.3 Fbox~(β-TrCP)-PBF对HeLa细胞生长的抑制 |
51-52 |
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4.3.4 Fbox~(β-TrCP)-PBF对HeLa细胞非锚着生长的影响 |
52-53 |
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4.4 讨论 |
53-54 |
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结论 |
54-55 |
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参考文献 |
55-60 |
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发表文章目录 |
60-61 |
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致谢 |
61 |
