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辣椒抗蚜性的生化基础及其RAPD分析

作者：陈青 Publish: 2003-3-24 Hits:-

【中文题名】

辣椒抗蚜性的生化基础及其RAPD分析

【英文题名】

Biochemical Basis on Capsicum Resistance to Myzus Persicae (Sulzer) and Its RAPD Analysis

【学科专业】

作物遗传育种

【论文级别】

硕士论文

【投稿时间】

2003-3-24

【中关键词】

辣椒品种,抗蚜性,鉴定,氨基酸,氮,糖

【英关键词】

identification,capsicum cultivar,resistance to Myzus persicae （Sulzer）,amino acids,nitrogen（N）,sugar（S）,proline,vitamin C,ratio of sugar and nitrogen,PPO,PO,AsA-POD,RAPD,

【分类导航】

农业科学>植物保护>病虫害及其防治>园艺作物病虫害及其防治>蔬菜病虫害>茄果类病虫害

【论文摘要】

通过温室苗期接蚜鉴定与田间鉴定，从24个参试辣椒品种中筛选出凉椒一号、猪大肠、都椒一号和新丰五号4个高抗品种；苗丰三号、中椒六号、更新六号和昆椒一号4个抗性品种；大羊角椒、砀椒一号、湘研9402和渝椒五号4个高感品种和保椒二号、泰国正椒三号、福椒六号和湘研十五号4个感性品。以高抗品种猪大肠和高感品种大羊角椒为亲本进行杂交，其杂交F1代对桃蚜的反应表现为高抗(HR)，F2代的抗虫与感虫植株分离符合3：1的比率，表明辣椒抗蚜性由显性单基因控制，能够稳定遗传。上述结果为进一步进行辣椒抗蚜性研究奠定了基础。选用抗感程度较稳定的12个辣椒品种，于4-6叶期对其叶组织中游离氨基酸总量、总氮量、可溶性糖、游离脯胺酸、维生素C(Vc)、过氧化物酶(PO)、多酚氧化酶(PPO)、抗坏血酸过氧化物酶(AsA-POD)活性及过氧化物酶(PO)、多酚氧化酶(PPO)同工酶谱进行了测定。试验结果表明，抗蚜品种较感蚜品种叶组织中含有较低的游离氨基酸、氮、脯胺酸和维生素C(Vc)，但较多的可溶性糖和较高的糖／氮比，后者的游离氨基酸总量、总氮量、脯胺酸和维生素C(Vc)含量分别为前者的1.1-2.9倍、1.0-1.7...

【论文题纲】

中文摘要	5-7
1 前言	7-25
1．1 蚜虫及其危害严重性	8
1．2 植物抗虫性及其在害虫防治中的重要作用	8-10
1．3 作物抗蚜性研究现状	10-13
1．3．1 作物抗蚜性的鉴定与筛选	10
1．3．2 作物抗蚜性的生化基础研究	10-13
1．3．2．1 植物次生代谢产物在抗虫性方面的作用	11-12
1．3．2．2 植物对植食性昆虫的营养在抗虫性方面的作用	12-13
1．4 RAPD技术及其在昆虫学中的应用	13-20
1．4．1 RAPD标记的原理和特点	13-15
1．4．1．1 RAPD标记的原理	14
1．4．1．2 RAPD标记的特点	14-15
1．4．2 RAPD技术在昆虫学中的应用	15-20
1．4．2．1 RAPD技术在昆虫分类学中的应用	15-16
1．4．2．2 RAPD技术在昆虫分子生态学研究中的应用	16-17
1．4．2．3 RAPD技术在害虫抗药性的应用	17-18
1．4．2．4 RAPD技术在作物抗虫性的应用	18
1．4．2．5 分析昆虫基因组，构建基因图谱	18-19
1．4．2．6 DNA遗传标记技术在昆虫分子生物学中的应用	19-20
1．5 RAPD技术在蔬菜育种上的应用	20-23
1．5．1 核心种质资源的保存	20
1．5．2 种质资源遗传亲缘关系研究	20-21
1．5．3 品种（杂种）鉴定	21-22
1．5．4 加速构建高密度的连锁遗传图谱	22-23
1．6 本研究的目的与意义	23-25
2 材料与方法	25-33
2．1 供试材料	25-26
2．1．1 供试辣椒抗蚜性的鉴定的材料来源	25
2．1．2 供试辣椒抗蚜性的生物化学基础研究的材料来源	25
2．1．3 供试辣椒抗蚜性基因的RAPD标记的材料来源	25
2．1．4 供试蚜虫	25-26
2．1．5 主要试剂	26
2．1．6 主要仪器	26
2．2 试验方法	26-33
2．2．1 抗蚜性的鉴定方法	26-27
2．2．1．1 温室苗期鉴定	26
2．2．1．2 田间鉴定	26-27
2．2．1．3 杂种后代F1、F2的抗蚜性鉴定	27
2．2．2 抗蚜性的生物化学基础研究	27-30
2．2．2．1 氨基酸的定量测定	27-28
2．2．2．2 含糖量测定	28
2．2．2．3 含氮量的测定	28
2．2．2．4 脯氨酸含量的测定	28
2．2．2．5 维生素C（Vc）的定量测定	28-29
2．2．2．6 酶液提取	29
2．2．2．7 酶活性测定	29
2．2．2．8 同功酶电泳	29-30
2．2．3 抗蚜性基因的RAPD分析	30-33
2．2．3．1 总DNA提取	30
2．2．3．2 总DNA提取质量检测	30
2．2．3．3 PCR扩增反应各单因子试验	30-32
2．2．3．4 辣椒抗蚜性基因的RAPD标记的筛选与验证	32
2．2．3．5 PCR扩增产物电泳	32-33
3 结果与分析	33-48
3．1 辣椒抗蚜性的鉴定结果	33-35
3．1．1 辣椒抗蚜性的鉴定	33-34
3．1．2 辣椒抗蚜性遗传方式	34-35
3．2 辣椒抗蚜性的生物化学基础研究结果	35-44
3．2．1 抗、感蚜虫辣椒品种叶组织中游离氨基酸含量测定与比较	35
3．2．2 抗感蚜虫辣椒品种叶组织中可溶性糖、氮含量及其糖／氮比测定与比较	35-37
3．2．3 抗感蚜虫辣椒品种叶组织中游离脯胺酸含量测定与比较	37
3．2．4 抗感蚜虫辣椒品种叶组织中维生素C（Vc）含量测定与比较	37-38
3．2．5 抗、感蚜虫辣椒品种叶组织内过氧化物酶（PO）活性测定与比较	38-39
3．2．6 抗、感蚜虫辣椒品种叶组织内多酚氧化酶（PPO）活性测定与比较	39
3．2．7 抗、感蚜虫辣椒品种叶组织内抗坏血酸过氧化物酶（AsA-POD）活性测定与比较	39-40
3．2．8 抗、感蚜虫辣椒品种在接蚜虫前后叶组织内过氧化物酶同工酶谱带的变化	40-41
3．2．9 抗、感蚜虫辣椒品种在接蚜虫前后叶组织内多酚氧化酶同工酶谱带的变化	41-44
3．3 辣椒抗蚜性基因的RAPD分析结果	44-48
3．3．1 总DNA提取质量检测	44
3．3．2 PCR扩增反应实验体系的建立	44-45
3．3．3 辣椒抗蚜性基因连锁的RAPD标记的筛选	45-46
3．3．4 RAPD标记OPA18_（600）在F2群体和其它供试抗、感品种中的验证	46-48
4 讨论	48-51
5 结论	51-52
参考文献	52-59
英文摘要	59-61
致谢	61

【DOI】

LunWen.ID:2.2008.151665



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