瓜枝孢弱致病菌株诱导黄瓜抗病性分子机制的初步研究
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瓜枝孢弱致病菌株诱导黄瓜抗病性分子机制的初步研究
作者:汪海军 Publish: 2007-9-18 Hits:-
【中文题名】 瓜枝孢弱致病菌株诱导黄瓜抗病性分子机制的初步研究
【英文题名】 Primary Studies on Molecular Mechanism of Inducing Resistance of Attenuated Strains of Cladosporium Cucumerinum in Cucumber
【学科专业】 植物病理学
【论文级别】 硕士论文
【投稿时间】 2007-9-18
【中关键词】 瓜枝孢,弱致病菌株,诱导抗病性,黄瓜,黑星病,
【英关键词】 Cladosporium cucumernium,Attenuated strains,Induced resistance,Cucumber,Cucumber Scab,
【分类导航】 农业科学>植物保护>病虫害及其防治>园艺作物病虫害及其防治>蔬菜病虫害>瓜类病虫害
【论文摘要】  生物因子诱导的植物抗病性是增强寄主抗病性的重要方法。与病毒相比,真菌、细菌弱致病菌及其诱导抗病机制的研究相对滞后。本论文以本实验室通过高温诱导在国内外首次筛选出的瓜枝孢(Cladosporium cucumernium)弱致病菌株为试材,采用AFLP技术系统分析了瓜枝孢弱致病菌株基因组的变化,以及瓜枝孢弱致病菌株诱导黄瓜抗病的差异表达,取得如下阶段性进展: 1、通过瓜枝孢弱致病菌株诱导黄瓜抗病性的表型鉴定,进一步验证了瓜枝孢弱致病菌株具有稳定的致弱性,能显著提高黄瓜对黑星病的抗性,诱导抗病效果达77.01%。 2、瓜枝孢弱致病菌株2R和3R的孢子比对应强致病菌株2Q和3Q的孢子小,形态规则,孢子形状呈椭圆形或近圆形,而对应强致病菌株孢子形状多种多样,有梭形、近梭形、椭圆形及近圆形等形状。 3、AFLP技术可以有效揭示弱致病菌株DNA水平的变异,瓜枝孢经50℃高温处理得到的弱致病菌株基因组发生了显著的变化。256个APLP引物组合在扩增2R/2Q和3R/3Q时(2Q和3Q为强致病菌株),分别产生2910和2216个DNA片段产生,2R与2Q以及3R与3Q的遗传相似性分别为24....
【论文题纲】
摘要 5-6
Abstract 6-9
第一章 绪论 9-16
1.1 前言 9
1.2 黄瓜诱导抗病性研究进展 9-13
1.2.1 黄瓜诱导抗病因子 9
1.2.2 黄瓜诱导抗病机理 9-12
1.2.3 黄瓜诱导抗病性的研究展望 12-13
1.3 cDNA-AFLP技术在研究植物基因差异表达中的应用 13-14
1.3.3 cDNA-AFLP技术的应用 13-14
1.4 本研究的意义 14-16
第二章 瓜枝孢弱致病菌株基因组分析 16-25
2.1 材料与方法 16-18
2.1.1 瓜枝孢弱致病菌株的筛选 16
2.1.2 瓜枝孢弱致病菌株致病性鉴定 16-17
2.1.3 弱致病菌株遗传稳定性研究 17
2.1.4 弱致病菌株基因组分析 17
2.1.5 AFLP 17-18
2.1.6 数据处理 18
2.2 结果与分析 18-23
2.2.1 黄瓜黑星病弱致病菌的筛选 18-19
2.2.2 瓜枝孢弱致病菌株遗传稳定性研究 19-20
2.2.3 瓜枝孢弱致病菌株及其强致病菌株的差异 20
2.2.4 RAPD扩增图谱 20-21
2.2.5 AFLP扩增图谱 21-22
2.2.6 高温诱导的弱致病菌株与其强致病菌株间的遗传相似性 22-23
2.3 小结 23-25
第三章 瓜枝孢弱致病菌株诱导黄瓜抗病差异表达分析 25-38
3.1 材料与方法 25-28
3.1.1 瓜枝孢弱致病菌株诱导抗病性鉴定 25
3.1.2 cDNA-AFLP体系 25-27
3.1.3 瓜枝孢弱致病菌株诱导的cDNA差异片段克隆 27-28
3.1.4 cDNA差异片段测序 28
3.1.5 cDNA差异片段的序列同源性搜索与相似性比对 28
3.1.6 cDNA差异片段Northern Blot验证 28
3.2 结果与分析 28-37
3.2.1 瓜枝孢弱致病菌株诱导黄瓜对黑星病抗性的表型鉴定 28-29
3.2.2 黄瓜cDNA-AFLP反应体系优化 29-31
3.2.3 与瓜枝孢弱致病菌株诱导黄瓜抗病相关的差异片段的cDNA-AFLP分析 31
3.2.4 瓜枝孢弱致病菌株诱导黄瓜抗病相关基因的时序表达 31-33
3.2.5 差异表达片段的回收和克隆 33-34
3.2.6 差异表达片段的测序及同源性比较 34-36
3.2.7 Northern杂交分析 36-37
3.3 小结 37-38
第四章 结论与讨论 38-43
4.1 结论 38-39
4.1.1 验证了瓜枝孢弱致病菌株2R的致弱性及对黄瓜黑星病的诱导抗病性 38
4.1.2 从基因组水平分析了高温诱导产生的弱致病菌株与强致病菌株的差异 38
4.1.3 优化了黄瓜cDNA-AFLP反应体系 38
4.1.4 分析了瓜枝孢弱致病菌株诱导黄瓜抗病相关基因差异表达的时序性 38-39
4.1.5 获得了经Northern验证的瓜枝孢弱致病菌株诱导的4个特异DNA片段序列及其同源性比对结果 39
4.2 讨论 39-43
4.2.1 瓜枝孢弱致病菌株的诱导抗病性 39
4.2.2 高温诱导产生的瓜枝孢弱致病菌株的基因组分析 39-40
4.2.3 瓜枝孢弱致病菌株诱导黄瓜抗病机理研究 40-41
4.2.4 cDNA-AFLP在差异显示分析中的应用 41-43
参考文献 43-48
附录 48-54
致谢 54-55
作者简历 55
【DOI】 LunWen.ID:2.2008.152081
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