| 【中文题名】 | 番木瓜环斑病毒罗汉果分离株生物学特性研究及其抗体的研制与应用 |
| 【英文题名】 | Study on Biological Characteristics of Papaya Ringspot Virus Luohanguo Isolate and Preparation and Application of Antibodies Against the Virus |
| 【学科专业】 | 植物病理学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2007-9-14 |
| 【中关键词】 | 番木瓜环斑病毒,罗汉果分离株,生物学特性,抗血清制备,其它寄主带毒检测, |
| 【英关键词】 | Papaya ringspot virus,Siraitia grosvenori （Luohanguo） isolate,biological characteristics,antiserum preparation,virus carrying hosts detection, |
| 【分类导航】 | 农业科学>植物保护>病虫害及其防治>园艺作物病虫害及其防治>果树病虫害>多年生草本果类病虫害 |
| 【论文摘要】 |
罗汉果病毒病由番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus，PRSV)、小西葫芦黄化花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus，ZYMV)和西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus，WMV)复合侵染引起。本研究对PRSV罗汉果分离株(PRSV-LHG)进行了分离、繁殖、提纯、生物学特性研究、多克隆抗体的研制，并用多克隆抗体检测田间植物的带毒情况，以了解PRSV-LHG的田间寄主范围。研究结果显示，用丝瓜(Luffa cylindrica)可以从罗汉果病叶中分离到PRSV-LHG，用西葫芦(Cucurbita pepo)作为PRSV-LHG的繁殖寄主。在供试的寄主植物中，PRSV-LHG能侵染葫芦科(Cucurbitaceae)的南瓜(Cucurbita moschata)、西葫芦、丝瓜及藜科(Chenopodiaceae)的苋色藜(Chenopodium amaranticolor)，但不能侵染葫芦科的葫芦(Lagenaria siceraria)、冬瓜(Benincasa hispida)、毛节瓜(B．hispida)等，茄科(Solana... |
| 【论文题纲】 |
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摘要 |
4-6 |
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ABSTRACT |
6-11 |
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前言 |
11-16 |
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1 罗汉果的生产现状及其病虫害的发生 |
11-12 |
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2 罗汉果病毒病的研究进展 |
12-13 |
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3 PRSV的研究概况 |
13-14 |
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4 本研究的目的和意义 |
14-16 |
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第一章 材料与方法 |
16-29 |
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1.1 材料 |
16-18 |
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1.1.1 发病罗汉果植株 |
16 |
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1.1.2 寄主范围供试植物 |
16-18 |
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1.1.3 实验动物 |
18 |
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1.1.4 血清学检测供检植物 |
18 |
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1.2 主要试剂 |
18-21 |
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1.2.1 植物病毒接种缓冲液 |
18-19 |
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1.2.2 RT-PCR所用试剂及引物 |
19 |
|
1.2.3 植物病毒提取所用试剂 |
19-20 |
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1.2.4 福氏完全佐剂与福氏不完全佐剂 |
20 |
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1.2.5 植物总蛋白提取所需试剂 |
20 |
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1.2.6 间接ELISA所用试剂 |
20-21 |
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1.3 方法 |
21-29 |
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1.3.1 PRSV-LHG的分离与繁殖 |
21-23 |
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1.3.2 PRSV-LHG生物学特性测定 |
23-24 |
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1.3.3 PRSV-LHG的提纯及形态观察 |
24-25 |
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1.3.4 PRSV-LHG多克隆抗体的制备 |
25-27 |
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1.3.5 罗汉果果园植物带毒情况的血清学检测 |
27-29 |
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第二章 结果与分析 |
29-53 |
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2.1 PRSV-LHG的分离 |
29-30 |
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2.1.1 单斑分离 |
29 |
|
2.1.2 寄主选择分离 |
29-30 |
|
2.2 PRSV-LHG生物学特性的测定 |
30-36 |
|
2.2.1 寄主范围 |
30-32 |
|
2.2.2 稀释限点 |
32-33 |
|
2.2.3 体外保毒期 |
33-35 |
|
2.2.4 钝化温度 |
35-36 |
|
2.2.5 蚜虫传播试验 |
36 |
|
2.3 PRSV-LHG的提纯 |
36-38 |
|
2.3.1 PRSV-LHG提纯液的全波长扫描图谱及浓度测定 |
36-37 |
|
2.3.2 PRSV-LHG的形态观察 |
37-38 |
|
2.4 PRSV-LHG抗血清的制备 |
38-41 |
|
2.4.1 抗原最佳包被量 |
38-39 |
|
2.4.2 抗血清效价的测定 |
39 |
|
2.4.3 抗血清的处理 |
39-41 |
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2.5 罗汉果果园植物带毒情况的血清学检测 |
41-53 |
|
2.5.1 对罗汉果果园的调查 |
41-42 |
|
2.5.2 所采集植物的种类 |
42-48 |
|
2.5.3 检测呈阳性的植物种类 |
48-53 |
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第三章 讨论 |
53-58 |
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3.1 PRSV-LHG的分离 |
53 |
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3.2 PRSV-LHG的生物学特性测定 |
53-54 |
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3.3 PRSV-LHG的提纯研究 |
54-55 |
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3.4 PRSV-LHG抗血清的制备及应用 |
55-56 |
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3.5 对罗汉果病毒病的防治建议 |
56-58 |
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第四章 结论 |
58-60 |
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4.1 PRSV-LHG的分离 |
58 |
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4.2 PRSV-LHG生物学特性 |
58 |
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4.3 PRSV-LHG的提纯及形态观察 |
58 |
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4.4 PRSV-LHG抗血清的制备 |
58 |
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4.5 罗汉果果园植物带毒情况的血清学检测 |
58-60 |
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参考文献 |
60-65 |
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附录1 彩图 |
65-68 |
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附录2 实验中用到的主要仪器 |
68-69 |
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致谢 |
69-70 |
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攻读学位期间发表论文情况 |
70 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.152084 |
