| 【中文题名】 | 胸腺肽β_4分离纯化工艺的研究 |
| 【英文题名】 | Study on the Technique of Purifying Thymosinβ_4 from Calf Thymus |
| 【学科专业】 | 生物化工 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2007-7-10 |
| 【中关键词】 | 胸腺肽,胸腺肽β_4,离子交换,高效液相色谱,非变性电泳,质谱 |
| 【英关键词】 | thymosin,thymosinβ_4,HPLC,nondenaturing electrophoresis,mass spectrometry, |
| 【分类导航】 | 工业技术>化学工业>制药化学工业>生物制品药物的生产>氨基酸、肽、蛋白质> |
| 【论文摘要】 |
胸腺肽是胸腺分泌的具有生物活性的一类多肽混合物，是一种免疫增强剂。胸腺肽β_4(thymosinβ_4)是胸腺肽的一种，广泛存在于各类动物器官中。研究发现胸腺肽β_4具有消炎和促进创伤愈合的功效，能够促进创伤部位的血管生成、胶原沉积，可促进眼角膜的复合及头发的再生，具有很高的医用价值。本文主要研究了胸腺肽β_4分离纯化的工艺，主要工作包括：离子交换介质的筛选、胸腺肽β_4离子交换色谱纯化工艺的建立和离子交换色谱过程的优化。
利用静态吸附的方法，从10种离子交换介质中筛选出CM-Sepharose FF阳离子交换凝胶和DEAE-Sepharose FF阴离子交换凝胶作为分离过程的离子交换介质。
胸腺肽β_4分离纯化工艺主要包括：1)胸腺素5的提取：采用硫酸铵沉淀法，从小牛胸腺中用25％～50％的硫酸铵饱和度沉淀得到胸腺素5；2)离子交换色谱分离：首先采用CM-Sepharose FF对胸腺素5进行分离，溶液中的目标产物吸附在离子交换柱上之后，分别通过1％、4％、5％的NaCl盐溶液阶跃洗脱，检测发现目标产物存在于4％的洗脱峰中。其次，收集的洗脱峰吸附于DEAE-Sepharose FF... |
| 【论文题纲】 |
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摘要 |
3-4 |
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Abstract |
4-8 |
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第1章 文献综述 |
8-23 |
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1.1 胸腺肽 |
8 |
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1.2 胸腺肽β_4的生物化学特性 |
8-11 |
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1.2.1 化学结构 |
8-9 |
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1.2.2 胸腺肽β_4的生物活性 |
9-10 |
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1.2.3 生物学分布及表达情况 |
10-11 |
|
1.3 胸腺肽的生理功能 |
11-16 |
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1.3.1 免疫学功能 |
11-12 |
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1.3.2 在神经系统发育中的重要作用 |
12-13 |
|
1.3.3 影响造血干细胞增殖 |
13 |
|
1.3.4 促进创伤愈合 |
13-14 |
|
1.3.5 肌动蛋白分离剂 |
14-15 |
|
1.3.6 调节肌动蛋白的动力学变化 |
15-16 |
|
1.4 应用前景 |
16-18 |
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1.4.1 治疗创伤及脱发 |
16-17 |
|
1.4.2 治疗肿瘤 |
17-18 |
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1.5 胸腺肽β_4分离纯化的研究进展 |
18-22 |
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1.5.1 胸腺素5的提取 |
18-19 |
|
1.5.2 胸腺肽β_4的纯化 |
19-20 |
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1.5.3 胸腺肽β_4的检测与理化性质的考察 |
20-22 |
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1.6 本文的研究内容及思路 |
22-23 |
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第2章 胸腺肽β_4分离纯化工艺的研究 |
23-39 |
|
2.1 材料与方法 |
23-27 |
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2.1.1 离子交换介质 |
23 |
|
2.1.2 分离用仪器与设备 |
23-24 |
|
2.1.3 标准品及所用试剂 |
24 |
|
2.1.4 实验方法 |
24-27 |
|
2.2 结果与讨论 |
27-38 |
|
2.2.1 静态吸附筛选 |
27-29 |
|
2.2.2 胸腺肽β_4的分离纯化 |
29-34 |
|
2.2.3 胸腺肽β_4产品的分析检测 |
34-38 |
|
2.3 小结 |
38-39 |
|
第3章 胸腺肽β_4分离工艺的优化 |
39-49 |
|
3.1 前言 |
39 |
|
3.2 材料与方法 |
39-41 |
|
3.2.1 离子交换及凝胶过滤介质 |
39 |
|
3.2.2 仪器设备 |
39-40 |
|
3.2.3 实验方法 |
40-41 |
|
3.3 结果与讨论 |
41-48 |
|
3.3.1 胸腺素5提取方法的比较 |
41 |
|
3.3.2 离子交换过程的优化 |
41-47 |
|
3.3.3 胸腺肽β_4产品脱盐过程的优化 |
47-48 |
|
3.4 小结 |
48-49 |
|
第4章 产品理化性质的考察 |
49-55 |
|
4.1 前言 |
49 |
|
4.2 材料与方法 |
49-52 |
|
4.2.1 检测设备 |
49 |
|
4.2.2 标准品及检测所用试剂 |
49-50 |
|
4.2.3 实验方法 |
50-52 |
|
4.3 结果与讨论 |
52-54 |
|
4.3.1 胸腺肽β_4的活性检测 |
52-53 |
|
4.3.2 胸腺肽β_4的质谱检测 |
53-54 |
|
4.4 小结 |
54-55 |
|
第5章 离子交换树脂的初步研究 |
55-62 |
|
5.1 前言 |
55 |
|
5.2 材料与方法 |
55-56 |
|
5.2.1 离子交换介质 |
55 |
|
5.2.2 仪器设备 |
55 |
|
5.2.3 实验方法 |
55-56 |
|
5.3 结果与讨论 |
56-60 |
|
5.3.1 阳离子交换树脂动态吸附胸腺肽β_4的研究 |
56-59 |
|
5.3.2 Purolite C115E与DEAE-Sepharose FF结合进行批次操作 |
59-60 |
|
5.4 小结 |
60-62 |
|
第6章 结论与建议 |
62-64 |
|
6.1 结论 |
62-63 |
|
6.2 建议 |
63-64 |
|
参考文献 |
64-68 |
|
致谢 |
68 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.57614 |
