| 【中文题名】 | 重组人粒细胞刺激因子（rhG-CSF）的分离纯化工艺研究 |
| 【英文题名】 | The Investigation of the Separation and Purification Procedure of Recombinant Human Granulocyte Colony-stimulating Factor |
| 【学科专业】 | 生物工程 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2007-9-12 |
| 【中关键词】 | 重组人粒细胞刺激因子,分离,纯化,,, |
| 【英关键词】 | Recombinant Human Granulocyte Colony-stimulating Factor,Separation,Purification, |
| 【分类导航】 | 工业技术>化学工业>制药化学工业>生物制品药物的生产>> |
| 【论文摘要】 |
重组人粒细胞刺激因子系将含人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)基因的重组质粒转化大肠杆菌,使其高效表达人粒细胞集落刺激因子,经发酵、分离、纯化制成。主要用于治疗放疗、化疗引起的白细胞减少症,提高人体白细胞数量和免疫功能。
1991年6月美国FDA批准了美国Amgen公司生产的GCSF上市.1997年全球的GCSF销售额已接近20亿美元. 1996年10月,国内公司第一家研制成功升白细胞特效药――吉粒芬(rhG-CSF)被批准,此药被国内媒体赞誉为"中国第一针";从国内情况看,G-CSF系列产品的市场预计大于EPO(EPO的市场潜量为20亿元左右)。在国内,众多的生产厂家基本是以包涵体方式被纯化,以分泌型蛋白质被纯化的较少。本试验重点研究以分泌型表达的重组人粒细胞刺激因子的分离、纯化。主要研究分泌型表达的重组人粒细胞刺激因子的裂解与盐析方法的不同以及对蛋白质回收率的影响,并对以后的层析纯化进行了初步的研究。本次试验的目的在于探索对于分泌型表达的重组人粒细胞刺激因子效果较好的一种蛋白质提取方法、层析方法,以最简单的步骤,获得较好的纯度与收率,以降低生产成本。 |
| 【论文题纲】 |
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内容提要 |
4-6 |
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第一章 前言 |
6-11 |
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1.1 重组人粒细胞集落刺激因子的相关研究 |
6-8 |
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1.2 蛋白质的纯化 |
8-10 |
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1.3 本课题的立题依据 |
10 |
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1.4 实验思路与方法 |
10-11 |
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第二章 实验材料与方法 |
11-31 |
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2.1 材料、仪器和试剂 |
11-17 |
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2.2 方法 |
17-31 |
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第三章 结果与讨论 |
31-44 |
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3.1 蛋白含量检测 |
31-33 |
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3.2 纯度检测 |
33-38 |
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3.3 效价的检测 |
38-39 |
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3.4 热原的检测 |
39 |
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3.5 宿主菌蛋白残留量检测 |
39-42 |
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3.6 等电点检测 |
42-44 |
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结论 |
44-46 |
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参考文献 |
46-50 |
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中文摘要 |
50-51 |
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Abstract |
51-53 |
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致谢 |
53 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.57728 |
