| 【中文题名】 | JAK激酶抑制剂AG490阻断肝癌细胞Stat3信号通路逆转免疫抑制实验研究 |
| 【英文题名】 | Janus Kinase Inhibitor AG490 Blocks Stat3 Signaling Pathway and Reverses Immunosuppression in Hepatic Cancer Cells |
| 【学科专业】 | 免疫学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2007-4-3 |
| 【中关键词】 | Stat3mRNA,凋亡,肿瘤细胞,抑制因子,免疫抑制, |
| 【英关键词】 | Stat3mRNA,apoptosis,tumor cell,inhibition factor,immune inhibition, |
| 【分类导航】 | 医药、卫生>肿瘤学>消化系肿瘤>肝肿瘤>> |
| 【论文摘要】 |
Stat3是一种存在于细胞浆中的在酪氨酸磷酸化及信号通路偶联中起关键作用的双功能蛋白,调控与细胞增殖、凋亡相关功能蛋白的表达。为检测Stat3mRNA在肿瘤细胞中的表达,探讨JAK激酶抑制剂AG490阻断Stat3信号转导通路对细胞增殖、凋亡及免疫抑制因子基因表达的影响,研究Stat3信号通路与免疫抑制因子之间可能存在的内在联系。采用半定量RT-PCR法对人6种肿瘤细胞进行Stat3mRNA表达检测;应用AG490作用于肝癌细胞株Smmc7721,采用流式细胞术等动态观察肝癌细胞增殖、凋亡状况;RT-PCR法检测Stat3mRNA表达以及VEGF、TGF-β和IL-10等免疫抑制因子基因的表达情况。结果表明,在所检测的人肿瘤细胞中,MCF-7、PC-3m、Smmc7721、BGC823及Hela细胞株中均有Stat3mRNA的表达;肝癌细胞Smmc7721增殖水平、Stat3及免疫抑制因子VEGF、TGF-β和IL-10等的mRNA表达随AG490作用时间延长而下降。提示Stat3在肿瘤细胞增殖、凋亡过程中起关键性作用, AG490阻断Stat3信号转导通路可具有逆转免疫抑制效应。 |
| 【论文题纲】 |
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内容提要 |
4-7 |
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引言 |
7-9 |
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第一章 文献回顾 |
9-23 |
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第一节 癌基因STAT3 的研究进展 |
9-14 |
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一 Stat3 的生物学特性 |
9-10 |
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二 Stat3 的生物学功能 |
10-11 |
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三 Stat3 在肿瘤发生发展中的作用 |
11-14 |
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第二节 免疫抑制 |
14-22 |
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一 肿瘤与免疫抑制 |
14-16 |
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二 免疫抑制因子 |
16-20 |
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三 JAK 激酶抑制剂－AG490 |
20-22 |
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课题设计思路 |
22-23 |
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第二章 实验研究 |
23-55 |
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第一节 实验材料 |
23-26 |
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一 主要细胞株 |
23 |
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二 主要实验药品 |
23 |
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三 主要试剂与仪器 |
23-25 |
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四 PCR 引物序列 |
25-26 |
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第二节实验方法 |
26-33 |
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一 肿瘤细胞株的培养和传代 |
26-27 |
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二 人肝癌细胞株Smmc7721 增殖活性测定（MTT） |
27-28 |
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三 流式细胞术分析细胞周期及凋亡 |
28 |
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四 AG490 作用前后人肝癌细胞株Smmc7721 培养上清对正常细胞的增殖作用测定 |
28-29 |
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五 引物设计 |
29 |
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六 逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）检测各肿瘤细胞中Stat3mRNA 表达 |
29-32 |
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七 逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）检测AG490 作用前后Smmc7721 细胞Stat3mRNA、免疫抑制因子及FasLmRNA 表达 |
32 |
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八 PCR 产物电泳检测 |
32 |
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九 统计学处理 |
32-33 |
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第三节实验结果 |
33-48 |
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一 Stat3mRNA 在人肿瘤细胞株中的表达 |
33 |
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二 人肝癌细胞株Smmc7721 中免疫抑制因子及FasLmRNA 的表达 |
33-34 |
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三 AG490 阻断Stat3 信号通路对Smmc7721 细胞增殖抑制作用 |
34-35 |
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四 AG490 阻断Stat3 信号通路对Smmc7721 细胞周期及凋亡的影响 |
35-38 |
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五 AG490 阻断前后不同时间段Smmc7721 培养上清对正常细胞的作用 |
38-42 |
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六 AG490 阻断前后不同时间段Smmc7721 中Stat3mRNA 的表达 |
42-43 |
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七 AG490 阻断前后不同时间段Smmc7721 中免疫抑制因子及FasLmRNA 表达 |
43-48 |
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讨论 |
48-55 |
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结论 |
55-56 |
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参考文献 |
56-64 |
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英文缩写词表 |
64-65 |
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中文摘要 |
65-68 |
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ABSTRACT |
68-72 |
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致谢 |
72 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.192663 |
