| 【中文题名】 | 秦艽的组织培养、发根体系建立及发根中次生代谢产物的变化 |
| 【英文题名】 | |
| 【学科专业】 | 中药学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2005-11-18 |
| 【中关键词】 | 秦艽,组织培养,愈伤组织,愈伤组织分化,发根农杆菌,发根 |
| 【英关键词】 | Genetiana macrophylla Pall.,tissue culture,callus,callus differentiation,Agrobacterium rhizogenes,hairy root,gentiopcroside, |
| 【分类导航】 | 医药、卫生>中国医学>中药学>中药材>各类药材>植物药 |
| 【论文摘要】 | 以秦艽的叶和下胚轴为外植体,成功的诱导出愈伤组织和再生植株。诱导愈伤组织最合适的培养基为附加2mgL~(-1)2,4—D和0.5 mgL~(-1)6—BA的MS培养基,诱导率可达到100%。愈伤组织转移到附加2 mg·L~(-1)2,4—D和0.5 mg·L~(-1)KT和500 mg·L~(-1)LH的MS培养基上进行继代培养,增殖后的愈伤组织转移到附加0.1 mg·L~(-1)2,4—D和0.5 mg·L~(-1)6—BA的MS分化培养基上进行分化,其分化率可达到86.67%,将分化出的芽转接到不加激素的MS上,结果可生长出大量的分化苗。
运用发根农杆菌A_4和LBA9402Bin19分别感染秦艽的外植体,经实验可得,只有在加入6mg·L~(-1)IBA MS培养基上才能成功的诱导出发根,并且以叶片为外植体时,诱导发根的频率最高,其中A_4的转化率为87%,LBA9402Bin19的转化率为63%。将发根在无激素的MS培养基上生长时,表现出大量的分枝和无向地性等特点。经除菌和筛选后,将发根转接到不含激素的1/2MS液体培养基上,120 r/min,26±2℃黑暗条件下,发根表现出快速生长的特... |
| 【论文题纲】 |
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目录 |
3-5 |
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摘要 |
5-6 |
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ABSTRACT |
6-7 |
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第一章 前言 |
7-28 |
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一 秦艽的研究现状 |
7-12 |
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1、秦艽的草本学考证研究 |
7-8 |
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2、化学研究 |
8 |
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3、解剖学研究 |
8-9 |
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4、胚胎学研究 |
9 |
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5、秦艽的栽培 |
9-10 |
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6、秦艽中龙胆苦甙的生物合成途径 |
10-11 |
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7、药理及临床研究 |
11-12 |
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二、发根农杆菌在药用植物中的应用 |
12-28 |
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1、发根农杆菌 |
12-13 |
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2、发根农杆菌RI质粒的结构与功能 |
13-15 |
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3、发根的诱导 |
15-19 |
|
4、影响发根农杆菌转化的因素 |
19-21 |
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5、影响发根中次生代谢物合成的因素 |
21-22 |
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6、发根的生物转化和生物合成 |
22-23 |
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7、发根农杆菌转化成功的药用植物 |
23-24 |
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8、药用植物发根的应用 |
24-25 |
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9、转基因药用植物发根 |
25-26 |
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10、问题与展望 |
26-28 |
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第二章 材料与方法 |
28-42 |
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一、材料 |
28 |
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二、方法 |
28-42 |
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1、种子萌发 |
28-29 |
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2、愈伤组织的诱导 |
29-31 |
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3、愈伤组织的继代培养 |
31 |
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4、愈伤组织的分化 |
31 |
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5、发根农杆菌的培养 |
31-32 |
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6、发根农杆菌感染秦艽的外植体 |
32-34 |
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7、发根转化体系的鉴定 |
34-40 |
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8、秦艽中的生物活性成分的提取与分析 |
40-42 |
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第三章 结果与分析 |
42-54 |
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一、秦艽的组织培养 |
42-47 |
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1、温度和赤霉素(GA3)浓度对种子萌发的影响 |
42 |
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2、愈伤组织的形成 |
42-45 |
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3、愈伤组织的继代培养 |
45 |
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4、愈伤组织的分化 |
45-47 |
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二、秦艽发根体系的建立 |
47-52 |
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1、发根农杆菌感染秦艽的外植体 |
47-50 |
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2、发根转化体系的鉴定 |
50-52 |
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三、发根农杆菌感染秦艽后对其所含的生理活性物质含量的影响 |
52-54 |
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1、HPLC检测 |
52-53 |
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2、薄层层析检测 |
53-54 |
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第四章 结论 |
54-56 |
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1、秦艽的组织培养 |
54-55 |
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1.1 大叶秦艽的种子萌发 |
54 |
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1.2 愈伤组织的诱导 |
54 |
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1.3 大叶秦艽愈伤组织的继代培养 |
54-55 |
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1.4 叶秦艽愈伤组织的分化 |
55 |
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2、秦艽发根体系的建立 |
55 |
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3、秦艽发根中次生代谢产物的含量变化 |
55 |
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4、课题的创新之处和研究的难点以及意义 |
55-56 |
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参考文献 |
56-61 |
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致谢 |
61-65 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.171579 |
