| 【中文题名】 | 喜树中喜树碱积累规律及组织培养的初步研究 |
| 【英文题名】 | Studies on Accumulation of Camptothecin and Tissue Culture in Camptotheca Acuminata Decne. |
| 【学科专业】 | 植物学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2005-11-18 |
| 【中关键词】 | 喜树,喜树碱,10-羟基喜树碱,幼茎,果实,组织培养 |
| 【英关键词】 | Camptotheca acuminata Decne.,Camptothecin,10-OH-Camptothecin,Young stem,Fruits,Tissue culture,HPLC,Fluorescence microscopy, |
| 【分类导航】 | 农业科学>农作物>经济作物>药用作物>木本>其他 |
| 【论文摘要】 | 喜树(Camptotheca acuminata Decne.)为蓝果树科(Nyssaceae)落叶乔木,全株含抗肿瘤活性成分——喜树碱。本文以喜树为材料,就以下方面进行了研究:通过组织培养技术,成功地对其进行了喜树愈伤组织的诱导与继代,为以后的悬浮培养做了基础性工作;比较分析了我国十三个省区喜树果实中喜树碱(CPT)和10—羟基喜树碱(HCPT)含量变化规律,为选择喜树优势种源提供了依据;研究了喜树幼枝发育过程中各组织结构变化特别是分泌结构的变化,确定CPT在营养器官中的积累部位和分布规律,为提高CPT的产量和喜树优良品系的选育提供了科学依据。本实验的主要结果如下:
1.选取喜树各部分作为外植体进行愈伤组织的诱导,以芽、幼叶、幼茎为佳,尤以幼茎最佳。选取了BDS,MS两种基本培养基对外植体进行诱导,发现基本培养基对愈伤组织诱导率的影响不显著,但对其生长的影响较为显著,BDS基本培养基更有利于愈伤组织的生长。将NAA、2,4-D、6-BA、KT等生长调节物质分别附加在BDS基本培养基中进行单因子实验,愈伤组织白色、干燥、致密。选取NAA、2,4-D、6-BA、KT等4种生长调节物质以不同组合及浓... |
| 【论文题纲】 |
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第一章 前言 |
12-25 |
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1 喜树活性成分的研究 |
12-19 |
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1．1 喜树碱及其衍生物的分离发现 |
12-13 |
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1．2 喜树碱及其衍生物在喜树体内的分布 |
13-16 |
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1．2．1 喜树碱在喜树中的积累规律 |
14 |
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1．2．2 环境因子及自身因素对喜树体内喜树碱含量的影响 |
14-15 |
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1．2．2．1 环境因子对喜树体内喜树碱含量的影响 |
14-15 |
|
1．2．2．2 自身因素对喜树体内喜树碱含量的影响 |
15 |
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1．2．3 采后贮藏与处理方法对原料中喜树碱含量影响 |
15-16 |
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1．2．4 含有喜树碱及其类似物的其它植物 |
16 |
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1．3 喜树碱及其衍生物的提取、分离与测定 |
16-17 |
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1．3．1 渗流提取与分离 |
16 |
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1．3．2 柱层析提取与分离 |
16 |
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1．3．3 树脂吸附提取 |
16 |
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1．3．4 碱法提取 |
16-17 |
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1．3．5 超声提取 |
17 |
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1．3．6 喜树碱含量的测定方法 |
17 |
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1．4 喜树碱及其衍生物的人工合成与药物开发 |
17-18 |
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1．4．1 喜树碱及其类似物的人工合成 |
17-18 |
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1．4．2 药物开发 |
18 |
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1．5 喜树碱及其类似物的应用 |
18-19 |
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1．5．1 喜树碱及其类似物的医疗作用研究 |
18-19 |
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1．5．1．1 抗肿瘤 |
19 |
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1．5．1．2 喜树碱及其类似物与 HIV/爱滋病(AIDS) |
19 |
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1．5．1．3 治疗其它疾病 |
19 |
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1．5．2 其它作用 |
19 |
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2 喜树组织培养的研究 |
19-21 |
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2．1 固体培养 |
19-20 |
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2．2 悬浮培养 |
20-21 |
|
2．2．1 悬浮培养技术 |
20-21 |
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2．2．2 悬浮培养中喜树碱的分离与纯化方法 |
21 |
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3 喜树其他方面的研究 |
21-25 |
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3．1 喜树的形态结构 |
21-22 |
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3．2 喜树人工栽培的研究 |
22-25 |
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3．2．1 基础研究 |
22-23 |
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3．2．2 栽培技术 |
23-24 |
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3．2．3 采叶技术 |
24-25 |
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第二章 喜树的细胞培养 |
25-32 |
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1 材料和方法 |
25-26 |
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1．1 实验材料 |
25 |
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1．2 实验方法 |
25-26 |
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1．2．1 愈伤组织诱导及继代培养 |
25 |
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1．2．2 喜树愈伤组织形态结构 |
25-26 |
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2 结果与分析 |
26-32 |
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2．1 愈伤组织的诱导 |
26-29 |
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2．1．1 外植体对愈伤组织诱导的影响 |
26 |
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2．1．2 基本培养基对愈伤组织诱导的影响 |
26-27 |
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2．1．3 植物生长调节物质对愈伤组织诱导的效应 |
27-29 |
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2．1．3．1 单因子的诱导作用 |
27-28 |
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2．1．3．2 组合因子的诱导作用 |
28-29 |
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2．2 愈伤组织的继代培养 |
29-30 |
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2．2．1 不同组合因子对愈伤组织继代培养的效应 |
29-30 |
|
2．3 喜树愈伤组织的形态结构 |
30-32 |
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第三章 喜树果实中喜树碱及10-羟基喜树碱的含量分析 |
32-38 |
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1 材料和方法 |
32-34 |
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1．1 实验材料 |
32 |
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1．2 喜树碱及10-羟基喜树碱的提取测定 |
32-34 |
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1．2．1 仪器和试剂 |
32 |
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1．2．2 样品制备 |
32 |
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1．2．3 标准样品制备 |
32-33 |
|
1．2．4 色谱条件 |
33 |
|
1．2．5 定性分析 |
33-34 |
|
1．2．6 定量分析 |
34 |
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1．3 喜树果实的结构 |
34 |
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1．3．1 喜树种子储藏物的组织化学检测 |
34 |
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1．3．2 喜树果实结构观察 |
34 |
|
2 结果与分析 |
34-38 |
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2．1 不同产地的喜树果实中喜树碱及10-羟基喜树碱含量变化 |
34-35 |
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2．2 同一省份内不同地区喜树果实中喜树碱及10-羟基喜树碱含量变化 |
35-36 |
|
2．3 当年喜树果实与放置一年喜树果实中喜树碱及10-羟基喜树碱含量变化 |
36 |
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2．4 果皮及种子中喜树碱及10-羟基喜树碱含量变化 |
36 |
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2．5 喜树果实的结构 |
36-38 |
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2．5．1 喜树种子储藏物 |
36-37 |
|
2．5．2 喜树果实的结构 |
37-38 |
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第四章 喜树幼枝的喜树碱积累及其组织内定位 |
38-44 |
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1 材料与方法 |
38-39 |
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1．1 实验材料 |
38 |
|
1．2 光学显微镜观察 |
38 |
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1．3 不同发育时期茎、叶的结构特征与喜树碱含量的相关性分析 |
38 |
|
1．4 荧光显微镜观察 |
38 |
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1．5 扫描电子显微镜观察 |
38 |
|
1．6 喜树碱的提取和含量分析 |
38-39 |
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2 结果与分析 |
39-44 |
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2．1 茎初生结构的形成 |
39 |
|
2．2 叶的发育 |
39-40 |
|
2．3 分泌结构的形态结构和密度变化 |
40-42 |
|
2．4 分泌道的密度与喜树碱含量的关系 |
42 |
|
2．5 分析 |
42-44 |
|
致谢 |
44-45 |
|
参考文献 |
45-53 |
|
图版及图版说明 |
53-64 |
|
攻读硕士期间的研究成果 |
64 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.171583 |
