| 【中文题名】 | 脑脉通联合骨髓间充质干细胞移植对脑缺血再灌注大鼠微血管损伤的保护作用 |
| 【英文题名】 | The Protective Effect of Naomaitong Assosiated with Mesemchymal Stem Cells Transplantation on Brain Microvessel Damage after Focal Cerebral Ischemia Reperfusion in Rats |
| 【学科专业】 | 中医内科学 |
| 【论文级别】 | 硕士论文 |
| 【投稿时间】 | 2007-9-14 |
| 【中关键词】 | 大鼠,脑缺血再灌注,微血管,基底膜,细胞外基质,明胶酶系统 |
| 【英关键词】 | rat,brain cerebral ischemia with reperfusion,microvessel,basement membrane,extra cellular matrix,collanen,laminin,matrix metallo proteinases,fibrinolysins,Naomaitong,Mesemchymal stem cells, |
| 【分类导航】 | 医药、卫生>神经病学与精神病学>神经病学>脑血管疾病>> |
| 【论文摘要】 |
目的:从脑缺血再灌注后不同时间点大鼠的神经功能、脑组织含水量、脑梗死面积、脑组织病理改变以及BBB通透性、微血管基底膜成分、明胶酶和纤溶酶系统等方面的动态变化,观察大鼠脑缺血再灌注后微血管损伤的特点,揭示其变化规律;通过脑脉通、MSCs移植及其联合应用对上述变化的影响及MSCs在大鼠脑组织内的存活及分化,评价其对脑缺血后微血管损伤的保护作用,并初步揭示其保护机制。
方法:采用青年SD大鼠,195只,雌雄各半,按随机数字表法进行二次随机分组:第一次根据处理因素分为假手术组和手术组,手术组包括模型组、脑脉通组、MSCs移植组、MSCs移植联合脑脉通组,假手术组为15只,其余各组45只大鼠;第二次对手术组根据取材时间点不同又分为7d、14d、28d组,每组每个时间点各15只。采用全骨髓贴壁培养筛选法进行体外MSCs的纯化、培养、增殖、Brdu标记和计数(每0.2ml生理盐水的细胞个数为2×106)。术前4天脑脉通和联合组分别于给予脑脉通(40.5mg/100g/d,40.5mg/ml)灌胃,假手术组、模型组和移植组以同等体积的生理盐水灌胃,每日一次;灌胃第5天参照改良的Longa法用线栓阻塞大鼠大... |
| 【论文题纲】 |
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摘要 |
5-8 |
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英文摘要 |
8-12 |
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前言 |
12-15 |
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实验1 脑脉通联合骨髓间充质干细胞移植对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 |
15-25 |
|
1 材料与方法 |
15-17 |
|
1.1 骨髓间充质干细胞的培养、扩增、标记与移植 |
15 |
|
1.2 主要仪器与试剂 |
15-16 |
|
1.3 动物分组与用药 |
16 |
|
1.4 局灶性脑缺血动物模型 |
16 |
|
1.5 取材与标本处理 |
16 |
|
1.6 指标与测定方法 |
16-17 |
|
1.7 统计学方法 |
17 |
|
2 结果 |
17-25 |
|
2.1 骨髓间充质干细胞的制备 |
17-18 |
|
2.2 术后大鼠生存状况观察 |
18-19 |
|
2.3 神经功能综合评分 |
19-20 |
|
2.4 脑组织含水量 |
20-21 |
|
2.5 脑梗塞面积 |
21-22 |
|
2.6 脑组织病理改变 |
22-25 |
|
实验2 脑脉通联合骨髓间充质干细胞移植对脑缺血再灌注微血管损伤的保护作用 |
25-34 |
|
1 材料与方法 |
25-27 |
|
1.1 骨髓间充质干细胞的培养、扩增、标记与移植 |
25 |
|
1.2 主要仪器与试剂 |
25 |
|
1.3 动物分组与用药 |
25 |
|
1.4 局灶性脑缺血动物模型 |
25 |
|
1.5 取材与标本处理 |
25-26 |
|
1.6 指标与测定方法 |
26 |
|
1.7 统计学方法 |
26-27 |
|
2 结果 |
27-34 |
|
2.1 各组大鼠免疫球蛋白（IgG）表达的变化 |
27 |
|
2.2 各组大鼠Ⅳ型胶原的表达的变化 |
27-28 |
|
2.3 各组大鼠层连蛋白（LN）表达的变化 |
28-30 |
|
2.4 各组大鼠MMP-9表达的变化 |
30 |
|
2.5 各组大鼠 TIMP-1 表达的变化 |
30-31 |
|
2.6 各组大鼠t-PA 表达的变化 |
31-32 |
|
2.7 各组大鼠PAI-1表达的变化 |
32-34 |
|
实验3 脑脉通对脑缺血再灌注损伤大鼠骨髓间充质干细胞移植后血管内皮细胞分化的影响 |
34-39 |
|
1 材料与方法 |
34-36 |
|
1.1 骨髓间充质干细胞的培养、扩增、标记与移植 |
34 |
|
1.2 主要仪器与试剂 |
34 |
|
1.3 动物分组与用药 |
34-35 |
|
1.4 局灶性脑缺血动物模型 |
35 |
|
1.5 取材与标本处理 |
35 |
|
1.6 指标与测定方法 |
35-36 |
|
1.7 统计学方法 |
36 |
|
2 结果 |
36-39 |
|
2.1 一般观察 |
36-37 |
|
2.2 脑组织内 Brdu 细胞数量比较 |
37 |
|
2.3 脑组织 Brdu/FⅧ双标细胞数 量 与 FⅧ(血管内皮细胞)分化率变化 |
37-39 |
|
讨论 |
39-52 |
|
1 中医学对缺血性脑血管疾病的认识 |
39-42 |
|
1.1 中医病名的界定 |
39 |
|
1.2 病因学说 |
39-40 |
|
1.3 病机学说 |
40-42 |
|
2 中医药对脑缺血/再灌注微血管损伤的治疗进展 |
42-44 |
|
2.1 单味中药及其有效部位的研究 |
42-43 |
|
2.2 中药复方的研究 |
43-44 |
|
2.3 针刺的研究 |
44 |
|
3 中药复方脑脉通对脑缺血再灌注损伤的保护作用 |
44-45 |
|
3.1 中风浊毒血瘀病机与解毒降浊治疗 |
44 |
|
3.2 脑脉通的组成及方义分析 |
44-45 |
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4 脑脉通联合MSCs 移植对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 |
45-46 |
|
4.1 一般体征的变化 |
45 |
|
4.2 神经功能评分的变化 |
45 |
|
4.3 脑组织含水量的变化 |
45-46 |
|
4.4 脑梗塞面积的变化 |
46 |
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5 脑脉通联合 MSCs 移植对脑缺血再灌注微血管损伤的保护作用 |
46-50 |
|
5.1 脑组织内 IgG 表达水平变化的意义 |
46-47 |
|
5.2 脑组织Ⅳ型胶原和层粘连蛋白(LN)的表达水平变化的意义 |
47-48 |
|
5.3 脑组织MMP-9 和TIMP-1 表达水平变化的意义 |
48-49 |
|
5.4 脑组织t-PA 和PAI-1 表达水平变化的意义 |
49-50 |
|
6 脑脉通对MSCs 移植后在脑组织内存活及分化的影响 |
50-52 |
|
6.1 脑组织内 Brdu 细胞数量比较 |
50-51 |
|
6.2 脑组织Brdu/F Ⅷ双标细胞数量与FⅧ分化率变化的意义 |
51-52 |
|
结论 |
52-53 |
|
致谢 |
53-54 |
|
参考文献 |
54-59 |
|
附录 |
59-89 |
|
附录1：文献综述 |
59-67 |
|
附录2：实验照片 |
67-89 |
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| 【DOI】 | LunWen.ID:2.2008.171257 |
